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RGD-Melittin融合基因的表达纯化及活性测定
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RGD-Melittin融合基因的表达纯化及活性测定
论文目录
中文摘要
第1-9页
Abstract
第9-11页
第一章 引言
第11-30页
1 Melittin的研究进展
第11-23页
· 蜂毒
第11-15页
· Melittin
第15-23页
· 研究展望
第23页
2 RGD序列肽的研究进展
第23-30页
· RGD三肽识别序列
第24页
· RGD肽抑制肿瘤的作用
第24-30页
· 研究展望
第30页
第二章 Melittin基因的克隆
第30-39页
1 实验材料
第30页
2 实验方法
第30-36页
· 中华蜜蜂毒腺细胞总RNA的抽提
第30-31页
· RNA浓度及纯度测定
第31页
· 引物合成
第31-32页
· RT-PCR
第32-33页
· 2%琼脂糖凝胶电泳
第33页
· 回收PCR产物
第33页
· PUCT载体构建
第33-34页
· 重组质粒(pUCT-Mel)的构建与转化
第34页
· 重组子(pUCT-Mel)的鉴定
第34-36页
3 结果与分析
第36-39页
· 中蜂毒腺总RNA样品纯度与浓度电泳检测
第36页
· 中蜂Melittin成熟区序列的PCR产物琼脂糖电泳结果
第36-37页
· RT-PCR产物纯化
第37页
· 连接与转化
第37-38页
· 重组子(pUCT-Mel)的鉴定
第38-39页
· 讨论
第39页
第三章 RGD序列肽的合成与RGD-Mel的重组表达
第39-44页
1 实验材料
第39页
2 实验方法
第39-41页
· RGD序列肽的合成
第39-40页
· RGD-Mel融合基因的构建
第40页
· 重组质粒的构建及转化
第40页
· RGD-Mel融合基因的诱导表达
第40页
· SDS-PAGE和Western blot分析
第40-41页
· 重组蛋白RGD-Mel的纯化
第41页
· 体外活性检测
第41页
3 结果与分析
第41-44页
· RGD-Mel融合基因的构建
第41-42页
· 重组表达质粒的酶切鉴定
第42页
· RGD-Mel融合基因的阳性克隆测序
第42页
· 重组表达产物RGD-Mel的SDS-PAGE电泳检测和Western blot分析
第42-43页
· 体外生物活性检测
第43-44页
· 讨论
第44页
第四章 结论及研究进展
第44-47页
1 结论
第44-46页
2 后续研究
第46-47页
参考文献
第47-56页
附录
第56-58页
致谢
第58页
本篇论文共
58
页,
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