论文目录 | |
| 前言 | 第13-31
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| 一、白细胞的其始黏附 | 第14-15
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| 二、选择素家族的组成及分子结构 | 第15-17
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| 三、选择素的基因表达与调控 | 第17-18
页 |
| 四、选择素分子的配体 | 第18-21
页 |
| 1．糖脂与选择素的结合 | 第19-20
页 |
| 2．糖蛋白作为选择素理想的高亲和性配体 | 第20-21
页 |
| 五、起始黏附过程中选择素及其配体介导的信号转导 | 第21-22
页 |
| 六、PSGL-1的研究进展 | 第22-30
页 |
| 1．PSGL-1的基本结构 | 第23-24
页 |
| 2．PSGL-1适应与P-选择素结合的翻译后修饰 | 第24-26
页 |
| 3．PSGL-1在组织中的分布及细胞膜上的定位 | 第26-27
页 |
| 4．PSGL-1与选择素间的作用 | 第27-29
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| 5．PSGL-1与信号转导 | 第29-30
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| 6．PSGL-1的研究在诊断治疗方面的应用 | 第30
页 |
| 七、本论文的研究目的和意义 | 第30-31
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| 材料与方法 | 第31-42
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| 一、实验材料 | 第31-32
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| 1．细胞 | 第31
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| 2．抗体 | 第31
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| 3．试剂 | 第31-32
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| 4．质粒 | 第32
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| 5．引物 | 第32
页 |
| 6．仪器设备 | 第32
页 |
| 二、实验方法 | 第32-42
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| 1．细胞培养 | 第32-33
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| 2．外周血中性粒细胞的制备 | 第33
页 |
| 3．PSGL-1的抗体交联 | 第33
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| 4．性粒细胞的细胞变形(shape change)实验 | 第33-34
页 |
| 5．中性粒细胞PSGL-1的标记 | 第34
页 |
| 6．中性粒细胞细胞骨架的标记 | 第34-35
页 |
| 7．中性粒细胞膜可溶蛋白的去垢剂抽提 | 第35
页 |
| 8．流式分析 | 第35-36
页 |
| 9．免疫荧光双标记 | 第36
页 |
| 10．质粒的制 | 第36-39
页 |
| 11．哺乳动物细胞电穿孔转染 | 第39
页 |
| 12．报告基因(荧光素酶双报告系统)检测 | 第39-40
页 |
| 13．RNA提取 | 第40
页 |
| 14．反转录(RT) | 第40-41
页 |
| 15．PCR | 第41-42
页 |
| 实验结果 | 第42-66
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| 一、PSGL-1抗体交联对白细胞骨架的影响 | 第42-57
页 |
| 1．PSGL-1抗体交联引起嗜中性粒细胞形态改变 | 第42-45
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| 2．PSGL-1成为交联活化后嗜中性粒细胞上与细胞骨架联系的成分 | 第45-47
页 |
| 3．PSGL-1抗体交联引起嗜中性粒细胞内F-actin的聚合和重新分布 | 第47-49
页 |
| 4．PSGL-1抗体交联引起的嗜中性粒细胞内F-actin的改变是酪氨酸磷酸化依赖的、c-Abl参与的 | 第49-52
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| 5．抗体交联活化的嗜中性粒细胞上PSGL-1极化分布 | 第52-53
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| 6．活化嗜中性粒细胞内F-actin的重新分布与PSGL-1的极化是时空相关的 | 第53-55
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| 7．活化嗜中性粒细胞内非受体酪氨酸激酶c-Abl重新分布 | 第55-57
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| 二、PSGL-1抗体交联对白细胞基因表达的影响 | 第57-66
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| 1．PSGL-1抗体交联增强了M-CSF基因启动子的转录活性 | 第57-58
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| 2．PSGL-1抗体交联增加了M-CSF的mRNA的表达 | 第58-61
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| 3．过表达c-Abl没有明显促进PSGL-1抗体交联引发的外源M-CSF启动子转录活性的上调 | 第61-62
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| 4．非受体酩氨酸激酶Syk参与了PSGL-1抗体交联引起的外源M-CSF启动子转录活性的上调 | 第62-63
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| 5．非受体酪氨酸激酶Syk的抑制剂抑制了PSGL-1抗体交联引起的内源M-CSF基因的转录 | 第63-66
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| 讨论 | 第66-74
页 |
| 一、黏附分子触发的白细胞活化过程中F-actin为结构基础的细胞骨架的改变是一个重要事件 | 第66-67
页 |
| 二、黏附分子触发的白细胞活化过程中的基因转录调控 | 第67-68
页 |
| 三、酪氨酸蛋白激酶在黏附分子触发的白细胞活化过程中扮演重要角色 | 第68-74
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| 1．c-Abl参与了PSGL-1抗体交联引起的人中性粒细胞中F-actin细胞骨架的改变 | 第71-72
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| 2．Syk参与了PSGL-1抗体交联引起的Jurkat细胞中CSF-1基因转录活性的上调 | 第72-74
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| 结论 | 第74-75
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| 本论文主要创新点 | 第75-76
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| 参考文献 | 第76-91
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| 致谢 | 第91-92
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| 在读期间发表论著情况 | 第92
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