论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
第一章 线粒体自噬与细胞自噬 | 第13-23页 |
1 自噬与线粒体自噬 | 第13-14页 |
2 线粒体自噬的调控途径 | 第14-17页 |
2.1 Pink1-Parkin介导的线粒体自噬 | 第14-16页 |
2.2 Nix/Bnip3介导的线粒体自噬 | 第16-17页 |
2.3 缺氧介导的线粒体自噬 | 第17页 |
3 线粒体自噬与细胞凋亡 | 第17-18页 |
4 线粒体自噬与肿瘤 | 第18-23页 |
4.1 神经母细胞瘤 | 第18-19页 |
4.2 结直肠癌 | 第19页 |
4.3 胶质母细胞瘤 | 第19-20页 |
4.4 乳腺癌 | 第20页 |
4.5 肺癌 | 第20-21页 |
4.6 卵巢癌 | 第21页 |
4.7 黑色素瘤 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-32页 |
1 实验仪器与试剂 | 第23-28页 |
1.1 主要仪器 | 第23-24页 |
1.2 主要试剂 | 第24-26页 |
1.3 常用试剂配制方法 | 第26-27页 |
1.4 细胞培养液配制 | 第27-28页 |
2 实验方法 | 第28-31页 |
2.1 细胞培养 | 第28页 |
2.2 细胞增殖活性检测 | 第28页 |
2.3 细胞形态学观察 | 第28-29页 |
2.3.1 相差显微镜观察细胞形态 | 第28-29页 |
2.3.2 瑞氏-姬姆萨染色观察细胞凋亡 | 第29页 |
2.3.3 激光共聚焦显微镜观察线粒体与自噬体共定位 | 第29页 |
2.3.4 透射电镜观察细胞超微结构 | 第29页 |
2.4 FCM检测 | 第29-30页 |
2.4.1 Annexin V-PE/7-AAD检测细胞凋亡 | 第29页 |
2.4.2 细胞周期测定 | 第29-30页 |
2.5 Western-blotting测定凋亡相关蛋白及自噬相关蛋白表达 | 第30-31页 |
2.5.1 蛋白样品制备 | 第30页 |
2.5.2 BCA法定量蛋白 | 第30页 |
2.5.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30-31页 |
2.5.4 转膜 | 第31页 |
2.5.5 封闭及抗体结合 | 第31页 |
2.5.6 发光检测与分析 | 第31页 |
3 统计学分析 | 第31-32页 |
第三章 结果 | 第32-47页 |
1 三氧化二砷及二甲双胍抑制HeLa细胞增殖活性 | 第32-34页 |
2 三氧化二砷和二甲双胍诱导HeLa细胞发生凋亡 | 第34-39页 |
2.1 细胞形态学的改变 | 第34-35页 |
2.2 FCM检测凋亡 | 第35-36页 |
2.3 细胞周期改变 | 第36-37页 |
2.4 凋亡相关蛋白的变化 | 第37-39页 |
3 三氧化二砷和二甲双胍诱导HeLa细胞发生线粒体自噬 | 第39-45页 |
3.1 自噬相关蛋白的变化 | 第39-42页 |
3.2 线粒体自噬形态变化 | 第42-43页 |
3.3 线粒体自噬相关蛋白变化 | 第43-45页 |
4 线粒体自噬和凋亡过程中Pink1-Parkin通路变化 | 第45-47页 |
4.1 Parkin与线粒体发生共定位 | 第45-46页 |
4.2 Pink1-Parkin途径蛋白变化 | 第46-47页 |
第四章 讨论 | 第47-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
缩略词表 | 第58-60页 |
在学期间的研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |