论文目录 | |
摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
1 前言 | 第17-24页 |
1.1 植物对低磷胁迫的响应 | 第17-19页 |
1.1.1 根形态结构的变化 | 第17-18页 |
1.1.2 磷转运蛋白表达量的增加 | 第18页 |
1.1.3 酸性磷酸酶的分泌和增加 | 第18-19页 |
1.1.4 花青素和淀粉含量的增加 | 第19页 |
1.2 植物对无机磷的吸收和转运的分子机制 | 第19-20页 |
1.2.1 PHT家族的磷转运蛋白 | 第19-20页 |
1.2.2 含SPX结构域的磷转运蛋白 | 第20页 |
1.2.3 其他磷转运蛋白 | 第20页 |
1.3 植物磷信号的调控网络 | 第20-22页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-44页 |
2.1 植物材料与处理 | 第24页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 高磷和低磷的处理 | 第24页 |
2.2 试验方法 | 第24-43页 |
2.2.1 核酸提取及质量检测 | 第24-26页 |
2.2.2 基因克隆 | 第26-27页 |
2.2.3 载体的构建 | 第27-29页 |
2.2.4 亚细胞定位 | 第29页 |
2.2.5 转录活性分析 | 第29-30页 |
2.2.6 双分子荧光互补 | 第30-31页 |
2.2.7 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
2.2.8 酵母单杂交 | 第32-33页 |
2.2.9 蛋白质的原核表达和纯化 | 第33-34页 |
2.2.10 凝胶迁移 | 第34-37页 |
2.2.11 农杆菌介导的森林草莓遗传转化 | 第37-38页 |
2.2.12 转基因植株的鉴定 | 第38页 |
2.2.13 磷含量的测定 | 第38-39页 |
2.2.14 叶绿素含量的测定 | 第39页 |
2.2.15 净光合速率的测定 | 第39页 |
2.2.16 总糖含量的测定 | 第39-40页 |
2.2.17 可滴定酸的测定 | 第40页 |
2.2.18 可溶性固形物含量的测定 | 第40页 |
2.2.19 维生素C含量的测定 | 第40-41页 |
2.2.20 高效液相色谱法测定糖含量 | 第41页 |
2.2.21 5’RLM-RACE | 第41-43页 |
2.3 统计学分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-76页 |
3.1 森林草莓FvPHR1 基因的克隆鉴定与功能分析 | 第44-52页 |
3.1.1 森林草莓中MYB-CC家族成员的鉴定与分析 | 第44-46页 |
3.1.2 FvPHR1 基因的克隆及氨基酸序列分析 | 第46页 |
3.1.3 FvPHR1 基因的系统进化分析 | 第46-48页 |
3.1.4 FvPHR1 是核蛋白 | 第48页 |
3.1.5 FvPHR1 的转录活性分析 | 第48页 |
3.1.6 FvPHR1 在植物体内形成同源二聚体 | 第48-50页 |
3.1.7 FvPHR1 基因在森林草莓不同器官的表达模式 | 第50页 |
3.1.8 FvPHR1 基因的功能鉴定 | 第50-52页 |
3.2 过表达mi R399a提高植株磷含量和果实品质 | 第52-59页 |
3.2.1 FvmiR399a的表达模式 | 第52-53页 |
3.2.2 miR399a过量表达森林草莓植株的获得与鉴定 | 第53-55页 |
3.2.3 过表达mi R399a影响草莓植株磷含量和体内磷平衡 | 第55-56页 |
3.2.4 miR399a过表达森林草莓植株的表型鉴定 | 第56-57页 |
3.2.5 过表达mi R399a提高森林草莓果实品质 | 第57-59页 |
3.3 草莓FvPHO2 基因的克隆鉴定与功能分析 | 第59-69页 |
3.3.1 FvPHO2 的克隆与分析 | 第59-62页 |
3.3.2 FvPHO2 基因表达特性分析 | 第62-64页 |
3.3.3 FvPHO2 过表达、沉默和基因编辑植株的获得 | 第64-68页 |
3.3.4 FvPHO2 基因功能的鉴定 | 第68-69页 |
3.4 PHR1-miR399-PHO2 模块调控森林草莓磷含量的机理 | 第69-76页 |
3.4.1 森林草莓FvPHR1 正调控Fv MIR399a的表达 | 第69-72页 |
3.4.2 森林草莓FvPHO2是miR399 的靶基因 | 第72-76页 |
4 讨论 | 第76-80页 |
4.1 PHR1 的表达特性与作用 | 第76-77页 |
4.2 低磷条件下miR399a的表达模式 | 第77页 |
4.3 miR399-PHO2 模块对森林草莓植株磷含量的调控 | 第77-78页 |
4.4 miR399a对草莓果实品质的调控作用机制 | 第78页 |
4.5 磷信号与其他信号通路的关系 | 第78-79页 |
4.6 PHR1-miR399-PHO2 模块参与森林草莓磷信号调控网络的假设模型图 | 第79-80页 |
5 结论与创新点 | 第80-81页 |
5.1 结论 | 第80页 |
5.2 创新点 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-93页 |
附录 | 第93-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第105-106页 |