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传染性法氏囊病病毒野毒株的致弱与分子机理研究

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传染性法氏囊病病毒野毒株的致弱与分子机理研究
论文目录
 
中文摘要第1-7 页
英文摘要第7-16 页
文献综述第16-53 页
  第一章 鸡传染性法氏囊病的研究进展第16-28 页
    · 概述第16 页
    · IBDV 的病原特性第16-23 页
      · 病原第16-18 页
        · 病毒的结构第16-17 页
        · 病毒的形态发生第17 页
        · 病毒蛋白第17-18 页
      · 血清型第18 页
      · 培养特性第18-22 页
        · IBDV 在鸡胚上的增殖第18-19 页
        · IBDV 在细胞上的增殖第19-20 页
        · IBDV 在细胞中增殖的分子机制第20-22 页
      · 抵抗力第22-23 页
    · IBD 的诊断第23-24 页
      · 流行病学第23-24 页
      · 临床症状第24 页
      · 病理变化第24 页
    · IBD 的检测第24-25 页
      · 病毒分离鉴定第24 页
      · 免疫学试验及分子生物学检测第24-25 页
    · 治疗第25-26 页
      · 抗体治疗第25 页
      · 西药治疗第25 页
      · 中草药防制 IBD第25-26 页
    · IBD 免疫抑制第26-28 页
  第二章 鸡传染性法氏囊病病毒变异分子生物学研究进展第28-40 页
    · 病毒基因组结构第28-29 页
    · 蛋白结构与功能第29-35 页
    · 病毒抗原变异的分子基础第35-37 页
    · 病毒毒力变异的分子基础第37-40 页
  第三章 超强毒 IBD 的发生第40-46 页
    · 超强毒 IBDV 的发生及其研究第40-42 页
      · 超强毒 IBDV 的发生第40 页
      · vvIBDV 抗原变异第40-42 页
      · vvIBDV 致病型变化第42 页
      · vvIBDV 毒力标记第42 页
    · vvIBDV 毒株致弱和适应细胞培养第42-43 页
    · 症状和病变第43 页
    · 分子诊断工具第43-44 页
    · 致病性和免疫抑制第44-45 页
    · 预防与控制第45-46 页
  第四章 鸡传染性法氏囊病防制的研究进展第46-53 页
    · 常规疫苗免疫第46-48 页
    · 新型传染性法氏囊病疫苗研究进展第48-51 页
      · 基因工程疫苗第48 页
      · 亚单位疫苗第48-49 页
      · 载体疫苗第49-50 页
      · VP5蛋白缺失IBDV毒株第50 页
      · DNA 疫苗第50-51 页
    · 免疫防制中存在的主要问题第51-53 页
      · IBDV的毒力标记尚未确定第51 页
      · 血清型和毒力的分类发生混淆第51-52 页
      · 疫苗的质量令人堪忧第52 页
      · 综合防制措施有待进一步加强第52-53 页
试验研究第53-111 页
  第五章 野毒株的分离鉴定第53-63 页
    · 材料第53-54 页
      · 标准SPF 鸡IBD 阳性血清第53 页
      · IBD 琼脂扩散试验抗原第53 页
      · 荧光标记的 IBDV 特异性血清第53 页
      · SPF 鸡胚和 SPF 鸡第53-54 页
      · IBDV 病料采集及处理第54 页
    · 方法第54-56 页
      · 病毒的分离第54 页
        · 病料的前处理第54 页
        · 分离病毒第54 页
      · 动物回归试验第54 页
      · 组织病理学观察第54 页
      · 琼脂免疫扩散试验第54-55 页
        · 琼脂板的制备第54-55 页
        · 病料处理第55 页
        · 琼扩试验步骤第55 页
      · 间接荧光抗体法对分离株抗原的检测第55 页
      · 电镜观察第55 页
      · IBDV 与MDV、CAV、REV 共感染的检测第55-56 页
        · 病料的处理第55 页
        · IBDV与MDV、CAV、REV 的检测第55-56 页
    · 结果第56-62 页
      · 发病鸡的临床症状及流行病学第56-58 页
      · 病毒分离结果第58 页
      · 琼脂扩散试验第58 页
      · 动物回归试验结果第58 页
      · 组织病理学观察第58-60 页
      · 电镜观察结果第60-61 页
      · 荧光显微镜观察结果第61 页
      · 共感染检测的结果第61-62 页
    · 讨论第62-63 页
  第六章 4个传染性法氏囊病病毒分离株的致病性研究第63-70 页
    · 材料与方法第63-64 页
      · 材料第63 页
        · 毒株第63 页
        · SPF 鸡胚、SPF 鸡第63 页
      · 方法第63-64 页
        · 各毒株的处理第63-64 页
        · 鸡只的人工感染试验第64 页
        · 病理组织学观察第64 页
    · 结果第64-68 页
      · 人工接种鸡胚的结果第64-65 页
      · 4个IBDV野毒株对SPF鸡的致病性第65 页
      · 组织病理学观察结果第65-66 页
      · IBDV对中枢免疫器官的作用第66-68 页
    · 讨论第68-70 页
  第七章 传染性法氏囊病病毒4个野毒株VP2基因高变区的克隆与序列分析第70-85 页
    · 材料第70-72 页
      · 病毒第70-71 页
      · 菌种第71 页
      · 试剂第71 页
      · 溶液配制第71-72 页
        · DEPC-H20第71 页
        · 100mg/mL 氨苄霉素第71 页
        · X-gal第71 页
        · LB 培养液(基)第71 页
        · SOB 培养基第71-72 页
        · SOC 培养基第72 页
    · 方法第72-77 页
      · 4 个野毒株原代毒核酸 RNA 的提取第72 页
      · VP2 高变区的扩增第72-73 页
        · 引物的设计与合成第72 页
        · RT-PCR第72-73 页
        · Nested-PCR第73 页
        · PCR 扩增鉴定第73 页
      · PCR 产物的回收第73-74 页
      · VP2 高变区的克隆与鉴定第74-75 页
        · PCR 产物与pMD18-T vector 的连接第74 页
        · 感受态细胞的制备——氯化钙法第74-75 页
        · 连接产物的转化第75 页
      · 重组质粒的提取与鉴定第75-77 页
        · SDS 碱裂解法小量提取质粒第75-76 页
        · 重组质粒的琼脂糖凝胶电泳鉴定第76 页
        · 重组质粒的双酶切鉴定第76-77 页
      · 阳性质粒测序与序列分析第77 页
    · 结果第77-83 页
      · RT-PCR 结果第77 页
      · 目的基因的克隆和测序第77-83 页
        · 重组质粒的酶切鉴定第77-78 页
        · 序列分析第78-83 页
    · 讨论第83-85 页
  第八章 MTT 比色法在IBDV 分离中的应用第85-89 页
    · 材料第85-86 页
      · 法氏囊病料第85 页
      · MTT 溶液第85 页
      · 裂解液第85 页
      · DMEM第85 页
      · 犊牛血清第85 页
      · SPF 鸡法氏囊浸出液第85 页
      · 法氏囊提取液第85-86 页
      · 鸡胚浸出液第86 页
      · 主要仪器设备第86 页
    · 方法第86 页
      · 鸡胚成纤维细胞的制备第86 页
    · 结果第86-87 页
    · 讨论第87-89 页
  第九章 IBDV超强毒株的传代致弱第89-103 页
    · 材料与方法第89-92 页
      · 病毒第89 页
      · SPF鸡胚和SPF鸡第89-90 页
      · 试剂第90 页
      · 溶液配制第90 页
        · 细胞生长液和细胞维持液第90 页
        · Hank’s 液第90 页
      · 鸡胚成纤维细胞的制备第90-91 页
      · 病毒的传代第91 页
      · 原始囊毒及不同代次细胞毒致病性的测定第91 页
      · 细胞适应毒的遗传稳定性试验第91 页
      · 弱毒株的免疫原性试验第91-92 页
      · VP2高变区扩增第92 页
      · 序列测定和比较第92 页
    · 结果第92-101 页
      · 病毒的传代驯化第92-93 页
      · 原始囊毒及不同代次细胞毒病毒致病性实验第93 页
      · 致弱株的稳定性试验第93-94 页
      · 致弱株的免疫原性和最佳免疫剂量第94 页
      · RT-PCR 产物及重组质粒的酶切鉴定第94-95 页
      · 序列分析第95-101 页
    · 讨论第101-102 页
    · 小结第102-103 页
  第十章 IBDV细胞苗免疫效果的研究第103-111 页
    · 材料与方法第103-104 页
      · 实验材料第103 页
      · 实验分组第103-104 页
      · 母源抗体水平和免疫后抗体效价的检测第104 页
      · 计算免疫器官指数及观察病理组织切片第104 页
      · 人工感染用毒株及攻毒途径第104 页
      · 统计学分析第104 页
    · 结果第104-108 页
      · 母源抗体水平与免疫后的 IBDV 抗体效价第104-105 页
      · 三种疫苗免疫后对免疫器官的影响第105-106 页
        · 囊重比与囊指数第105-106 页
        · 免疫器官的组织损伤第106 页
      · 不同代次细胞毒对攻毒的免疫保护作用第106-107 页
      · 对新城疫疫苗免疫应答的免疫抑制第107-108 页
    · 讨论第108-111 页
结论第111-112 页
参考文献第112-125 页
缩略语英汉对照表第125-126 页
致谢第126-127 页
作者简介第127 页

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