论文目录 | |
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 主要英文缩写表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 向光素以及NRL家族主要成员的发现 | 第13-14页 |
| 1.1.1 PHOT1 的发现与鉴定 | 第13页 |
| 1.1.2 RPT2与NPH3 的发现与鉴定 | 第13-14页 |
| 1.1.3 NCH1 的发现与鉴定 | 第14页 |
| 1.2 NRL家族成员参与向光素相关反应的调控 | 第14-20页 |
| 1.2.1 NPH3和RPT2 参与根负向光性反应的调控 | 第15页 |
| 1.2.2 NPH3与RPT2 差异调控下胚轴向光性反应 | 第15-17页 |
| 1.2.3 RPT2与NPH3 对叶片定位和展平至关重要 | 第17-18页 |
| 1.2.4 RPT2与NCH1 对叶绿体聚光反应的调控有重要作用 | 第18-19页 |
| 1.2.5 RPT2 不参与气孔开放的调控 | 第19-20页 |
| 1.3 关于NRL家族成员研究进展的思考 | 第20-21页 |
| 1.4 基于图位克隆和二代测序的抑制子筛选技术 | 第21-22页 |
| 1.5 基因RPT2 抑制子的筛选依据及研究意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| 2.1 实验所用材料 | 第24页 |
| 2.1.1 拟南芥材料 | 第24页 |
| 2.1.2 质粒与菌株 | 第24页 |
| 2.2 实验所用仪器与试剂 | 第24-26页 |
| 2.2.1 仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.2 试剂来源 | 第25页 |
| 2.2.3 常用溶液的配制方法 | 第25-26页 |
| 2.3 实验中所用的引物合成 | 第26-27页 |
| 2.4 技术与方法 | 第27-32页 |
| 2.4.1 拟南芥的繁殖 | 第27-28页 |
| 2.4.2 基于单侧蓝光处理的筛选条件 | 第28页 |
| 2.4.3 拟南芥DNA的粗提取 | 第28-29页 |
| 2.4.4 载体的构建以及转基因植株的获得 | 第29-30页 |
| 2.4.5 拟南芥的杂交技术 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-60页 |
| 3.1 突变体的筛选和遗传鉴定 | 第32-39页 |
| 3.1.1 向光弯曲恢复突变体的筛选 | 第32-33页 |
| 3.1.2 向光弯曲恢复突变体的遗传稳定性鉴定和弯曲度分析 | 第33-34页 |
| 3.1.3 稳定遗传突变体在单侧弱蓝光处理下的表型鉴定 | 第34-36页 |
| 3.1.4 稳定遗传突变体中rpt2 纯合突变背景的鉴定 | 第36-37页 |
| 3.1.5 稳定遗传突变体与rpt2 回交F1 代的遗传分析 | 第37-38页 |
| 3.1.6 稳定遗传突变体回交F2 代的分离比统计 | 第38-39页 |
| 3.2 突变体line-52的BSA分析以及验证 | 第39-48页 |
| 3.2.1 BSA分析的送样准备以及结果验证 | 第39-41页 |
| 3.2.2 BSA候选基因的纯合体鉴定以及双突变体的构建 | 第41页 |
| 3.2.3 候选基因单突变体的强蓝光表型鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.4 候选基因单突变体的弱蓝光表型鉴定 | 第42-43页 |
| 3.2.5 BSA候选基因的表达量检测 | 第43-46页 |
| 3.2.6 候选基因的回补和超表达载体构建 | 第46-48页 |
| 3.3 突变体line-52 的图位克隆 | 第48-57页 |
| 3.3.1 克隆RPT2 基因抑制子的群体构建 | 第48-49页 |
| 3.3.2 抑制子突变体line-52 的粗定位结果 | 第49-50页 |
| 3.3.3 抑制子的细定位结果 | 第50-51页 |
| 3.3.4 从突变体角度对line-52 进行克隆的依据 | 第51-52页 |
| 3.3.5 突变体line-52 混池粗定位结果 | 第52-53页 |
| 3.3.6 突变体line-52 细定位结果 | 第53-55页 |
| 3.3.7 优化建库条件对细定位结果进行验证 | 第55-56页 |
| 3.3.8 对定位区间测序寻找突变基因 | 第56-57页 |
| 3.4 突变体line-52 的其他向光性表型分析 | 第57-60页 |
| 3.4.1 叶绿体运动的表型探索 | 第57-58页 |
| 3.4.2 莲座叶的表型探索 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 4.1 RPT2在PHOT1 介导的向光弯曲反应中处于中枢地位 | 第60页 |
| 4.2 RPT2 抑制子基因的筛选 | 第60-61页 |
| 4.3 RPT2 抑制子基因的其他功能预测 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
