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蛋白质内含子介导的纯化系统的优化及其在生物传感器中的应用
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蛋白质内含子介导的纯化系统的优化及其在生物传感器中的应用
论文目录
 
摘要第1-9页
ABSTRACT第9-15页
第一章 绪论第15-30页
　　· 蛋白质内含子的发现第15页
　　· 蛋白质内含子的分类第15-17页
　　　　· 标准蛋白质内含子第16页
　　　　· 微小蛋白质内含子第16页
　　　　· 断裂蛋白质内含子第16-17页
　　· 蛋白质内含子的结构特征第17页
　　· 蛋白质内含子的自我剪接机理及断裂机制第17-20页
　　· 蛋白质内含子的应用第20-26页
　　　　· 自我断裂标签第20-21页
　　　　· 介导毒素蛋白的制备第21-22页
　　　　· 蛋白连接第22-23页
　　　　· 介导环肽的制备第23-24页
　　　　· 基因治疗第24页
　　　　· 用于结构和功能的研究第24-25页
　　　　· 生物传感器第25-26页
　　· 总结第26-27页
　　参考文献第27-30页
第二章 材料与方法第30-40页
　　· 实验材料第30-35页
　　　　· 室菌株第30页
　　　　· 实验试剂第30-31页
　　　　· 培养基和常用试剂的配制第31-35页
　　· 实验技术第35-40页
　　　　· 感受态制备第35页
　　　　· 凝胶回收第35-36页
　　　　· 质粒提取第36页
　　　　· 蛋白变性凝胶电泳(SDS-PAGE)第36-37页
　　　　· 基因克隆第37-38页
　　　　· 融合蛋白亲和纯化第38-40页
第三章 严谨型控制的基于断裂蛋白质内含子双ELP系统第40-53页
　　· 引言第40-41页
　　· 材料与方法第41-43页
　　　　· 克隆构建第41-42页
　　　　· 蛋白表达与纯化第42页
　　　　· 蛋白活性检与分析第42-43页
　　· 结果第43-47页
　　　　· 标准两步法纯化第43-45页
　　　　· 一步法纯化第45页
　　　　· 蛋白活性测试第45-47页
　　　　· 断裂蛋白质内含子系统在体内的稳定性第47页
　　· 讨论第47-51页
　　参考文献第51-53页
第四章 小肽控制的蛋白质内含子的非层析自我断裂标签第53-63页
　　· 引言第53-54页
　　· 材料与方法第54-55页
　　　　· 克隆构建第54页
　　　　· 蛋白表达与纯化第54-55页
　　　　· 蛋白活性与浓度测试第55页
　　· 结果第55-58页
　　　　· 系统构建第55-56页
　　　　· 系统优化第56-58页
　　· 讨论第58-61页
　　参考文献第61-63页
第五章 利用Zn~(2+)控制蛋白质内含子的断裂活性第63-75页
　　· 引言第63-64页
　　· 材料与方法第64-66页
　　　　· 克隆构建第64页
　　　　· 蛋白表达第64-65页
　　　　· 突变体对Zn~(2+)的敏感度测试第65页
　　　　· 数据分析第65-66页
　　· 结果第66-71页
　　· 讨论第71-73页
　　参考文献第73-75页
第六章 新型的温度敏感型C端断裂蛋白质内含子第75-94页
　　· 引言第75-76页
　　· 材料与方法第76-78页
　　　　· 克隆构建第76-77页
　　　　· 蛋白表达与纯化第77页
　　　　· 蛋白质质谱鉴定第77-78页
　　· 结果第78-89页
　　　　· 突变库的筛选第78-79页
　　　　· I~A与I~G突变体的断裂动力学比较第79-86页
　　　　· 基于I~G突变的自我断裂标签用于蛋白质纯化第86-87页
　　　　· I~G突变蛋白质内含子介导的环化应用第87-89页
　　· 讨论第89-92页
　　参考文献第92-94页
第七章 利用细菌传感器系统检测TRβ突变体以及其突变对配体结合的影响第94-113页
　　· 引言第94-95页
　　· 材料与方法第95-98页
　　　　· 材料来源第95-96页
　　　　· 克隆构建第96-97页
　　　　· 细菌传感器的培养以及生长表现型第97页
　　　　· 数据分析第97-98页
　　· 结果第98-104页
　　　　· 兴奋剂检测第99-102页
　　　　· 拮抗剂测试第102-104页
　　· 讨论第104-109页
　　参考文献第109-113页
第八章 总结与展望第113-117页
　　· 总结第113-114页
　　· 展望第114-117页
博士期间发表论文和参加科研情况说明第117-118页
致谢第118-120页
符号说明第120-121 页

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