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低氧对淋巴细胞增殖活化和巨噬细胞前炎症因子分泌的影响及机制

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低氧对淋巴细胞增殖活化和巨噬细胞前炎症因子分泌的影响及机制
论文目录
 
中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
前言第9-12页
第一部分 低氧及低氧预处理后淋巴细胞[Ca~(2+)]i变化与淋巴细胞增殖活化的关系第12-23页
  一、 实验材料第12-13页
    1 主要仪器第12页
    2 主要试剂第12-13页
    3 实验取材第13页
  二、 实验方法第13-16页
    1 淋巴细胞分离培养第13页
    2 实验分组第13页
    3 Fura-2/AM荧光分光光度法检测[Ca~(2+)]i第13-14页
    4 ELISA法检测IgG第14页
    5 ELISA法检测IL-2第14-15页
    6 MTT法检测淋巴细胞增殖率第15-16页
    7 统计分析第16页
  三、 实验结果第16-19页
    1 细胞内Ca~(2+)浓度检测结果第16-17页
    2 IgG分泌量检测结果第17页
    3 IL-2分泌量检测结果第17-18页
    4 淋巴细胞增殖率检测结果第18-19页
  四、 讨论第19-22页
  小节第22-23页
第二部分 低氧对Mφ前炎症因子分泌的影响第23-37页
  一、 实验材料第23-24页
    1 主要仪器第23页
    2 主要试剂第23-24页
    3 实验取材第24页
  二、 实验方法第24-27页
    1 Mφ分离培养第24页
    2 非特异性酯酶染色法鉴定Mφ第24页
    3 实验分组第24-25页
    4 ELISA法检测TNF-α第25页
    5 ELISA法检测IL-6第25页
    6 Mφ总RNA分离与提取第25-26页
    7 RNA浓度分析和纯度鉴定第26页
    8 甲醛变性电泳鉴定RNA完整性第26页
    9 RT-PCR检测TNF-α mRNA和IL-6 mRNA表达水平第26-27页
    10 统计分析第27页
  三、 实验结果第27-35页
    1 Mφ培养第28页
    2 Mφ鉴定结果第28-29页
    3 不同氧浓度条件下TNF-α和IL-6的分泌量第29页
    4 不同低氧时间条件下TNF-α和IL-6的分泌量第29-30页
    5 RNA纯度鉴定的结果第30页
    6 RNA完整性鉴定的结果第30-31页
    7 不同氧浓度条件下TNF-α mRNA和IL-6.mRNA的表达量第31-33页
    8 不同低氧时间条件下TNF-α mRNA和IL-6.mRNA的表达量第33-35页
  四、 讨论第35-36页
  小节第36-37页
第三部分 低氧后Mφ前炎症因子分泌增加的机制-NF-κB信号转导通路的激活第37-51页
  一、 实验材料第37-38页
    1 主要仪器第37页
    2 主要试剂第37-38页
    3 实验取材第38页
  二、 实验方法第38-43页
    1 Mφ分离培养第38页
    2 实验分组及检测指标第38-39页
    3 荧光分光光度法检测细胞内ROS水平第39页
    4 胞浆蛋白提取方法第39-40页
    5 细胞核内蛋白提取方法第40页
    6 考马斯亮蓝蛋白定量法第40-41页
    7 Western blotting法检测IκBα酪氨酸磷酸化水平第41-43页
    8 Western blotting法检测细胞核内NF-κB激活量第43页
    9 RT-PCR法检测NF-κBp56的转录水平第43页
    10 统计分析第43页
  三、 实验结果第43-48页
    1 细胞内ROS水平检测结果第43-44页
    2 IκBα酪氨酸磷酸化水平检测结果第44页
    3 细胞核内NF-κB激活量第44-46页
    4 抗氧化剂对低氧时IκBα磷酸化水平的影响第46页
    5 酪氨酸蛋白激酶抑制剂对低氧时Mφ核内NF-κB激活量的影响第46-47页
    6 NF-κBp65转录水平检测结果第47-48页
  四、 讨论第48-50页
  小节第50-51页
结论第51-53页
参考文献第53-59页
附录第59-61页
致谢第61-62页
文献综述第62-72页
硕士期间发表和待发表的文章及参加的学术会议第72-74页

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