论文目录 | |
目录 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
前言 | 第9-15页 |
材料与方法 | 第15-31页 |
1 材料 | 第15-22页 |
· 小鼠模型 | 第15页 |
· 菌株和质粒DNA | 第15页 |
· 细胞系 | 第15页 |
· 培养基、试剂盒和主要试剂 | 第15-17页 |
· 耗材 | 第17页 |
· 抗体 | 第17-18页 |
· 主要仪器设备 | 第18-19页 |
· 主要溶液的配制 | 第19-21页 |
· 引物序列 | 第21-22页 |
2 实验方法 | 第22-31页 |
· 质粒DNA的扩增和小量制备 | 第22页 |
· 质粒DNA的大量制备和纯化 | 第22-23页 |
· DAOY细胞的复苏、传代培养、冻存 | 第23-24页 |
· 细胞复苏 | 第23页 |
· 细胞的传代培养 | 第23-24页 |
· 细胞的冻存 | 第24页 |
· 神经细胞的原代培养 | 第24页 |
· 细胞免疫荧光 | 第24-25页 |
· 细胞的转染 | 第25页 |
· 细胞总蛋白提取、浓度测定和WESTERN-BLOT分析 | 第25-28页 |
· BCA法进行蛋白定量 | 第25-26页 |
· SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
· 转膜 | 第27页 |
· 免疫学检测 | 第27页 |
· 化学发光法检测 | 第27-28页 |
· 组织或细胞RNA的提取和REALTIME PCR | 第28-29页 |
· 组织或细胞RNA的提取 | 第28页 |
· 逆转录为cDNA的第一链 | 第28-29页 |
· Realtime-PCR反应 | 第29页 |
· H&E染色 | 第29-30页 |
· 免疫组织化学染色 | 第30页 |
· 统计学分析 | 第30-31页 |
实验结果 | 第31-59页 |
· 神经元特异性敲除NBS1基因可以引起MICROCEPHALY | 第31-34页 |
· NBS1的缺失导致了嗅球发育缺陷 | 第34-36页 |
· NBS1缺失影响了发育期脑皮质内ATR-CHK1信号途径的活化 | 第36-39页 |
· NBS1缺失抑制了神经元前体细胞内CHK1募集到DNA损伤位点上 | 第39-40页 |
· NBS1调节MCPH1蛋白的稳定性 | 第40-45页 |
· NBS1的缺失导致了神经元前体细胞的增殖缺陷 | 第45-48页 |
· NBS1缺陷不影响皮质神经元的凋亡 | 第48-54页 |
· P53活化导致了NBS1缺失的MICROCEPHALY | 第54-59页 |
讨论 | 第59-62页 |
小结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录 | 第69-71页 |
综述 | 第71-91页 |
参考文献 | 第79-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
发表文章 | 第92-93页 |
发表会议摘要 | 第93-97页 |
个人简历 | 第97-99页 |