论文目录 | |
中文摘要 | 第15-18页 |
英文摘要 | 第18-23页 |
文献综述 | 第23-54页 |
第一部分 家禽黏膜免疫系统及免疫功能的研究进展 | 第23-44页 |
1 家禽黏膜免疫系统 | 第23-44页 |
· 家禽黏膜免疫系统的结构 | 第23-31页 |
· 黏膜相关淋巴样组织(MALT) | 第24-28页 |
· 效应部位 | 第28-30页 |
· 致敏淋巴细胞散布途径 | 第30-31页 |
· 家禽黏膜免疫的功能 | 第31-32页 |
· 非特异性免疫功能 | 第31页 |
· 特异性免疫功能 | 第31-32页 |
· 免疫耐受 | 第32页 |
· 家禽黏膜免疫反应的特点 | 第32页 |
· 家禽黏膜免疫反应的机制 | 第32-34页 |
· SIgA 的结构及特性 | 第32-33页 |
· SIgA 的产生及其转运 | 第33-34页 |
· 家禽黏膜免疫反应在抗感染中的作用 | 第34-35页 |
· 家禽黏膜免疫的免疫途径 | 第35-36页 |
· 呼吸道黏膜免疫 | 第35页 |
· 消化道黏膜免疫 | 第35-36页 |
· 眼结膜黏膜免疫 | 第36页 |
· 家禽黏膜免疫的调节 | 第36-37页 |
· T 细胞的调节作用 | 第36-37页 |
· 上皮细胞的调节作用 | 第37页 |
· 粘膜免疫系统的记忆功能 | 第37页 |
· 神经内分泌因素的调节作用 | 第37页 |
· 家禽黏膜免疫的免疫佐剂 | 第37-41页 |
· 霍乱毒素和大肠杆菌不耐热毒素 | 第38页 |
· 细菌脂多糖 | 第38-39页 |
· 益生菌 | 第39页 |
· 核酸佐剂 | 第39-40页 |
· 细胞因子佐剂 | 第40-41页 |
· 壳聚糖 | 第41页 |
· 疫苗与黏膜免疫的关系 | 第41-42页 |
· 家禽黏膜免疫的研究动向 | 第42-44页 |
· 家禽黏膜免疫机理的研究 | 第42-43页 |
· 分泌性 IgA 生物活性的研究 | 第43页 |
· 提高局部黏膜免疫应答能力的研究 | 第43页 |
· 新的疫苗释放系统的研究 | 第43-44页 |
第二部分 家禽对新城疫病毒免疫反应的研究进展 | 第44-54页 |
1 家禽对 NDV 的体液免疫 | 第44-48页 |
· 体液免疫的作用机制 | 第44-46页 |
· 影响体液免疫的因素 | 第46-48页 |
· 疫苗种类对体液免疫的影响 | 第46页 |
· 免疫程序对体液免疫的影响 | 第46-47页 |
· 免疫抑制病原对体液免疫的影响 | 第47-48页 |
2 家禽对 NDV 的细胞免疫 | 第48-49页 |
3 家禽对 NDV 的黏膜免疫 | 第49-52页 |
· 哈德氏腺(HG)在对 NDV 黏膜免疫反应中的作用 | 第49-50页 |
· CALT 在对 NDV 黏膜免疫反应中的作用 | 第50页 |
· BALT 在对 NDV 黏膜免疫反应中的作用 | 第50-51页 |
· GALT 在对 NDV 黏膜免疫反应中的作用 | 第51页 |
· ND疫苗类型对黏膜免疫的影响 | 第51-52页 |
4 ND 疫苗免疫失败的原因 | 第52-53页 |
· 首免时间不合适 | 第52页 |
· 免疫方法不当 | 第52-53页 |
· 免疫间隔时间不合理 | 第53页 |
· 免疫抑制因素的影响 | 第53页 |
5 本研究的目的与意义 | 第53-54页 |
研究报告 | 第54-128页 |
第一部分 鸡 SIgA 的纯化及其抗病毒活性的初步研究 | 第54-66页 |
1 材料与方法 | 第55-59页 |
· 试验动物及鸡胚 | 第55页 |
· 病毒 | 第55页 |
· 胆汁及主要试剂 | 第55页 |
· 主要仪器 | 第55页 |
· 主要试剂的配制 | 第55-56页 |
· 1%鸡红细胞悬液 | 第56页 |
· SIgA 的粗提纯 | 第56-57页 |
· (NH_4)_2SO_4盐析法 | 第56页 |
· PEG 沉淀法 | 第56-57页 |
· SIgA 的纯化 | 第57页 |
· 蛋白含量测定 | 第57页 |
· SIgA 纯度的鉴定 | 第57页 |
· 琼脂扩散试验 | 第57页 |
· 鸡 SIgA 体外抗 NDV 试验 | 第57-58页 |
· NDV 处理及分组 | 第57-58页 |
· 鸡胚接种 | 第58页 |
· 鸡胚尿囊液 NDV 血凝效价的测定 | 第58页 |
· 鸡胚病毒中和试验 | 第58-59页 |
· 鸡SIgA体内抗NDV试验 | 第59页 |
2 结果与分析 | 第59-64页 |
· 鸡胆汁中 SIgA 过柱纯化 | 第59-60页 |
· SIgA 粗提物和纯化的 SIgA 的蛋白含量 | 第60页 |
· SIgA 粗提物和纯化的SIgA 的SDS-PAGE 电泳 | 第60-61页 |
· 纯化的鸡 SIgA 琼脂扩散试验的鉴定结果 | 第61-62页 |
· 鸡 SIgA 体外抗 NDV 试验结果 | 第62-63页 |
· 鸡胚尿囊液中 NDV 血凝效价测定结果 | 第63页 |
· 鸡胚病毒中和试验结果 | 第63页 |
· 鸡SIgA 体内抗NDV 试验结果 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-66页 |
· 关于纯化鸡 SIgA 的意义 | 第64页 |
· 关于鸡 SIgA 纯化方法的建立 | 第64-65页 |
· 关于 SIgA 的抗病毒活性 | 第65-66页 |
第二部分 不同途径免疫 NDV 弱毒苗诱导鸡体黏膜和系统免疫发生规律的研究 | 第66-84页 |
1 材料与方法 | 第66-71页 |
· 试验动物 | 第66页 |
· 疫苗及病毒 | 第66-67页 |
· NDV阳性及阴性血清 | 第67页 |
· 主要试剂及其配制方法 | 第67-68页 |
· 主要仪器 | 第68页 |
· ELISA包被抗原的制备 | 第68页 |
· 1%鸡红细胞悬液的制备 | 第68页 |
· 检测抗 NDV 特异性 SIgA、IgG 和 IgM 的间接 ELISA 方法的建立 | 第68-69页 |
· 酶标抗体最佳工作浓度的确定 | 第68页 |
· 抗原最适包被浓度和样品最佳稀释度的确定 | 第68-69页 |
· 间接ELISA程序 | 第69页 |
· 特异性试验 | 第69页 |
· 血凝和血凝抑制试验试验 | 第69-70页 |
· 试验设计 | 第70页 |
· 被检样品采集方法 | 第70页 |
· 数据统计与分析 | 第70-71页 |
2 结果与分析 | 第71-80页 |
· 间接 ELISA 方法最佳反应条件的确定 | 第71-72页 |
· 酶标抗体工作浓度的确定 | 第71页 |
· 抗原包被和样品最佳稀释度的确定 | 第71-72页 |
· 特异性试验结果 | 第72页 |
· 不同途径免疫 NDV 弱毒苗引起的系统体液免疫反应 | 第72-74页 |
· 血清 HI 抗体滴度 | 第72-73页 |
· 血清NDV 特异性IgM、IgG 和 IgA 抗体水平 | 第73-74页 |
· 呼吸道黏膜相关抗体介导的黏膜免疫反应 | 第74-75页 |
· 气管洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第74页 |
· 肺洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第74-75页 |
· 消化道黏膜相关抗体介导的黏膜免疫反应 | 第75-80页 |
· 十二指肠洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第75-76页 |
· 空肠洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第76-77页 |
· 回肠洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第77-78页 |
· 盲肠洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第78-79页 |
· 直肠洗液中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 SIgA 抗体水平 | 第79页 |
· 胆汁相关抗体介导的黏膜免疫反应 | 第79-80页 |
3 讨论 | 第80-84页 |
· 关于检测鸡 NDV 特异性 SIgA、IgG 和 IgM 的间接 ELISA 方法的建立 | 第80-81页 |
· 血清中 NDV 特异性抗体介导的系统免疫的发生规律 | 第81页 |
· 呼吸道中NDV特异性介导的黏膜免疫的发生规律 | 第81-82页 |
· 消化道中 NDV 特异性抗体介导的黏膜免疫的发生规律 | 第82页 |
· 胆汁中 NDV 特异性抗体的消长规律 | 第82-83页 |
· 不同免疫途径免疫 ND 弱毒苗诱导的局部黏膜免疫反应与共同黏膜免疫反应的关系 | 第83-84页 |
第三部分 不同途径免疫NDV弱毒苗诱导的黏膜和免疫器官中 IgA、IgM和 IgG阳性细胞变化规律的研究 | 第84-105页 |
1 材料与方法 | 第84-87页 |
· 疫苗、试验动物和主要试剂 | 第84-85页 |
· 主要仪器 | 第85页 |
· 主要溶液的配制 | 第85页 |
· 试验动物分组及处理 | 第85-86页 |
· 样品的采集及处理 | 第86页 |
· 组织包埋及切片 | 第86页 |
· 载、盖玻片的处理 | 第86页 |
· 石蜡切片的制备 | 第86页 |
· 检测 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞的间接免疫过氧化物酶法的优化与建立 | 第86-87页 |
· 间接免疫过氧化物酶法反应条件的优化 | 第86页 |
· 间接免疫过氧化物酶法的反应程序 | 第86-87页 |
· 组织学观察与数据处理统计分析 | 第87页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞判定标准 | 第87页 |
· 组织部位判定标准 | 第87页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞的计数 | 第87页 |
· 数据处理 | 第87页 |
2 结果与分析 | 第87-101页 |
· 检测 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞的间接免疫组化法的建立 | 第87-90页 |
· 抗原修复方法的选择 | 第87-88页 |
· 一抗最佳稀释度的确定 | 第88-89页 |
· 一抗最佳孵育条件的确定 | 第89-90页 |
· 免疫组化各因素经过组合优化后的反应程序 | 第90页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞在脾脏中的分布规律 | 第90-91页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞在气管黏膜中的分布规律 | 第91-92页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞在不同肠管黏膜中的分布规律 | 第92-97页 |
· 十二指肠黏膜中 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞分布规律 | 第92-93页 |
· 空肠黏膜中 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞分布规律 | 第93-94页 |
· 回肠黏膜中 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞分布规律 | 第94-95页 |
· 盲肠扁桃体黏膜 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞分布规律 | 第95-96页 |
· 直肠黏膜中 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞分布规律 | 第96-97页 |
· 不同肠管黏膜固有层IgA、IgM和IgG阳性细胞数量的增殖规律 | 第97-101页 |
· 脾脏中 IgAI、gM 和 IgG 阳性细胞数量的增殖规律 | 第97-98页 |
· 十二指肠黏膜固有层 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞数量的增殖规律 | 第98-99页 |
· 空肠黏膜固有层 IgAI、gM 和 IgG 阳性细胞数量的增殖规律 | 第99页 |
· 回肠黏膜固有层 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞数量的增殖规律 | 第99-100页 |
· 直肠黏膜固有层 IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞数量的增殖规律 | 第100-101页 |
3 讨论 | 第101-105页 |
· 免疫组织化学试验中相关问题探讨 | 第101页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞在脾脏中的发生增值规律及其免疫学意义 | 第101-102页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞在呼吸道中的发生增值规律及其免疫学意义 | 第102-103页 |
· IgA、IgM 和 IgG 阳性细胞在消化道中的发生增值规律及其免疫学意义 | 第103-105页 |
第四部分 免疫抑制对 NDV 弱毒苗诱导的鸡体黏膜免疫反应的影响 | 第105-119页 |
1 材料与方法 | 第105-107页 |
· SPF 鸡胚 | 第105页 |
· 主要试剂及仪器 | 第105-106页 |
· NDV 疫苗及强毒 | 第106页 |
· 试验设计 | 第106页 |
· 样品的采集及处理 | 第106页 |
· 鸡外周血淋巴细胞数量的测定 | 第106页 |
· 血清 HI 抗体滴度的测定 | 第106-107页 |
· 间接 ELISA 反应程序 | 第107页 |
· 免疫组化反应程序 | 第107页 |
· 攻毒试验 | 第107页 |
· 数据处理与分析 | 第107页 |
2 结果与分析 | 第107-115页 |
· 免疫抑制对法氏囊、胸腺和脾脏相对重量的影响 | 第107-108页 |
· 免疫抑制对外周血淋巴细胞总数的影响 | 第108-109页 |
· 免疫抑制对血清 HI 抗体滴度的影响 | 第109-110页 |
· 免疫抑制对气管洗液中 NDV 特异性 SIgA 抗体水平的影响 | 第110页 |
· 免疫抑制对十二指肠洗液 NDV 特异性 SIgA 抗体水平的影响 | 第110-111页 |
· 免疫抑制对胆汁 NDV 特异性 SIgA 抗体水平的影响 | 第111-112页 |
· 免疫抑制对十二指肠黏膜 IgA 阳性细胞的分布和数量的影响 | 第112页 |
· 免疫抑制对空肠黏膜IgA阳性细胞的分布和数量的影响 | 第112-113页 |
· 免疫抑制对空肠黏膜 IgA 阳性细胞的分布和数量的影响 | 第113-114页 |
· 攻毒后试验结果 | 第114-115页 |
3 讨论 | 第115-119页 |
· 关于 SPF 鸡体液免疫抑制模型的建立 | 第115-116页 |
· SPF 鸡体液免疫抑制对局部黏膜免疫的影响 | 第116-117页 |
· SPF 鸡体液免疫抑制模型的建立的意义 | 第117-119页 |
第五部分 免疫增强剂对 NDV 弱毒苗诱导的鸡体黏膜免疫反应的影响 | 第119-128页 |
1 材料与方法 | 第119-121页 |
· 试验动物 | 第119页 |
· 疫苗和毒株 | 第119页 |
· 免疫增强剂 | 第119-120页 |
· CpG ODN | 第119-120页 |
· 黄芪多糖 | 第120页 |
· 左旋咪唑 | 第120页 |
· 各种免疫增强剂与 NDV 弱毒苗的准备 | 第120页 |
· 试验设计 | 第120-121页 |
· 血清 HI 抗体滴度的测定 | 第121页 |
· NDV 特异性 SIgA 抗体水平的检测 | 第121页 |
· 数据处理与统计分析 | 第121页 |
2 结果与分析 | 第121-125页 |
· 不同免疫增强剂对血清 HI 抗体滴度的影响 | 第121-122页 |
· 不同免疫增强剂对气管洗液 NDV 特异性 SIgA 水平的影响 | 第122-123页 |
· 不同免疫增强剂对十二指肠洗液 NDV 特异性 SIgA 水平的影响 | 第123-124页 |
· 不同免疫增强剂对胆汁 NDV 特异性 SIgA 水平的影响 | 第124-125页 |
3 讨论 | 第125-128页 |
结论 | 第128-129页 |
创新点 | 第129-130页 |
参考文献 | 第130-147页 |
致谢 | 第147-148页 |
博士期间待发表或已发表论文 | 第148-149页 |
博士学位论文内容简介及自评 | 第149
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