论文目录 | |
摘要 | 第1-8
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ABSTRACT | 第8-15
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文献综述 | 第15-37
页 |
第一章 产气荚膜梭菌引起的鸡坏死性肠炎研究进展 | 第15-37
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· 人类和动物的梭菌感染 | 第16-23
页 |
· 与毒力有关的产气荚膜梭菌的毒素和酶 | 第17-21
页 |
· 产气荚膜梭菌的全基因组序列 | 第21-22
页 |
· 产气荚膜梭菌的VirR/VirS 调节系统 | 第22-23
页 |
· 鸡坏死性肠炎 | 第23-26
页 |
· NE 株的分子分型 | 第24
页 |
· NE 的诱因 | 第24-25
页 |
· NE 的发病机制 | 第25
页 |
· NE 的防制 | 第25-26
页 |
· 产气荚膜梭菌感染的免疫保护 | 第26-30
页 |
· α-毒素在产气荚膜梭菌感染的免疫保护力的作用 | 第27-30
页 |
· 活的口服减毒沙门氏菌重组载体疫苗 | 第30-35
页 |
· 沙门氏菌载体 | 第31-32
页 |
· 质粒载体 | 第32-33
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· 异源性抗原表达及其免疫原性 | 第33-34
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· 细胞抗原表达的位置 | 第34-35
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· 论文设计思路及研究方法 | 第35-37
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试验研究 | 第37-93
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第二章 A 型产气荚膜梭菌几种分泌蛋白的分离鉴定 | 第37-48
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· 材料 | 第37-39
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· 菌株及血清抗体 | 第37
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· 主要试剂及试剂盒 | 第37-38
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· 培养基 | 第38
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· SDS-PAGE 及Western blot 缓冲液的配制 | 第38-39
页 |
· 仪器设备 | 第39
页 |
· 方法 | 第39-43
页 |
· 分泌蛋白的沉淀及浓缩 | 第39-40
页 |
· SDS-PAGE 电泳 | 第40-41
页 |
· Western blot | 第41-42
页 |
· 蛋白质质谱分析 | 第42-43
页 |
· 结果 | 第43-45
页 |
· A 型产气荚膜梭菌外毒素粗提 | 第43
页 |
· CP4 外毒素的SDS-PAGE 和Western blot 的分析结果 | 第43
页 |
· 三种分泌蛋白的质谱分析结果 | 第43-45
页 |
· 讨论 | 第45-47
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· 小结 | 第47-48
页 |
第三章 重组蛋白的表达纯化及对肉鸡NE 的免疫保护效果 | 第48-70
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· 材料 | 第48-52
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· 菌种、质粒和载体 | 第48-49
页 |
· 主要试剂及试剂盒 | 第49-50
页 |
· 仪器设备 | 第50-51
页 |
· 培养基 | 第51
页 |
· 缓冲液 | 第51-52
页 |
· 实验动物 | 第52
页 |
· 方法 | 第52-61
页 |
· 基因克隆 | 第52-57
页 |
· 重组蛋白的过量表达 | 第57-58
页 |
· 重组蛋白的分离纯化 | 第58-59
页 |
· SDS-PAGE 及Western blot 分析 | 第59
页 |
· 重组蛋白的免疫试验 | 第59-60
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· 血清生长抑制试验 | 第60
页 |
· 鸡血清抗体滴度的测定 | 第60-61
页 |
· 结果 | 第61-67
页 |
· 目的基因的克隆 | 第61-62
页 |
· 表达质粒载体的构建 | 第62-63
页 |
· 重组蛋白的表达条件优化 | 第63
页 |
· 6×His-tagged 重组蛋白的纯化 | 第63-65
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· 重组蛋白的浓缩 | 第65
页 |
· 免疫鸡对攻毒诱导的坏死性肠炎的免疫保护性 | 第65-67
页 |
· 重组抗原诱导免疫鸡的抗原特异性的抗体免疫反应 | 第67
页 |
· 血清细菌生长抑制试验结果 | 第67
页 |
· 讨论 | 第67-69
页 |
· 小结 | 第69-70
页 |
第四章 减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗对NE 的免疫保护效果 | 第70-80
页 |
· 材料 | 第70-72
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· 实验动物 | 第70
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· 菌株及质粒 | 第70-71
页 |
· 试剂及培养基 | 第71-72
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· 各种溶液的配制 | 第72
页 |
· 方法 | 第72-74
页 |
· 疫苗株的准备 | 第72
页 |
· 动物饲养管理 | 第72-73
页 |
· 疫苗免疫试验 | 第73
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· 病理剖检 | 第73
页 |
· 抗体滴度的ELISA 测定 | 第73-74
页 |
· 结果 | 第74-77
页 |
· 免疫鸡对试验诱导的NE 的免疫保护性 | 第74
页 |
· 疫苗免疫诱导的抗原特异性抗体免疫反应 | 第74-77
页 |
· 讨论 | 第77-79
页 |
· 小结 | 第79-80
页 |
第五章 减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗对沙门氏菌的免疫保护效果 | 第80-93
页 |
· 材料 | 第81-83
页 |
· 实验动物 | 第81
页 |
· 菌株 | 第81
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· 药品试剂 | 第81-82
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· 培养基及溶液的配制 | 第82-83
页 |
· 方法 | 第83-86
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· 药敏试验 | 第83
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· 抗萘啶酸沙门氏菌菌株的选育 | 第83
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· 实验动物的饲养管理 | 第83-84
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· 攻毒菌株的准备 | 第84
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· 疫苗株的准备 | 第84
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· 免疫程序和细菌定殖减少的评价 | 第84-85
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· 样品采集 | 第85
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· 粪便样品中疫苗株细菌的计数 | 第85
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· 内脏组织中攻毒菌株细菌的计数 | 第85
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· 粪便样品中攻毒株细菌的计数 | 第85-86
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· 结果 | 第86-90
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· 药敏试验结果 | 第86
页 |
· 免疫鸡粪便样品中的疫苗株计数结果 | 第86-87
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· 疫苗株χ9241-tHP 诱导的攻毒菌株定殖减少结果 | 第87-88
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· 疫苗株χ9352–tHP 诱导的攻毒菌株定殖减少结果 | 第88-90
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· 讨论 | 第90-92
页 |
· 小结 | 第92-93
页 |
结论 | 第93-94
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本论文的创新点 | 第94-95
页 |
参考文献 | 第95-108
页 |
附录 | 第108-116
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缩略词 | 第116-118
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致谢 | 第118-119
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作者简介 | 第119-120
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