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猪靶向PRRS病毒shRNA转基因克隆胚胎的体外生产与重编程发育

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猪靶向PRRS病毒shRNA转基因克隆胚胎的体外生产与重编程发育
论文目录
 
摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
符号及縮略语第15-17页
前言第17-19页
第一部分 文献综述第19-63页
  第一章 体细胞核移植与转基因动物生产第19-47页
    1 动物体细胞核移植第19-20页
    · 体细胞核移植技术研究简史第20-29页
      · 体细胞核移植程序第20-26页
        · 受体细胞准备第21-22页
        · 供核细胞的选择第22-23页
        · 重构胚的构建第23页
        · 重构胚激活第23-25页
        · 克隆胚胎培养第25-26页
      · 体细胞核移植重编程机理第26-29页
        · DNA甲基化第26-27页
        · 组蛋白乙酰化第27-28页
        · 基因印迹第28-29页
        · 端粒问题第29页
    2 转基因动物生产第29-34页
      · 转基因动物的制作方法第29-32页
        · 原核注射法第29-30页
        · 病毒载体法第30页
        · 精子载体法第30-31页
        · 胚胎干细胞法第31页
        · 体细胞核移植法第31-32页
      · 转基因动物应用第32-34页
        · 在生命科学研究领域的应用第32页
        · 在医学研究领域的应用第32-33页
        · 在畜牧改良上的应用第33页
        · 动物抗病育种第33-34页
        · 动物生物反应器第34页
    3 影响转基因克隆动物生产的因素第34-37页
      · 克隆程序第34-35页
        · 受体卵母细胞质量第35页
        · 供核细胞第35页
      · 表观遗传修饰对外源基因表达的影响第35-37页
    参考文献第37-47页
  第二章 RNAi技术在动物抗病毒研究中的应用前景第47-63页
    1 RNAi技术第47-48页
    2 RNAi技术原理第48-50页
    3 RNAi技术在动物抗病毒研究中的应用第50-53页
    4 病毒逃逸RNAi第53-54页
    5 基于RNAi技术的转基因动物生产第54-56页
    6 RNAi的问题和展望第56-57页
    参考文献第57-63页
第二部分 试验研究第63-131页
  第三章 靶向PRRSV的shRNA转基因表达载体构建及其功能验证第63-79页
    摘要第63-64页
    1 材料第64-65页
    2 方法第65-72页
    3 结果第72-76页
      · shRNA转基因表达载体构建结果第72-75页
      · shRNA转基因表达载体在Marc145细胞上抑制PRRSV复制试验第75-76页
    4 讨论第76-77页
    5 小结第77-78页
    参考文献第78-79页
  第四章 核供体细胞对猪转基因克隆胚胎体外生产的影响第79-97页
    摘要第79-80页
    1 材料第80-84页
    2 方法第84-88页
    3 结果第88-92页
      · 猪成纤维细胞建系第88-89页
      · G418筛选第89-90页
      · 阳性细胞克隆的PCR鉴定第90-91页
      · 转基因核供体细胞对猪克隆胚胎发育的影响第91-92页
    4 讨论第92-94页
      · 猪成纤维细胞的分离培养第92-93页
      · 转基因阳性细胞克隆的筛选、传代培养和保存第93页
      · 不同转基因供核细胞对猪克隆胚发育的影响第93-94页
    5 小结第94-95页
    参考文献第95-97页
  第五章 猪转基因克隆胚胎体外发育的研究第97-109页
    摘要第97-98页
    1 材料第98页
    2 方法第98-100页
    3 结果第100-102页
      · 培养液对猪孤雌激活胚胎体外发育的影响第100页
      · 激活方法对猪转基因克隆胚胎体外发育的影响第100-101页
      · 曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎体外发育的影响第101-102页
    4 讨论第102-105页
      · 胚胎体外培养液第102-103页
      · 重构胚激活第103-104页
      · 曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎体外发育的影响第104-105页
    5 小结第105-106页
    参考文献第106-109页
  第六章 曲古抑菌素A影响猪转基因克隆胚胎发育的机理研究第109-131页
    摘要第109-110页
    1 材料第110-111页
    2 方法第111-115页
    3 结果第115-121页
      · 曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎组蛋白乙酰化水平的影响第115-117页
      · 曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎发育相关基因表达的影响第117-118页
      · 曲古抑菌素A对猪转基因克隆胚胎外源基因表达的影响第118-121页
    4 讨论第121-125页
      · 猪转基因克隆胚胎表观遗传修饰状态与胚胎的发育第121-122页
      · 猪转基因克隆胚胎发育相关基因表达与胚胎的发育第122-124页
      · 猪转基因克隆胚胎表观遗传修饰状态与外源基因表达第124-125页
    5 小结第125-126页
    参考文献第126-131页
全文结论第131-133页
创新点第133-135页
攻读博士学位期间论文发表情况第135-137页
致谢第137 页

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