论文目录 | |
第一章 前言 | 第12-34
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1 鸡蛋清生物活性肽研究状况 | 第12-18
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· 鸡蛋清的化学组成 | 第12-17
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· 鸡蛋的组成 | 第12
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· 蛋清中蛋白质组成及生物学性质 | 第12-17
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· 鸡蛋清生物活性肽研究 | 第17-18
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· 抗菌肽 | 第17
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· 免疫肽 | 第17
页 |
· 降压肽 | 第17-18
页 |
· 抗氧化肽 | 第18
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2 人体的氧化伤害和防御 | 第18-24
页 |
· 人体内自由基产生的机制 | 第18
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· 自由基造成的氧化损伤 | 第18-20
页 |
· 对脂类的伤害 | 第19
页 |
· 对蛋白质的损害 | 第19
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· 对核酸的伤害 | 第19
页 |
· 对糖类的伤害 | 第19-20
页 |
· 机体自由基的清除 | 第20-21
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· 体内抗氧化酶 | 第20
页 |
· 体内抗氧化剂 | 第20-21
页 |
· 外源性抗氧化剂及其对自由基代谢的影响 | 第21-24
页 |
· 维生素类抗氧化剂 | 第21-22
页 |
· 植物提取物类抗氧化剂 | 第22-23
页 |
· 微量元素类抗氧化剂 | 第23
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· 蛋白质、肽类、氨基酸的抗氧化活性 | 第23-24
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3 抗氧化肽研究进展 | 第24-32
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· 抗氧化肽的来源及抗氧化活性 | 第24-27
页 |
· 天然抗氧化肽 | 第24-25
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· 人工合成抗氧化肽 | 第25
页 |
· 蛋白质水解产生抗氧化肽 | 第25-27
页 |
· 抗氧化能力的测定 | 第27-30
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· 抗脂类物质过氧化法 | 第27-28
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· 测定抗氧化剂清除自由基能力的方法 | 第28-30
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· 抗氧化肽的分离纯化与分析 | 第30-31
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· 抗氧化肽的分离纯化 | 第30
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· 抗氧化肽分析 | 第30-31
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· 抗氧化肽的应用前景 | 第31-32
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4 本研究课题的立题背景、研究意义和主要研究内容 | 第32-34
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· 立题背景、研究意义 | 第32-33
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· 主要研究内容 | 第33-34
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· 鸡蛋卵白蛋白的制备 | 第33
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· 鸡蛋卵白蛋白的酶水解研究 | 第33
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· 鸡蛋卵白蛋白水解产物的抗氧化性研究 | 第33
页 |
· 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽的分离纯化及分析 | 第33-34
页 |
第二章 鸡蛋卵白蛋白的制备 | 第34-47
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1 材料与仪器 | 第34
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· 试验材料 | 第34
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· 主要试剂 | 第34
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· 主要仪器设备 | 第34
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2 试验方法 | 第34-37
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· 蛋清的制备 | 第34-35
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· 卵白蛋白分离 | 第35-36
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· 离子柱制备 | 第35
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· 分离 | 第35
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· 柱分离条件的选择 | 第35-36
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· 蛋白质检测 | 第36-37
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· 紫外吸收法 | 第36
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· 反相高效液相(RP-HPLC)色谱法 | 第36
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· SDS-聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳(SDS-PAGE)鉴定 | 第36-37
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· 数据统计与分析 | 第37
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3 结果与分析 | 第37-45
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· Q-Sepharose FF 对鸡蛋卵白蛋白吸附量的影响 | 第37-41
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· Q-Sepharose FF 对鸡蛋蛋清蛋白吸附量的影响 | 第37-38
页 |
· 上样量对 Q-Sepharose FF 柱吸附鸡蛋卵白蛋白的影响 | 第38-41
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· 不同离子强度洗脱液对鸡蛋卵白蛋白洗脱效果的影响 | 第41-42
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· 最优柱分离条件的优化 | 第42-45
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4 讨论 | 第45-46
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5 小结 | 第46-47
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第三章 鸡蛋卵白蛋白的酶法水解研究 | 第47-64
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1 材料与仪器 | 第47
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· 试验材料 | 第47
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· 试剂 | 第47
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· 主要仪器 | 第47
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2 试验方法 | 第47-50
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· 卵白蛋白的酶解 | 第47-48
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· 酶的筛选实验 | 第47
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· 胃蛋白酶水解鸡蛋卵白蛋白的单因素试验 | 第47-48
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· 最佳酶解条件的优化 | 第48
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· 测定方法 | 第48-50
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· 蛋白酶活力测定 | 第48-49
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· 蛋白质水解度的测定 | 第49
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· 总氮测定 | 第49
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· 氨基氮测定 | 第49-50
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· 酶解液清除OH的测定(脱氧核糖法) | 第50
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· 数据统计与分析 | 第50
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3 结果与分析 | 第50-62
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· 不同蛋白酶对鸡蛋卵白蛋白水解度(DH)的影响 | 第50-53
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· 胃蛋白酶对鸡蛋卵白蛋白水解单因素试验 | 第53-55
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· 底物浓度对卵白蛋白水解的影响 | 第53-54
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· 不同酶用量对卵白蛋白水解的影响 | 第54-55
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· 酶解条件的优化 | 第55-62
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· 卵白蛋白胃蛋白酶水解物清除羟自由基试验分析与回归方程建立 | 第56-61
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· 卵白蛋白胃蛋白酶水解工艺条件的优化和回归模型的检验 | 第61-62
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4 讨论 | 第62-63
页 |
5 小结 | 第63-64
页 |
第四章 鸡蛋卵白蛋白酶解物抗氧化活性研究 | 第64-79
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1 材料与仪器 | 第64-65
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1.1材料 | 第64
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1.2主要试剂 | 第64
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1.3实验动物 | 第64
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1.4主要仪器设备 | 第64-65
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2 试验方法 | 第65-69
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物体外抗氧化研究 | 第65
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物清除超氧阴离子作用 | 第65
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物清除羟自由基作用 | 第65
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物抗脂质过氧化作用 | 第65
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物体内抗氧化研究 | 第65-69
页 |
· 动物分组及D-gal衰老小鼠模型的建立 | 第65-66
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· 样品采集 | 第66
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· 测定方法 | 第66-69
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· 数据统计与分析 | 第69
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3 结果与分析 | 第69-76
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物对自由基的清除作用 | 第69-70
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· 鸡蛋卵白蛋白酶解物抗脂质过氧化能力 | 第70-71
页 |
· 卵白蛋白酶解物对小鼠体内SOD活性的影响 | 第71-72
页 |
· 卵白蛋白酶解物对小鼠GSH-Px活性的影响 | 第72-73
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· 卵白蛋白酶解物对小鼠CAT活性的影响 | 第73-74
页 |
· 卵白蛋白酶解物对小鼠T-AOC活性的影响 | 第74-75
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· 卵白蛋白酶解物对小鼠MDA活性的影响 | 第75-76
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4 讨论 | 第76-78
页 |
5 小结 | 第78-79
页 |
第五章 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽的纯化与鉴定 | 第79-89
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1 试验材料与仪器 | 第79
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· 试验原料 | 第79
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· 主要试剂 | 第79
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· 主要仪器设备 | 第79
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2 试验方法 | 第79-81
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· 样品制备 | 第79
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· 酶解物抗氧化肽的分离 | 第79-80
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· 酶解物超滤分离 | 第79-80
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· 酶解物离子交换分离 | 第80
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· 酶解物RP-HPLC分离纯化 | 第80
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· 卵白蛋白抗氧化肽结构分析 | 第80
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· 抗氧化活性检测 | 第80-81
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3 结果与分析 | 第81-86
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· 酶解物抗氧化肽分离纯化 | 第81-85
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· 酶解物超滤分离 | 第81
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· Q-Sepharose FF对酶解物离子分离 | 第81-82
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· RP-HPLC分离 | 第82-85
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· 卵白蛋白抗氧化肽结构分析 | 第85-86
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4 讨论 | 第86-88
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5 小结 | 第88-89
页 |
结论 | 第89-91
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参考文献 | 第91-107
页 |
附录 | 第107-124
页 |
附录 1: 卵白蛋白一级结构 | 第107-108
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附录 2: 鸡蛋卵白蛋白抗氧化肽反相高效液相分离结果 | 第108-109
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附录 3: OPQ3-1 的肽段质谱图 | 第109-110
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附录 4: OPQ3-2 的肽段质谱图 | 第110-111
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附录 5: OPQ3-4 的肽段质谱图 | 第111-112
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附录 5: 查新报告 | 第112-124
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缩略语 | 第124-125
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致谢 | 第125-126
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攻读博士学位期间的研究成果及获奖情况 | 第126
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