论文目录 | |
缩略词表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第一部分: 脐带和羊膜间充质干细胞作为组织工程血管种子细胞的研究 | 第17-64页 |
1 前言 | 第17页 |
2 材料和方法 | 第17-36页 |
2.1 主要仪器设备及实验材料 | 第17-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-36页 |
2.2.1 WJ-MSC、AM-MSC的分离和培养 | 第20-21页 |
2.2.2 流式细胞分析鉴定表面标志 | 第21-22页 |
2.2.3 多向分化潜能评估 | 第22-24页 |
2.2.4 细胞增殖和代谢评估 | 第24-25页 |
2.2.5 成纤维细胞集落形成评估 | 第25页 |
2.2.6 血小板粘附评估 | 第25-27页 |
2.2.7 血液相容性评价 | 第27页 |
2.2.8 细胞膜片形成研究 | 第27-28页 |
2.2.9 组织学评估 | 第28-29页 |
2.2.10 电镜观察 | 第29-30页 |
2.2.11 定量分析细胞膜片内所含的胶原和弹性蛋白 | 第30-31页 |
2.2.12 RNA提取和real-time PCR | 第31-35页 |
2.2.13 细胞膜片-细胞活性评估 | 第35-36页 |
2.2.14 统计分析 | 第36页 |
3 结果 | 第36-61页 |
3.1 WJ-MSC、AM-MSC培养和鉴定 | 第36-45页 |
3.2 WJ-MSC和AM-MSC增殖和自我更新性能 | 第45-48页 |
3.3 抗血小板粘附和血液相容性 | 第48页 |
3.4 细胞膜片组织学 | 第48页 |
3.5 电镜观察 | 第48-49页 |
3.6 细胞外基质定量和real-time PCR | 第49-58页 |
3.7 细胞活力 | 第58-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
第二部分: 猪颈动脉脱细胞支架的制备及理化性质研究 | 第64-93页 |
1. 前言 | 第64页 |
2 材料和方法 | 第64-73页 |
2.1 主要仪器设备及实验材料 | 第64-66页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第64-65页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第65-66页 |
2.2 实验方法 | 第66-73页 |
2.2.1 获取猪颈动脉 | 第66页 |
2.2.2 实验分组及脱细胞处理 | 第66-67页 |
2.2.3 H&E染色 | 第67页 |
2.2.4 DNA定量 | 第67-68页 |
2.2.5 五色套染 | 第68页 |
2.2.6 扫描电镜 | 第68页 |
2.2.7 免疫组化 | 第68-69页 |
2.2.8 细胞外基质定量 | 第69-70页 |
2.2.8 单轴应力测试 | 第70-72页 |
2.2.9 爆破压力测定和顺应性测定 | 第72页 |
2.2.10 缝合保留强度测定 | 第72-73页 |
2.2.11 统计学分析 | 第73页 |
3 结果 | 第73-88页 |
3.1 组织学观察 | 第73-74页 |
3.2 脱细胞对ECM的影响 | 第74页 |
3.3 细胞外基质超微结构 | 第74-77页 |
3.4 免疫组化 | 第77页 |
3.5 主要ECM蛋白定量 | 第77-83页 |
3.6 生物力学性能 | 第83-88页 |
4 讨论 | 第88-92页 |
5 结论 | 第92-93页 |
第三部分: WJ-MSC复合细胞外基质支架构建组织工程血管 | 第93-106页 |
1 前言 | 第93页 |
2 材料和方法 | 第93-96页 |
2.1 主要仪器设备及实验材料 | 第93-94页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第93-94页 |
2.1.2 主要实验材料 | 第94页 |
2.1.3 实验动物 | 第94页 |
2.2 实验方法 | 第94-95页 |
2.2.1 获得脱细胞支架 | 第94页 |
2.2.2 复苏并扩增WJ-MSC | 第94-95页 |
2.2.3 准备WJ-MSC的细胞膜片 | 第95页 |
2.2.4 体外构建TEBV | 第95页 |
2.4 建立兔腹主动脉旁路移植模型 | 第95-96页 |
2.5 移植物评估 | 第96页 |
3 结果 | 第96-102页 |
3.1 光镜下观察复苏的WJ-MSC及其形成的细胞膜片 | 第96页 |
3.2 H&E染色观察TEBV | 第96-97页 |
3.3 建立体内移植模型 | 第97-100页 |
3.4 移植物通畅情况 | 第100页 |
3.5 移植物H&E染色 | 第100-102页 |
4 讨论 | 第102-103页 |
5 结论 | 第103-104页 |
6 研究的不足 | 第104页 |
7 全文总结 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-113页 |
综述 | 第113-130页 |
参考文献 | 第125-130页 |
攻读学位期间获得的学术成果及获得的奖励 | 第130-131页 |
致谢 | 第131-132页 |