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HRE2.Grp78嵌合启动子调控VP3表达进行鼻咽癌5-ALA-PDT/基因治疗的研究

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HRE2.Grp78嵌合启动子调控VP3表达进行鼻咽癌5-ALA-PDT/基因治疗的研究
论文目录
 
中文摘要第1-7 页
英文摘要第7-14 页
英汉缩写词简表第14-16 页
前言第16-20 页
实验流程总图第20-26 页
第一章:构建真核质粒表达载体PcDNA3.1(-)Grp78p VP_3-Myc-CMV,PcDNA3.1(-)Hre_2.Grp78p.VP_3-Myc-CMV和PcDNA3.1(-)CMV.VP_3-Myc第26-43 页
  · 材料第26-28 页
    · 质粒第26-27 页
    · 引物第27 页
    · 试剂第27 页
    · 主要的仪器设备第27-28 页
  · 方法第28-32 页
    · PcDNA3.1(-)Grp78p.VP3-Myc的构建第28-30 页
    · PcDNA3.1(-)Hre2.Grp78p.VP_3-Myc的构建第30 页
    · PcDNA3.1(-)CMV.VP_3-Myc的构建第30-31 页
    · PcDNA3.1(-)VP_3-Myc,PcDNA3.1(-)Grp78p.VP_3-Myc,PcDNA3.1(-)Hre_2.Grp78p.VP_3-Myc的巨细胞启动子的切除第31-32 页
  · 结果第32-40 页
    · Grp78pPCR 产物扩增结果第32 页
    · 真核质粒表达载体的CMV的酶切鉴定结果第32-33 页
    · 切除巨细胞启动子的PcDNA3.1(-)Grp78p.VP_3的构建第33-35 页
    · 切除巨细胞启动子的PCDNA3.1(-)Hre_2.Grp78p.VP_3质粒的测序结果第35-37 页
    · PCDNA3.1(-)VP_3-CMV质粒的测序结果第37-39 页
    · PCDNA3.1(-)CMV.VP_3-Myc质粒的测序结果第39-40 页
  · 讨论第40-42 页
  · 结论第42-43 页
第二章:VP_3基因对鼻咽癌细胞CNE-2的杀伤作用第43-53 页
  · 材料第43-44 页
    · 质粒和细胞株第43 页
    · 引物第43 页
    · 试剂第43-44 页
    · 主要仪器和设备第44 页
  · 方法第44-48 页
    · 细胞培养及处理第44 页
    · 质粒PGV,PHGV和PVP3的大抽提及纯化第44-45 页
    · 将纯化质粒PGV,PHGV和PVP3转染CNE-2细胞株第45 页
    · RT-PCR鉴定目的基因的表达第45-46 页
    · 免疫印迹分析检测转染后VP3-Myc的蛋白表达水平第46-47 页
    · 细胞存活率测定第47 页
    · 统计学处理第47-48 页
  · 结果第48-50 页
    · 瞬时转染后CNE-2细胞VP_3基因的RT-PCR的表达结果第48 页
    · 瞬时转梁后CNE-2细胞VP_3-myc基因的蛋白表达结果第48-49 页
    · 瞬时转染后不同时间CNE-2细胞的存活率第49-50 页
  · 讨论第50-52 页
  · 结论第52-53 页
第三章:5-氨基酮戊酸介导的光动力对人鼻咽癌CNE-2细胞株的杀伤作用第53-61 页
  · 材料第53-54 页
    · 细胞株及培养条件第53 页
    · 试剂第53 页
    · 仪器第53-54 页
  · 方法第54-55 页
    · 细胞培养第54 页
    · 光敏剂的准备第54 页
    · 细胞处理第54-55 页
    · 细胞存活率测定第55 页
    · 统计学分析第55 页
  · 结果第55-59 页
    · 5-ALA在CNE-2细胞中的定位第55-56 页
    · 各组细胞在不同处理条件下的存活率比较第56-59 页
  · 讨论第59-60 页
  · 结论第60-61 页
第四章:HRE_2.Grp_(78p)嵌合启动子调控VP_3表达结合鼻咽癌5-ALA-PDT/基因治疗的研究第61-79 页
  · 材料第61-62 页
    · 质粒和细胞株第61 页
    · 主要试剂第61-62 页
    · 主要仪器设备第62 页
  · 方法第62-65 页
    · 细胞培养第62 页
    · 细胞处理第62 页
    · 实验分组第62-63 页
    · 质粒瞬时转染CNE-2细胞第63 页
    · 转染后的光动力治疗第63 页
    · CCK-8比色法测定基因治疗,光动力治疗以及基因联合光动力治疗的存活率第63-64 页
    · Western-blotting检测转染后和转染联合光动力治疗后靶向基因的蛋白表达水平第64 页
    · 流式细胞术(FCM)观察基因治疗,光动力治疗以及基因联合光动力治疗的细胞凋亡第64-65 页
    · 电镜观察基因治疗,光动力治疗以及基因联合光动力治疗的超微结构第65 页
    · 统计学处理第65 页
  · 结果第65-76 页
    · 基因治疗,光动力治疗以及基因联合光动力治疗的鼻咽癌细胞CNE-2存活率的比较第65-66 页
    · 基因治疗和基因联合光动力治疗后靶向基因的蛋白表达水平情况第66-71 页
    · 流式细胞术(FCM)观察基因治疗,光动力治疗以及基因联合光动力治疗的细胞凋亡的结果第71-74 页
    · 观察基因治疗,光动力治疗以及基因联合光动力治疗后CNE-2形态学变化第74-76 页
  · 讨论第76-78 页
  · 结论第78-79 页
总结论第79-80 页
参考文献第80-89 页
综述第89-102 页
致谢第102-104 页
攻读学位期间主要研究成果第104 页

本篇论文共104页,点击这进入下载页面
 
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