论文目录 | |
中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-15页 |
英文缩略词表 | 第15-17页 |
第一部分 文献综述 | 第17-40页 |
一 HSP70 及其辅助分子伴侣 | 第17-29页 |
1 HSP70 | 第17-20页 |
· HSP70 的结构 | 第17-19页 |
· HSP70 的种类 | 第19页 |
· HSP70 的ATPase 循环 | 第19-20页 |
2 J 蛋白 | 第20-22页 |
· J 蛋白的结构和种类 | 第20-21页 |
· J 蛋白的作用机制 | 第21-22页 |
3 核苷酸转换因子 | 第22-29页 |
· GrpE | 第23页 |
· BAG 蛋白 | 第23-24页 |
· HspBP1 | 第24-26页 |
· HSP110 | 第26页 |
· 植物中的NEF 研究现状 | 第26-29页 |
二 拟南芥热敏感突变体的研究进展 | 第29-40页 |
1 拟南芥的诱变方法 | 第29-34页 |
· 物理诱变 | 第30页 |
· 化学诱变 | 第30-31页 |
· 插入突变 | 第31-34页 |
2 拟南芥热敏感突变体的筛选方法 | 第34-36页 |
· 基础耐热性缺失的突变体的筛选 | 第34-35页 |
· 获得耐热性缺失的突变体的筛选 | 第35-36页 |
3 拟南芥热敏感突变体研究现状 | 第36-40页 |
· 热激蛋白类 | 第36-37页 |
· 热激转录因子类 | 第37页 |
· Ca~(2+)/CaM 相关的热敏感突变体 | 第37页 |
· 植物激素信号途径相关类 | 第37-38页 |
· 泛素化相关的热敏感突变体 | 第38页 |
· 其他因子 | 第38-40页 |
第二部分 实验论文 | 第40-121页 |
第一章 atfes1a 基因基本的生物学特性分析 | 第40-73页 |
1 实验材料 | 第40-42页 |
2 实验方法 | 第42-56页 |
· 酵母功能互补实验 | 第42-44页 |
· 质粒的提取与转化 | 第44-47页 |
· Western 杂交 | 第47-48页 |
· 实时定量PCR | 第48-50页 |
· atfes1a 蛋白的亚细胞定位 | 第50-52页 |
· 稳态的ATPase 实验 | 第52-56页 |
3 结果与分析 | 第56-71页 |
· atfes1a 基因的系统进化分析结果 | 第56-57页 |
· atfes1a 基因与酵母Fe51 基因功能互补 | 第57-60页 |
· atfes1a 基因在逆境条件下的表达特性 | 第60-63页 |
· atfes1a 蛋白定位于细胞质 | 第63-66页 |
· atfes1a 不影响稳态的ATPase 体外活性 | 第66-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
第二章 拟南芥atfes1a 突变体及其互补系的耐热性分析 | 第73-88页 |
1 实验材料 | 第73页 |
2 实验方法 | 第73-76页 |
· 拟南芥atfes1a突变体salk-021784、salk-012416的筛选和分子鉴定 | 第73-75页 |
· atfes1a 突变体的耐热性分析 | 第75页 |
· salk-021784 热敏感突变体的互补实验 | 第75-76页 |
3 结果与分析 | 第76-87页 |
· atfes1a 突变体salk-021784、salk-012416 的分子鉴定结果 | 第76-79页 |
· atfes1a 缺失导致拟南芥耐热性下降 | 第79-83页 |
· 过表atfes1a 可以修复salk-021784 突变体的热敏感缺陷 | 第83-87页 |
4 讨论 | 第87-88页 |
第三章 atfes1a 对热激蛋白信号转导的影响 | 第88-106页 |
1 实验材料 | 第88页 |
2 实验方法 | 第88-93页 |
· atfes1a 突变体中热激蛋白转录本的Northern 杂交分析 | 第88-91页 |
· atfes1a 突变体中热激蛋白转录本的实时定量PCR 分析 | 第91-92页 |
· 高温对atfes1a 突变体中HSP70 蛋白水平的影响 | 第92-93页 |
3 结果与分析 | 第93-102页 |
· atfes1a 基因缺失上调热激基因的转录本水平 | 第93-98页 |
· atfes1a 基因缺失导致HSP70 蛋白水平下降 | 第98-102页 |
4 讨论 | 第102-106页 |
第四章 atfes1a 突变体热敏感成因初探 | 第106-121页 |
1 实验材料 | 第106页 |
2 实验方法 | 第106-110页 |
· Western 检测全蛋白的泛素化程度 | 第106页 |
· 转萤光酶基因拟南芥的萤光酶复性实验 | 第106-108页 |
· 体外的分子伴侣系统功能的检测 | 第108-110页 |
3 结果与分析 | 第110-118页 |
· atfes1a 基因缺失导致高温下全蛋白泛素化加强 | 第110-111页 |
· atfes1a 基因缺失导致高温胁迫后萤光酶复性变慢 | 第111-115页 |
· atfes1a 不介入分子伴侣系统活性 | 第115-118页 |
4 讨论 | 第118-121页 |
总结 | 第121-123页 |
参考文献 | 第123-136页 |
攻读博士学位期间整理发表的论文 | 第136-137页 |
致谢 | 第137
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