论文目录 | |
| 摘要 | 第11-15页 |
| ABSTRACT | 第15-19页 |
| 第1章 绪论 | 第19-29页 |
| 1.1 低温胁迫对植物的危害 | 第19-20页 |
| 1.2 植物响应低温胁迫机制研究进展 | 第20-25页 |
| 1.2.1 抗氧化酶在低温胁迫中的作用 | 第20页 |
| 1.2.2 渗透保护剂在低温胁迫中的作用 | 第20-21页 |
| 1.2.3 钙信号转导途径 | 第21-23页 |
| 1.2.4 依赖CBF信号转导途径 | 第23-24页 |
| 1.2.5 不依赖CBF信号转导途径 | 第24-25页 |
| 1.3 紫花苜蓿抗寒性研究进展 | 第25-27页 |
| 1.3.1 紫花苜蓿的研究进展 | 第25页 |
| 1.3.2 紫花苜蓿响应低温胁迫的生理生化反应 | 第25-26页 |
| 1.3.3 通过基因工程技术提高紫花苜蓿抗寒性 | 第26-27页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 1.5 技术路线 | 第28-29页 |
| 第2章 紫花苜蓿抗寒转录组测序分析 | 第29-67页 |
| 2.1 引言 | 第29页 |
| 2.2 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第29-30页 |
| 2.2.2 实验药品 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.3.1 紫花苜蓿根颈芽的收集 | 第30页 |
| 2.3.2 紫花苜蓿根颈芽总RNA的提取和质量检测 | 第30页 |
| 2.3.3 cDNA文库的构建 | 第30-31页 |
| 2.3.4 转录组测序及数据组装 | 第31页 |
| 2.3.5 转录本功能注释 | 第31页 |
| 2.3.6 差异表达基因分析 | 第31-32页 |
| 2.3.7 荧光定量qRT-PCR（Quantitative real-time PCR） | 第32-35页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第35-65页 |
| 2.4.1 测序总RNA质量检测 | 第35页 |
| 2.4.2 转录组测序组装结果和质量评估 | 第35-37页 |
| 2.4.3 Unigene功能注释分析 | 第37-44页 |
| 2.4.4 Unigene表达水平分析 | 第44-45页 |
| 2.4.5 差异表达基因的GO注释分析 | 第45-55页 |
| 2.4.6 差异表达基因KEGG代谢途径的富集 | 第55-56页 |
| 2.4.7 钙信号转导途径相关基因 | 第56-59页 |
| 2.4.8 转录因子响应紫花苜蓿冷冻胁迫 | 第59-61页 |
| 2.4.9 基因表达模式分析 | 第61-65页 |
| 2.5 本章小结 | 第65-67页 |
| 第3章 MSNCX基因对烟草的转化及功能分析 | 第67-105页 |
| 3.1 引言 | 第67-68页 |
| 3.2 实验材料 | 第68-69页 |
| 3.2.1 菌种、质粒及植物材料 | 第68页 |
| 3.2.2 实验药品 | 第68页 |
| 3.2.3 主要仪器设备 | 第68-69页 |
| 3.3 实验方法 | 第69-76页 |
| 3.3.1 紫花苜蓿MsNCX的克隆 | 第69-71页 |
| 3.3.2 MsNCX生物信息学分析 | 第71页 |
| 3.3.3 MsNCX的表达特异性分析 | 第71页 |
| 3.3.4 MsNCX表达载体构建及遗传转化 | 第71-72页 |
| 3.3.5 转基因烟草的分子生物学检测 | 第72-73页 |
| 3.3.6 转基因烟草的抗寒性分析 | 第73-74页 |
| 3.3.7 转基因烟草的耐盐性分析 | 第74-75页 |
| 3.3.8 转基因烟草的抗旱性分析 | 第75页 |
| 3.3.9 胁迫响应基因表达分析 | 第75-76页 |
| 3.3.10 数据处理 | 第76页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第76-104页 |
| 3.4.1 紫花苜蓿MsNCX的克隆及生物信息学分析 | 第76-82页 |
| 3.4.2 紫花苜蓿MsNCX基因表达模式分析 | 第82-84页 |
| 3.4.3 转MsNCX基因烟草的获得及分子生物学检测 | 第84-87页 |
| 3.4.4 转MsNCX基因烟草的抗寒性分析 | 第87-93页 |
| 3.4.5 转MsNCX基因烟草的耐盐性分析 | 第93-99页 |
| 3.4.6 转MsNCX基因烟草的抗旱性分析 | 第99-102页 |
| 3.4.7 过表达MsNCX基因烟草中抗逆相关基因的表达分析 | 第102-104页 |
| 3.5 本章小结 | 第104-105页 |
| 第4章 MSCML基因对烟草的转化及功能分析 | 第105-133页 |
| 4.1 引言 | 第105页 |
| 4.2 实验材料 | 第105页 |
| 4.3 实验方法 | 第105-107页 |
| 4.3.1 紫花苜蓿MsCML的克隆 | 第105-106页 |
| 4.3.2 MsCML生物信息学分析 | 第106页 |
| 4.3.3 MsCML的表达特异性分析 | 第106页 |
| 4.3.4 MsCML表达载体构建及遗传转化 | 第106页 |
| 4.3.5 转基因烟草的分子生物学检测 | 第106-107页 |
| 4.3.6 转基因烟草的抗寒性分析 | 第107页 |
| 4.3.7 转基因烟草的耐盐性分析 | 第107页 |
| 4.3.8 转基因烟草的抗旱性分析 | 第107页 |
| 4.3.9 胁迫响应基因表达分析 | 第107页 |
| 4.3.10 数据处理 | 第107页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第107-132页 |
| 4.4.1 紫花苜蓿MsCML的克隆及生物信息学分析 | 第107-111页 |
| 4.4.2 紫花苜蓿MsCML基因表达模式分析 | 第111-113页 |
| 4.4.3 转MsCML基因烟草的获得及分子生物学检测 | 第113-117页 |
| 4.4.4 转MsCML基因烟草的抗寒性分析 | 第117-121页 |
| 4.4.5 转MsCML基因烟草的耐盐性分析 | 第121-127页 |
| 4.4.6 转MsCML基因烟草的抗旱性分析 | 第127-130页 |
| 4.4.7 过表达MsCML基因烟草中胁迫响应基因的表达的分析 | 第130-132页 |
| 4.5 本章小结 | 第132-133页 |
| 第5章 讨论 | 第133-143页 |
| 5.1 转录组分析紫花苜蓿抗寒机制 | 第133-136页 |
| 5.1.1 膜蛋白 | 第133页 |
| 5.1.2 抗氧化防御系统 | 第133-134页 |
| 5.1.3 激素信号转导途径 | 第134-135页 |
| 5.1.4 泛素介导的蛋白水解途径 | 第135页 |
| 5.1.5 次生代谢产物的生物合成途径 | 第135-136页 |
| 5.2 紫花苜蓿MSNCX基因功能研究 | 第136-139页 |
| 5.2.1 紫花苜蓿MsNCX基因响应非生物胁迫 | 第137页 |
| 5.2.2 过表达MsNCX基因增强烟草耐寒性 | 第137-138页 |
| 5.2.3 过表达MsNCX基因增强烟草的耐盐和耐旱性 | 第138-139页 |
| 5.3 紫花苜蓿MSCML基因功能研究 | 第139-141页 |
| 5.4 紫花苜蓿MSNCX和MSCML基因表达模式分析 | 第141-142页 |
| 5.5 对后续工作的设想 | 第142页 |
| 5.6 论文的主要创新点 | 第142-143页 |
| 结论 | 第143-145页 |
| 参考文献 | 第145-163页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第163-164页 |
| 致谢 | 第164页 |
