论文目录 | |
| 提要 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-21页 |
| 英文缩写词表 | 第21-23页 |
| 引言 | 第23-25页 |
| 第一篇 文献综述 | 第25-49页 |
| 1 中性粒细胞 | 第25-30页 |
| 1.1 中性粒细胞概述 | 第25-26页 |
| 1.2 中性粒细胞的趋化 | 第26-27页 |
| 1.3 中性粒细胞分型 | 第27-28页 |
| 1.4 中性粒细胞在感染中的作用 | 第28-30页 |
| 1.5 中性粒细胞在无菌性炎症中的作用 | 第30页 |
| 2 TLR9及其介导的固有免疫反应 | 第30-40页 |
| 2.1 TLR9的定位 | 第31-32页 |
| 2.2 TLR9的结构 | 第32-35页 |
| 2.3 TLR9的转运 | 第35-36页 |
| 2.4 TLR9活化后的信号转导 | 第36-38页 |
| 2.5 TLR9在相关性疾病中的作用 | 第38-40页 |
| 3 免疫反应性核酸 | 第40-44页 |
| 3.1 分类及作用机制 | 第40-42页 |
| 3.1.1 免疫刺激性核酸 | 第40-41页 |
| 3.1.2 免疫抑制性核酸 | 第41-42页 |
| 3.2 免疫刺激性核酸的应用性研究 | 第42-43页 |
| 3.3 免疫抑制性核酸的应用性研究 | 第43-44页 |
| 4 全身性炎症应答综合征 | 第44-49页 |
| 4.1 定义 | 第44-45页 |
| 4.2 诊断标准 | 第45页 |
| 4.3 发病机制 | 第45-46页 |
| 4.4 SIRS的分期 | 第46页 |
| 4.5 治疗 | 第46-49页 |
| 第二篇 研究内容 | 第49-113页 |
| 第一章 致死性休克模型小鼠的制备及局部和全身炎症应答的研究 | 第49-75页 |
| 1 实验材料 | 第49-50页 |
| 1.1 实验动物 | 第49页 |
| 1.2 实验试剂 | 第49-50页 |
| 1.3 实验器材 | 第50页 |
| 2 实验方法 | 第50-54页 |
| 2.1 模型鼠建模流程及腹腔注射方法 | 第50页 |
| 2.2 模型鼠主要器官的组织病理学分析 | 第50页 |
| 2.3 小鼠外周血涂片的制备 | 第50-51页 |
| 2.4 小鼠外周血白细胞的分离 | 第51页 |
| 2.5 模型鼠PLCs的制备 | 第51页 |
| 2.6 模型鼠PLCs的形态学检测及计数分析 | 第51-52页 |
| 2.7 流式细胞术分析PLCs中性粒细胞比例 | 第52页 |
| 2.8 细胞因子mRNA水平的检测 | 第52-54页 |
| 2.8.1 总RNA的提取 | 第52页 |
| 2.8.2 RNA逆转录合成c DNA | 第52-53页 |
| 2.8.3 实时定量PCR | 第53-54页 |
| 2.9 PLCs细胞内TNFα 和IL-10 蛋白水平的检测 | 第54页 |
| 2.10 统计分析 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-70页 |
| 3.1 D-Gal N剂量的摸索及模型的建立 | 第54-56页 |
| 3.2 模型鼠临床表现 | 第56-59页 |
| 3.3 模型鼠重要器官组织病理学分析 | 第59页 |
| 3.4 模型鼠外周血中白细胞数目及细胞因子水平分析 | 第59-61页 |
| 3.5 模型鼠PLCs免疫细胞分群及比例的分析 | 第61-67页 |
| 3.5.1 模型鼠PLCs总数 | 第61-62页 |
| 3.5.2 模型鼠PLCs中的细胞类型及比例分析 | 第62-65页 |
| 3.5.3 模型鼠PLCs的中性粒细胞的比例分析 | 第65-67页 |
| 3.6 小鼠PLCs炎症细胞因子表达水平的分析 | 第67-70页 |
| 3.6.1 小鼠PLCs炎症因子mRNA表达水平的分析 | 第67-68页 |
| 3.6.2 小鼠PLCs的TNFα 和IL-10 蛋白表达水平的检测 | 第68-70页 |
| 4 讨论 | 第70-73页 |
| 4.1 TLR9介导的致死性休克小鼠模型模拟了临床SIRS的发生 | 第70-71页 |
| 4.2 模型鼠腹腔PMNs可能是参与局部炎症反应的主要细胞 | 第71-72页 |
| 4.3 PLCs细胞因子的失衡是模型鼠全身性炎症反应的导火索 | 第72-73页 |
| 5 小结 | 第73-75页 |
| 第二章 sTLR9~+ PMNs在模型鼠全身炎症应答中的作用 | 第75-97页 |
| 1 实验材料 | 第75-76页 |
| 1.1 实验试剂 | 第75页 |
| 1.2 实验器材 | 第75-76页 |
| 2 实验方法 | 第76-78页 |
| 2.1 PLCs中sTLR9~+ PMNs比例及其sTLR9表达量的检测 | 第76页 |
| 2.2 流式细胞术分选模型鼠PLCs中性粒细胞和B细胞 | 第76页 |
| 2.3 PLCs中PMNs和B细胞TNFα 和IL-10 的mRNA水平的检测 | 第76页 |
| 2.4 模型鼠灌洗去除腹腔PMNs | 第76-77页 |
| 2.5 模型鼠过继回输富含PMNs的PLCs | 第77页 |
| 2.6 模型鼠PLCs中PMNs的分离 | 第77-78页 |
| 2.7 统计分析 | 第78页 |
| 3 结果 | 第78-92页 |
| 3.1 改变腹腔PMNs数量对模型鼠生存期的影响 | 第78-82页 |
| 3.1.1 去除PMNs为主的腹腔细胞对模型鼠生存期的影响 | 第78-79页 |
| 3.1.2 过继回输富含PMNs的PLCs对模型鼠生存期的影响 | 第79-82页 |
| 3.2 模型鼠PLCs及其中PMNs和non-PMNs的TNFα 和IL-10 表达水平的分析 | 第82-85页 |
| 3.2.1 模型鼠PLCs的TNFα 和IL-10 蛋白表达水平分析 | 第82-83页 |
| 3.2.2 模型鼠PLCs中PMNs和B细胞中TNFα、IL-10 mRNA表达水平的分析 | 第83-84页 |
| 3.2.3 模型鼠PLCs中PMNs和non-PMNs的TNFα 和IL-10蛋白表达水平的分析 | 第84-85页 |
| 3.3 过继回输腹腔PMNs的模型鼠生存期的影响 | 第85-86页 |
| 3.4 模型鼠腹腔sTLR9~+ PMNs sTLR9及其细胞因子表达水平的分析 | 第86-92页 |
| 3.4.1 模型鼠腹腔PMNs sTLR9表达水平及动态变化的分析 | 第87-90页 |
| 3.4.2 模型鼠腹腔sTLR9＋ PMNs和sTLR9－ PMNs的TNFα和IL-10 表达水平的分析 | 第90-92页 |
| 4 讨论 | 第92-96页 |
| 4.1 模型鼠早期趋化的腹腔PMNs具保护作用 | 第92-93页 |
| 4.2 模型鼠PLCs中PMNs的作用与其产生细胞因子有关 | 第93-94页 |
| 4.3 sTLR9~+ PMNs可能是保护SIRS模型鼠的一型主要的PMNs | 第94-96页 |
| 5 小结 | 第96-97页 |
| 第三章 利用CCT ODN研究sTLR9~+ PMNs在SIRS模型鼠中的作用及可能机制 | 第97-113页 |
| 1 实验材料 | 第97-98页 |
| 1.1 实验试剂 | 第97页 |
| 1.2 实验器材 | 第97-98页 |
| 2 实验方法 | 第98-100页 |
| 2.1 CCT ODN干预模型鼠 | 第98页 |
| 2.2 PLCs中PMNs比例、sTLR9~+ PMNs sTLR9表达的检测 | 第98页 |
| 2.3 CCT ODN干预的模型鼠PLCs TNFα 和IL-10 mRNA水平的检测 | 第98页 |
| 2.4 模型鼠PLCs体外培养和处理 | 第98-99页 |
| 2.5 小鼠外周血白细胞的分离和培养 | 第99页 |
| 2.6 氯喹预处理后外周血sTLR9~+ PMN sTLR9表达的检测 | 第99页 |
| 2.7 统计分析 | 第99-100页 |
| 3 结果 | 第100-109页 |
| 3.1 CCT ODN对模型鼠全身及局部炎症应答的影响 | 第100-104页 |
| 3.1.1 CCT ODN对模型鼠生存期的影响 | 第100-101页 |
| 3.1.2 CCT ODN对模型鼠临床表现的影响 | 第101-102页 |
| 3.1.3 CCT ODN对模型鼠肝脏病变的影响 | 第102-103页 |
| 3.1.4 CCT ODN对模型鼠PLCs的TNFα 和IL-10 表达水平的影响 | 第103-104页 |
| 3.2 CCT ODN对模型鼠腹腔sTLR9~+ PMNs sTLR9表达的影响 | 第104-105页 |
| 3.3 体外应用CCT ODN对PMNs sTLR9表达水平的影响及可能机制 | 第105-109页 |
| 3.3.1 体外应用CCT ODN对腹腔sTLR9~+ PMNs sTLR9表达水平的影响 | 第105-107页 |
| 3.3.2 体外应用CCT ODN对外周血sTLR9~+ PMNs的sTLR9表达水平的影响 | 第107-108页 |
| 3.3.3 体外外周血PMNs sTLR9表达水平变化与内体TLR9活化之间关系的研究 | 第108-109页 |
| 4 讨论 | 第109-112页 |
| 4.1 CCT ODN可能靶向sTLR9~+ PMNs发挥保护模型鼠的作用 | 第109-110页 |
| 4.2 CCT ODN可能通过抑制sTLR9~+PMNs sTLR9表达下调发挥免疫调节作用 | 第110-111页 |
| 4.3 sTLR9~+ PMNs sTLR9表达的变化与其内体TLR9活化有关 | 第111-112页 |
| 5 小结 | 第112-113页 |
| 结论 | 第113-115页 |
| 创新点 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-131页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133页 |
