鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及IBV致细胞病变作用的研究

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鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及IBV致细胞病变作用的研究

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鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及IBV致细胞病变作用的研究

论文目录
摘要	第1-8页
Abstract	第8-16页
文献综述	第16-45页
第一章气管黏膜上皮细胞体外培养与应用的研究进展	第16-33页
· 气管的组成	第16页
· 气管的微细结构	第16-19页
· 黏膜上皮	第17-18页
· 黏膜下层	第18-19页
· 外膜	第19页
· 气管黏膜上皮的生理功能	第19页
· 纤毛生理功能	第19页
· 气管和支气管分泌物功能	第19页
· 气管黏膜上皮与呼吸道疾病	第19-23页
· 气管黏膜上皮的防御作用	第20页
· 气管、支气管黏膜上皮在哮喘发病中的作用	第20-21页
· 气管黏膜上皮与禽流感新发现	第21页
· 气管黏膜上皮与猪链球菌病	第21-22页
· 气管黏膜上皮与新城疫	第22页
· 气管黏膜上皮与鸡传染性支气管炎	第22-23页
· 气管黏膜上皮细胞体外培养的应用	第23-26页
· 为组织工程气管研制提供种子细胞	第23-24页
· 用于气管黏膜上皮细胞转化试验	第24-25页
· 用于气管黏膜上皮细胞抗菌多肽等分泌物分析研究	第25页
· 用于动物疾病的研究	第25-26页
· 气管黏膜上皮细胞体外培养技术的发展	第26-31页
· 传统单层细胞生长方式的气管黏膜上皮培养技术	第26页
· 气管黏膜上皮细胞气液界面培养技术	第26-30页
· 上皮细胞共培养技术	第30-31页
· 气管黏膜上皮细胞的鉴定	第31-33页
第二章传染性支气管炎病毒研究进展	第33-45页
· IBV 基因组结构	第33-34页
· IBV 的非结构域	第34-35页
· IBV 的分子变异机制	第35-36页
· IBV 遗传变异的研究近况	第36-38页
· 基因突变引起的遗传变异	第36-37页
· 基因重组引起的遗传变异	第37页
· 免疫压力引起的遗传变异	第37-38页
· 外来禽只引进“新毒株”	第38页
· IBV 的免疫机制	第38-42页
· IBV 的分子免疫学结构	第38-39页
· 鸡体对IBV 的非特异性免疫	第39-40页
· 宿主对IBV 的特异性体液免疫	第40页
· 宿主对IBV 特异性的细胞免疫	第40-41页
· 免疫方法	第41-42页
· IBV 的体外培养特性	第42-45页
· 鸡胚中的培养	第42页
· 气管环组织培养	第42-43页
· 细胞培养	第43-45页
试验研究	第45-85页
第三章鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及鉴定	第45-61页
· 材料	第45-48页
· 试验动物和鸡胚来源	第45-46页
· 基础培养基	第46页
· 血清	第46页
· 羊下丘脑粗提物的制备	第46页
· 胰岛素	第46页
· 转铁蛋白	第46页
· 人表皮生长因子	第46页
· 牛垂体提取物	第46-47页
· 氢化可的松	第47页
· 30 g/L 谷氨酰胺	第47页
· 抗生素	第47页
· 缓冲液	第47页
· 消化液	第47-48页
· 免疫荧光细胞化学试剂	第48页
· 主要仪器设备	第48页
· 方法	第48-52页
· 4 种完全培养液的准备	第48-49页
· 鸡气管黏膜上皮细胞的分离	第49页
· 鸡气管黏膜上皮细胞的单独培养	第49页
· 小白鼠、兔子、猪气管黏膜上皮细胞的分离与培养	第49-50页
· 气管黏膜上皮细胞生长曲线的测定	第50页
· 鸡胚成纤维细胞分离培养及共培养培养液选择	第50-51页
· 鸡气管黏膜上皮细胞与鸡胚成纤维细胞共培养体系的建立	第51-52页
· 气管上皮细胞角蛋白8 和18 相关抗原鉴定	第52页
· 结果	第52-58页
· 单独培养的鸡气管黏膜上皮细胞形态和生长特征	第52页
· 兔子、小鼠、猪气管上皮细胞形态和生长特征	第52-53页
· 上皮细胞生长曲线的测定	第53页
· 鸡胚成纤维细胞形态和生长特征	第53-55页
· 共培养的鸡气管黏膜上皮细胞形态和生长特征	第55页
· 共培养对鸡气管黏膜上皮细胞增殖和细胞活力的影响	第55页
· 鸡气管上皮细胞的鉴定结果	第55-58页
· 讨论	第58-60页
· 共培养体系中细胞类型与培养液的选择	第58页
· 提高气管上皮细胞贴壁增殖应注意的事项	第58-59页
· CTECs 分离和纯化应注意的问题	第59页
· 原代细胞消化酶和血清的选择	第59-60页
· 小结	第60-61页
第四章鸡气管黏膜上皮细胞气液界面共培养体系的建立	第61-73页
· 材料	第61-62页
· 主要试剂	第61-62页
· 主要仪器设备	第62页
· 方法	第62-65页
· 鸡气管黏膜上皮细胞气液界面共培养	第62-63页
· 气管上皮细胞生长曲线的测定	第63页
· 气管黏膜上皮细胞电镜观察和组织切片观察	第63-65页
· 结果	第65-70页
· 气管黏膜上皮细胞生长状态和形态特征	第65页
· 气管黏膜上皮细胞生长曲线	第65页
· 气管黏膜上皮电子显微镜观察	第65-69页
· 气管黏膜上皮组织切片染色观察	第69-70页
· 讨论	第70-71页
· 气液界面培养条件的优化	第70页
· 气液界面共培养体系中的血清选择	第70页
· 套皿支持膜的包被	第70-71页
· 小结	第71-73页
第五章鸡传染性支气管炎病毒致鸡气管黏膜上皮细胞病变作用的研究	第73-85页
· 主要材料	第73-74页
· IBV 毒株与阳性血清	第73页
· 实验动物	第73页
· 鸡气管黏膜上皮细胞与鸡胚成纤维细胞共培养体系	第73-74页
· 引物设计	第74页
· 主要试剂	第74页
· 主要仪器	第74页
· 方法	第74-76页
· 鸡气管黏膜上皮细胞无IBV 内源性污染的鉴定	第74页
· 病毒的复壮及收获	第74页
· 接毒及光镜观察	第74页
· 接毒细胞透射电镜观察	第74-75页
· RT-PCR 检测接毒细胞中IBV	第75-76页
· IBV CTECs 细胞毒对鸡胚致病性的检测	第76页
· 结果	第76-82页
· 鸡气管黏膜上皮细胞IBV 内源性污染检测	第76页
· 光镜观察接毒气管上皮细胞形态特征	第76页
· 接毒CTECs 透射电镜观察细胞病理变化	第76-80页
· RT-PCR 检测	第80-81页
· IBV 气管上皮细胞毒对鸡胚致病性的检测	第81-82页
· 讨论	第82-83页
· CTECs 对IBV 敏感性很高	第82-83页
· 不同组织嗜性IBV 均致CTECs 病变	第83页
· 小结	第83-85页
结论	第85-87页
参考文献	第87-100页
缩略词	第100-102页
致谢	第102-103页
作者简介	第103 页

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