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人血管内皮生长因子(hVEGF165)融合蛋白的表达纯化
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人血管内皮生长因子(hVEGF165)融合蛋白的表达纯化
论文目录
 
中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
英文缩略词第10-11页
前言第11-13页
·材料与仪器第13-16页
　　· 实验材料第13页
　　· 实验仪器第13-14页
　　· 主要溶液及试剂配制第14-16页
· 方法第16-27页
　　· 从人大肠癌组织总 RNA 的制备第16页
　　· PCR 扩增目的片段第16-18页
　　· DNA 片段的纯化、回收第18页
　　· 细菌感受态的制备及质粒的转化第18-19页
　　· 质粒的提取和纯化第19-21页
　　· 重组原核表达载体的构建、筛选和鉴定第21-22页
　　· DNA 序列测定第22页
　　· 重组质粒pET-156/VEGF_(165) 转化入表达工程菌Bl-21(DE3)第22页
　　· VEGF_(165) 融合蛋白的表达及鉴定第22-24页
　　· VEGF_(165) 融合蛋白表达条件的优化第24页
　　· VEGF_(165) 融合蛋白的表达部位鉴定第24页
　　· 细菌收集与包涵体的提取第24-25页
　　· 包涵体的洗涤与溶解第25页
　　· 包涵体的复性第25页
　　· 融合蛋白的His Sepharose 亲和层析第25-26页
　　· 纯化融合蛋白的Western-blot 鉴定第26-27页
· 结果第27-39页
　　· 大肠癌组织总 RNA 的制备第27页
　　· VEGF_(165) 基因 PCR 扩增第27-28页
　　· 重组表达载体 pET-15b/VEGF165 的双酶切鉴定第28-29页
　　· 重组表达载体目的基因的测序鉴定第29-32页
　　· 重组菌BL21/pET-15b/VEGF165的诱导表达第32-35页
　　· 包涵体的分离、洗涤和溶解第35-36页
　　· VEGF_(165)融合蛋白的分离纯化第36-39页
·讨论第39-44页
　　· pET-15b/VEGF_(165) 融合基因的构建策略第39页
　　· 表达载体的选择及构建第39-40页
　　· VEGF_(165) 融合蛋白的表达及优化第40-41页
　　· VEGF_(165) 融合蛋白表达形式的鉴定第41页
　　· 包涵体蛋白的提取第41-42页
　　· 包涵体的变性与复性第42-43页
　　· 融合蛋白的亲和层析第43-44页
结论第44-45页
参考文献第45-49页
致谢第49-50页
综述第50-59页
　　参考文献第57-59页

本篇论文共59页，点击这进入下载页面。
 
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