论文目录 | |
摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
缩写符号说明 | 第8-14页 |
第一章 绪论 | 第14-28页 |
1.1 引言 | 第14页 |
1.2 大豆乳清蛋白概述 | 第14-17页 |
1.2.1 大豆乳清组分 | 第14页 |
1.2.2 大豆乳清蛋白组成 | 第14-17页 |
1.3 蛋白质/多糖相互作用 | 第17-24页 |
1.3.1 蛋白质和多糖的复合反应 | 第18-19页 |
1.3.2 蛋白质-多糖复合的影响因素 | 第19-24页 |
1.4 蛋白质-多糖复合作用在选择性纯化蛋白中的应用研究 | 第24-26页 |
1.5 本课题的立题依据和研究内容 | 第26-28页 |
1.5.1 立题依据 | 第26页 |
1.5.2 研究内容 | 第26-28页 |
第二章 大豆乳清蛋白/壳聚糖复合行为及选择性纯化Kunitz型胰蛋白酶抑制剂 | 第28-40页 |
2.1 引言 | 第28页 |
2.2 实验材料与主要仪器 | 第28-29页 |
2.2.1 实验材料 | 第28页 |
2.2.2 实验仪器 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-32页 |
2.3.1 大豆乳清的制备 | 第29页 |
2.3.2 浊度滴定 | 第29页 |
2.3.3 蛋白回收率测定 | 第29页 |
2.3.4 ζ-电位测定 | 第29-30页 |
2.3.5 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳 | 第30页 |
2.3.6 胰蛋白酶抑制剂活力(TIA)测定 | 第30-31页 |
2.3.7 胰凝乳蛋白酶抑制剂活力(CIA)测定 | 第31页 |
2.3.8 大豆乳清蛋白/壳聚糖复合前后高效凝胶排阻色谱(SEC-HPLC)分析 | 第31-32页 |
2.3.9 基质辅助激光解析/离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS) | 第32页 |
2.3.10 统计分析 | 第32页 |
2.4 结果与讨论 | 第32-39页 |
2.4.1 大豆乳清蛋白组分鉴定 | 第32-34页 |
2.4.2 大豆乳清蛋白/壳聚糖复合物形成过程中的pH滴定曲线 | 第34-35页 |
2.4.3 蛋白多糖质量比对大豆乳清蛋白/壳聚糖复合物形成的影响 | 第35-36页 |
2.4.4 大豆乳清蛋白/壳聚糖复合物形成过程中的电荷守恒关系 | 第36-37页 |
2.4.5 Tricine-SDS-PAGE分析 | 第37-39页 |
2.5 本章小结 | 第39-40页 |
第三章 大豆乳清蛋白/卡拉胶复合行为及选择性纯化大豆乳清蛋白 | 第40-54页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 实验材料与主要仪器 | 第40-41页 |
3.2.1 实验材料 | 第40-41页 |
3.2.2 实验仪器 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-43页 |
3.3.1 大豆乳清的制备 | 第41页 |
3.3.2 低等电点蛋白(LIP)和高等电点蛋白(HIP)制备 | 第41页 |
3.3.3 浊度滴定 | 第41-42页 |
3.3.4 蛋白回收率测定 | 第42页 |
3.3.5 ζ-电位测定 | 第42页 |
3.3.6 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳 | 第42页 |
3.3.7 胰蛋白酶抑制剂活力(TIA)测定 | 第42页 |
3.3.8 胰凝乳蛋白酶抑制剂活力(CIA)测定 | 第42页 |
3.3.9 SEC-HPLC分析 | 第42页 |
3.3.10 等温滴定量热(ITC) | 第42-43页 |
3.3.11 多糖的去除 | 第43页 |
3.3.12 统计分析 | 第43页 |
3.4 结果与讨论 | 第43-53页 |
3.4.1 硫酸铵分级盐析对大豆乳清蛋白(SWP)的初级分离 | 第43-44页 |
3.4.2 LIP-卡拉胶和HIP-卡拉胶体系的浊度滴定行为 | 第44-46页 |
3.4.3 Tricine-SDS-PAGE分析两组蛋白与卡拉胶(CG)的选择性复合行为 | 第46-48页 |
3.4.4 总生物分子浓度(Cp)和滴定路径的改变对选择性复合行为的影响 | 第48-50页 |
3.4.5 多糖的去除 | 第50页 |
3.4.6 蛋白多糖选择性复合的热力学规律 | 第50-53页 |
3.5 本章小结 | 第53-54页 |
第四章 多糖电荷密度影响大豆乳清蛋白选择性复合行为的研究 | 第54-65页 |
4.1 引言 | 第54页 |
4.2 实验材料与主要仪器 | 第54-55页 |
4.2.1 实验材料 | 第54页 |
4.2.2 实验仪器 | 第54-55页 |
4.3 实验方法 | 第55-56页 |
4.3.1 大豆乳清的制备 | 第55页 |
4.3.2 制备KTI和BBI的混合物(KBM) | 第55页 |
4.3.3 浊度滴定 | 第55页 |
4.3.4 蛋白回收率测定 | 第55页 |
4.3.5 ζ-电位测定 | 第55页 |
4.3.6 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳 | 第55-56页 |
4.3.7 SEC-HPLC分析 | 第56页 |
4.3.8 多糖的去除 | 第56页 |
4.3.9 统计分析 | 第56页 |
4.4 结果与讨论 | 第56-64页 |
4.4.1 pH及混合比例对KBM?羧基多糖复合行为的影响 | 第56-57页 |
4.4.2 pH及混合比例对KBM?硫酸多糖复合行为的影响 | 第57-59页 |
4.4.3 多糖电荷密度与蛋白回收率和电荷分布的关系 | 第59-60页 |
4.4.4 KBM与羧基多糖的选择性复合 | 第60-62页 |
4.4.5 KBM与硫酸多糖的选择性复合 | 第62-63页 |
4.4.6 蛋白与多糖的分离 | 第63-64页 |
4.5 本章小结 | 第64-65页 |
第五章 Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂与 ι-卡拉胶的两步结合热力学行为研究 | 第65-78页 |
5.1 引言 | 第65页 |
5.2 实验材料与主要仪器 | 第65-66页 |
5.2.1 实验材料 | 第65页 |
5.2.2 实验仪器 | 第65-66页 |
5.3 实验方法 | 第66-68页 |
5.3.1 大豆乳清的制备 | 第66页 |
5.3.2 Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂的制备 | 第66页 |
5.3.3 浊度滴定 | 第66-67页 |
5.3.4 ζ-电位分析及动态光散射 | 第67页 |
5.3.5 等温滴定量热(ITC) | 第67页 |
5.3.6 统计分析 | 第67-68页 |
5.4 结果与讨论 | 第68-77页 |
5.4.1 在不同pH及混合比例下BBI与卡拉胶的复合行为 | 第68-70页 |
5.4.2 蛋白起始浓度对BBI-卡拉胶热力学行为的影响 | 第70-71页 |
5.4.3 离子浓度对BBI-卡拉胶热力学行为的影响 | 第71-74页 |
5.4.4 温度对BBI-卡拉胶热力学行为的影响 | 第74页 |
5.4.5 BBI与不同类型多糖结合的热力学行为 | 第74-77页 |
5.5 本章小结 | 第77-78页 |
第六章 双糖复合法去除胰蛋白酶抑制剂及选择性纯化Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂 | 第78-89页 |
6.1 引言 | 第78页 |
6.2 实验材料与主要仪器 | 第78-79页 |
6.2.1 实验材料 | 第78-79页 |
6.2.2 实验仪器 | 第79页 |
6.3 实验方法 | 第79-80页 |
6.3.1 大豆乳清的制备 | 第79页 |
6.3.2 浊度滴定 | 第79页 |
6.3.3 蛋白回收率测定 | 第79页 |
6.3.4 ζ-电位测定 | 第79-80页 |
6.3.5 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳 | 第80页 |
6.3.6 胰蛋白酶抑制剂活力(TIA)测定 | 第80页 |
6.3.7 胰凝乳蛋白酶抑制剂活力(CIA)测定方法 | 第80页 |
6.3.8 荧光光谱分析 | 第80页 |
6.3.9 SEC-HPLC分析 | 第80页 |
6.3.10 卡拉胶的去除 | 第80页 |
6.3.11 统计分析 | 第80页 |
6.4 结果与讨论 | 第80-88页 |
6.4.1 pH、壳聚糖分子量及混合比例对大豆乳清蛋白?壳聚糖复合行为的影响 | 第80-82页 |
6.4.2 蛋白回收率,胰蛋白酶抑制剂活性和胰凝乳蛋白酶抑制剂活性 | 第82-83页 |
6.4.3 大豆乳清蛋白与壳聚糖的选择性复合行为 | 第83-84页 |
6.4.4 荧光光谱分析大豆乳清蛋白与壳聚糖复合作用 | 第84-86页 |
6.4.5 大豆乳清蛋白与卡拉胶的第二步选择性复合行为 | 第86-87页 |
6.4.6 Tricine-SDS-PAGE结果分析 | 第87-88页 |
6.5 本章小结 | 第88-89页 |
第七章 高浓度阴离子多糖回收大豆乳清蛋白的筛选与工艺设计 | 第89-101页 |
7.1 引言 | 第89页 |
7.2 实验材料与主要仪器 | 第89-90页 |
7.2.1 实验材料 | 第89页 |
7.2.2 实验仪器 | 第89-90页 |
7.3 实验方法 | 第90-91页 |
7.3.1 大豆乳清的制备 | 第90页 |
7.3.2 蛋白回收率测定 | 第90页 |
7.3.3 Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳 | 第90页 |
7.3.4 蛋白多糖复合物微观结构 | 第90页 |
7.3.5 多糖的去除 | 第90页 |
7.3.6 统计分析 | 第90-91页 |
7.4 结果与讨论 | 第91-100页 |
7.4.1 高浓度阴离子多糖的筛选及实验反应器的组装 | 第91-93页 |
7.4.2 卡拉胶类型及pH对大豆乳清蛋白回收的影响 | 第93-94页 |
7.4.3 ι-卡拉胶添加状态及添加量对大豆乳清蛋白回收的影响 | 第94页 |
7.4.4 硫酸葡聚糖添加量对大豆乳清蛋白回收的影响 | 第94-95页 |
7.4.5 不同阴离子多糖与蛋白形成的复合物微观结构观察 | 第95-98页 |
7.4.6 多糖与蛋白的分离 | 第98-100页 |
7.5 本章小结 | 第100-101页 |
论文主要结论 | 第101-103页 |
展望 | 第103-104页 |
论文创新点 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
参考文献 | 第106-115页 |
附录:作者攻读博士期间发表成果清单 | 第115页 |