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推迟播期对向日葵黄萎病发生程度影响以及黄萎病菌遗传多样性研究

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推迟播期对向日葵黄萎病发生程度影响以及黄萎病菌遗传多样性研究
论文目录
 
摘要第3-5页
Abstract第5-12页
缩略语表第12-13页
1 引言第13-26页
  1.1 向日葵黄萎病第13页
    1.1.1 向日葵种植情况第13页
    1.1.2 向日葵黄萎病及其危害第13页
  1.2 向日葵黄萎病病原菌第13-18页
    1.2.1 大丽轮枝菌生物学特性第13-14页
    1.2.2 大丽轮枝菌的侵染循环第14-15页
    1.2.3 大丽轮枝菌的侵染过程第15页
    1.2.4 大丽轮枝菌的致萎毒素和激发子第15-16页
    1.2.5 大丽轮枝菌的致病相关基因第16-17页
    1.2.6 大丽轮枝菌致病相关基因的克隆—R-PCR技术第17-18页
  1.3 大丽轮枝菌的遗传多样性第18-23页
    1.3.1 大丽轮枝菌的营养亲和性第18-20页
    1.3.2 大丽轮枝菌交配型第20-21页
    1.3.3 大丽轮枝菌的系统发育第21-22页
    1.3.4 大丽轮枝菌的生理小种第22-23页
  1.4 大丽轮枝菌的快速检测第23页
  1.5 向日葵黄萎病的防治措施第23-24页
  1.6 研究目的和意义第24-26页
2 推迟播期对向日葵黄萎病发病程度及产量影响第26-34页
  2.1 供试品种和地点第26页
  2.2 方法第26-28页
    2.2.1 试验小区设计第26-27页
    2.2.2 向日葵黄萎病发病情况的调查第27-28页
    2.2.3 产量的测定第28页
    2.2.4 数据统计和分析第28页
  2.3 结果与分析第28-32页
    2.3.1 推迟播期能够降低向日葵黄萎病的发病率第28-30页
    2.3.2 推迟播期对向日葵黄萎病病情指数的影响第30-32页
  2.4 讨论第32-34页
3 向日葵种子携带大丽轮枝菌的检测第34-44页
  3.1 材料第34-35页
    3.1.1 供试向日葵种子和菌株第34页
    3.1.2 试剂、载体和培养基第34-35页
    3.1.3 仪器设备第35页
  3.2 方法第35-37页
    3.2.1 向日葵种子种皮的获得和DNA提取第35页
    3.2.2 向日葵种子种皮DNA双重PCR扩增第35-36页
    3.2.3 巢式PCR产物TA连接第36页
    3.2.4 大肠杆菌转化及蓝白斑筛选第36页
    3.2.5 阳性克隆菌液PCR鉴定第36-37页
    3.2.6 阳性克隆测序第37页
    3.2.7 序列分析第37页
    3.2.8 利用GFP标记大丽轮枝孢菌接种向日葵第37页
  3.3 结果与分析第37-42页
    3.3.1 向日葵种子种皮上携带V. dahliae的检测第37-40页
    3.3.2 不同向日葵品种携带黄萎病菌频率的检测第40-41页
    3.3.3 利用GFP荧光标记确定向日葵种子种皮带菌第41-42页
  3.4 讨论第42-44页
4 向日葵大丽轮枝菌遗传多样性研究第44-63页
  4.1 供试菌株第44-45页
  4.2 化学试剂第45页
  4.3 仪器设备第45页
  4.4 培养基成分第45页
  4.5 实验方法第45-51页
    4.5.1 黄萎病菌的分离第45-46页
    4.5.2 黄萎病菌的分子鉴定第46-47页
    4.5.3 大丽轮枝菌营养亲和群的划分第47-48页
    4.5.4 大丽轮枝菌生理小种鉴定第48-49页
    4.5.5 大丽轮枝菌交配型鉴定第49-50页
    4.5.6 大丽轮枝菌遗传多样性分析第50-51页
  4.6 结果与分析第51-60页
    4.6.1 向日葵黄萎病菌的分离与鉴定第51-52页
    4.6.2 向日葵大丽轮枝菌nit突变体筛选第52-53页
    4.6.3 向日葵大丽轮枝菌亲和群的划分第53-55页
    4.6.4 向日葵大丽轮枝菌生理小种的鉴定第55-56页
    4.6.5 向日葵大丽轮枝菌交配型的鉴定第56-57页
    4.6.6 大丽轮枝菌系统树构建第57-60页
  4.7 讨论第60-63页
5 利用R-PCR方法构建向日葵大丽轮枝菌致病相关基因文库第63-82页
  5.1 R-PCR具体流程第63页
  5.2 供试菌株第63页
  5.3 试剂第63页
  5.4 总RNA提取第63-64页
  5.5 cDNA合成第64-73页
    5.5.1 cDNA第一链合成第64-65页
    5.5.2 cDNA第二链合成第65页
    5.5.3 Tester和Driver制备第65-70页
    5.5.4 Removing PCR第70-71页
    5.5.5 Recovery PCR及产物纯化第71页
    5.5.6 Recovery PCR产物克隆及阳性克隆筛选第71-73页
    5.5.7 阳性克隆测序第73页
    5.5.8 序列比对分析第73页
  5.6 结果与分析第73-80页
    5.6.1 供试菌株形态及致病力测定第73-74页
    5.6.2 向日葵黄萎病菌总RNA的提取第74-75页
    5.6.3 cDNA接头连接产物检测第75-76页
    5.6.4 阳性克隆的筛选及序列比对分析第76-80页
  5.7 讨论第80-82页
6 全文结论第82-83页
致谢第83-84页
参考文献第84-97页
附录第97-104页
作者简介第104页

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