论文目录 | |
中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
引言 | 第10-12页 |
文献综述 | 第12-24页 |
1. 大豆花叶病毒病的抗病基因 | 第12-18页 |
2. 抗大豆花叶病毒病大豆品种的获得 | 第18-20页 |
2.1 通过含抗病基因大豆品种的杂交 | 第18页 |
2.2 对大豆花叶病毒基因的沉默 | 第18-20页 |
2.3 利用大豆自身的基因,通过转基因技术获得抗病品系 | 第20页 |
3. 基因芯片技术和转录组测序技术 | 第20-22页 |
4. AMP(抗菌肽)和GAST | 第22-24页 |
本研究的背景、目的和意义 | 第24-25页 |
实验材料与方法 | 第25-37页 |
1. 实验材料 | 第25页 |
2. 实验方法 | 第25-37页 |
2.1 大豆芯片实验所用植物材料的准备 | 第25-26页 |
2.2 大豆基因组DNA提取 | 第26-27页 |
2.3 大豆、拟南芥叶片总RNA的提取、反转录 | 第27-28页 |
2.4 目的基因的克隆及表达载体构建 | 第28-31页 |
2.5 农杆菌GV3101感受态的制作 | 第31页 |
2.6 冻融法转化农杆菌 | 第31页 |
2.7 花序浸染法转化拟南芥 | 第31-32页 |
2.8 拟南芥叶片DNA提取 | 第32-33页 |
2.9 拟南芥TuMVC4和SMVSC7的接种及表型观察 | 第33页 |
2.10 拟南芥转录组材料的准备 | 第33页 |
2.11 芯片数据分析方法 | 第33-34页 |
2.12 转录组数据分析方法 | 第34页 |
2.13 芯片及转录组结果qRT-PCR验证方法 | 第34-35页 |
2.14 大豆遗传转化方法和转基因后代抗病鉴定方法 | 第35-37页 |
实验结果 | 第37-68页 |
1. 大豆芯片数据分析 | 第37-47页 |
1.1 数据初步分析结果 | 第37-39页 |
1.2 q RT-PCR验证芯片结果 | 第39页 |
1.3 芯片表达差异基因的功能富集分析 | 第39-42页 |
1.4 筛选含有抗病结构域的差异表达探针 | 第42-45页 |
1.5 芯片数据结果的进一步分析 | 第45-47页 |
2. 抗病候选基因转化拟南芥及转基因植株对病毒病的抗性检测 | 第47-53页 |
2.1 抗病候选基因转化拟南芥 | 第47-48页 |
2.2 转基因拟南芥抗病毒病检测 | 第48-51页 |
2.3 GAST基因与病毒病抗性的相关性初步分析 | 第51-53页 |
3. GMSN1拟南芥转基因系转录组分析 | 第53-64页 |
3.1 表达差异基因(DEGs)统计 | 第53-55页 |
3.2 拟南芥转录组数据q RT-PCR验证结果 | 第55-56页 |
3.3 差异基因功能富集分析 | 第56-64页 |
4. GMSN1大豆转基因系的抗病毒病鉴定及基因表达情况 | 第64-68页 |
4.1 GmSN1大豆转基因系的抗病毒病鉴定结果 | 第64-66页 |
4.2 GmSN1大豆转基因系southern杂交及qRT-PCR结果 | 第66-68页 |
结论与讨论 | 第68-72页 |
1. 植物抗病毒基因及其抗病机制 | 第68-69页 |
2. GMSN1基因的过表达提高了拟南芥和大豆对花叶病毒病的抗性 | 第69-71页 |
3. 展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-81页 |
附表及附图 | 第81-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第85页 |