论文目录 | |
| 摘要 | 第1-4页 |
| abstract | 第4-9页 |
| 主要英文缩略词对照表 | 第9-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-37页 |
| 1.1 肥胖 | 第10-14页 |
| 1.1.1 肥胖的发生与发展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 肥胖相关疾病 | 第11-14页 |
| 1.2 脂肪组织与脂肪细胞 | 第14-19页 |
| 1.2.1 白色脂肪组织(Whiteadiposetissue,WAT) | 第15-18页 |
| 1.2.2 褐色脂肪组织(Brownadiposetissue,BAT) | 第18-19页 |
| 1.3 脂滴及脂滴表面蛋白 | 第19-26页 |
| 1.3.1 脂滴的生成、生长与融合 | 第20-22页 |
| 1.3.2 脂滴表面蛋白 | 第22-24页 |
| 1.3.3 CIDE家族蛋白及功能 | 第24-26页 |
| 1.4 乙酰化修饰与代谢过程 | 第26-35页 |
| 1.4.1 乙酰化修饰 | 第27-29页 |
| 1.4.2 乙酰化修饰与代谢 | 第29-32页 |
| 1.4.3 去乙酰化酶家族蛋白及功能 | 第32-35页 |
| 1.5 研究的意义及目的 | 第35-37页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第37-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.1.1 组织样品 | 第37页 |
| 2.1.2 试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 缓冲液 | 第37页 |
| 2.1.4 抗体 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-47页 |
| 2.2.1 动物饲养 | 第38页 |
| 2.2.2 质粒构建 | 第38页 |
| 2.2.3 免疫共沉淀 | 第38-39页 |
| 2.2.4 siRNA转染 | 第39页 |
| 2.2.5 RNA提取与反转 | 第39-40页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第40-42页 |
| 2.2.7 免疫印迹Westernblot | 第42-43页 |
| 2.2.8 免疫荧光染色 | 第43页 |
| 2.2.9 基于FRAP的脂质交换及脂滴融合实验 | 第43页 |
| 2.2.10 内质网的分离 | 第43-44页 |
| 2.2.11 脂滴的分离 | 第44页 |
| 2.2.12 HE染色 | 第44页 |
| 2.2.13 甘油三酯(TAG)抽提及薄层层析 | 第44页 |
| 2.2.14 血液生化指标检测 | 第44-45页 |
| 2.2.15 脂水解实验 | 第45页 |
| 2.2.16 原代脂肪细胞分离 | 第45页 |
| 2.2.17 游离脂肪酸摄取实验 | 第45页 |
| 2.2.18 葡萄糖耐受实验(GTT,Glucosetolerancetest) | 第45-46页 |
| 2.2.19 胰岛素敏感性实验(ITT,Insulintolerancetest) | 第46页 |
| 2.2.20 数据分析 | 第46-47页 |
| 第3章 ClassIIb去乙酰化酶在肥胖动物的脂肪组织中表达显著降低 | 第47-56页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验结果 | 第47-54页 |
| 3.2.1 HDAC6、HDAC10在肥胖小鼠白色脂肪组织中表达显著降低 | 第47-51页 |
| 3.2.2 肥胖的猕猴腹腔脂肪组织中ClassIIbHDAC蛋白表达显著降低 | 第51-52页 |
| 3.2.3 肥胖人腹腔脂肪组织中ClassIIbHDAC蛋白表达显著降低 | 第52-54页 |
| 3.3 讨论 | 第54-55页 |
| 3.4 小结 | 第55-56页 |
| 第4章 脂肪组织特异性敲除Hdac6小鼠脂类积累增加 | 第56-74页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 实验结果 | 第56-72页 |
| 4.2.1 脂肪组织特异性敲除Hdac6小鼠体重和脂肪积累增加 | 第56-63页 |
| 4.2.2 脂肪组织特异性敲除Hdac6小鼠胰岛素敏感性降低 | 第63-67页 |
| 4.2.3 脂肪组织特异性敲除Hdac6小鼠脂水解降低 | 第67-70页 |
| 4.2.4 脂肪组织特异性敲除Hdac6小鼠代谢率降低 | 第70-72页 |
| 4.3 讨论 | 第72-73页 |
| 4.4 小结 | 第73-74页 |
| 第5章 脂肪组织过表达Hdac6小鼠脂类积累降低 | 第74-85页 |
| 5.1 引言 | 第74页 |
| 5.2 实验结果 | 第74-84页 |
| 5.2.1 脂肪组织过表达Hdac6小鼠的建立 | 第74-77页 |
| 5.2.2 脂肪组织过表达Hdac6小鼠缓解饮食诱导的肥胖 | 第77-81页 |
| 5.2.3 脂肪组织过表达Hdac6小鼠缓解敲除Leptin产生的肥胖 | 第81-84页 |
| 5.3 讨论 | 第84页 |
| 5.4 小结 | 第84-85页 |
| 第6章 CIDEC是HDAC6下游的去乙酰化底物 | 第85-96页 |
| 6.1 引言 | 第85页 |
| 6.2 实验结果 | 第85-94页 |
| 6.2.1 CIDEC是HDAC6下游的去乙酰化底物 | 第85-88页 |
| 6.2.2 HDAC6能抑制CIDEC导致的脂滴变大 | 第88-92页 |
| 6.2.3 CIDEC乙酰化水平在肥胖动物中显著上调 | 第92-94页 |
| 6.3 讨论 | 第94-95页 |
| 6.4 小结 | 第95-96页 |
| 第7章 HDAC6在内质网上调控CIDEC的乙酰化 | 第96-105页 |
| 7.1 引言 | 第96页 |
| 7.2 实验结果 | 第96-104页 |
| 7.2.1 CIDEC在内质网上泛素化水平显著高于脂滴 | 第96-99页 |
| 7.2.2 HDAC6受CIDEC调控定位在内质网上 | 第99-102页 |
| 7.2.3 HDAC6、PCAF与CIDEC相互作用发生在内质网并受脂肪酸调控 | 第102-104页 |
| 7.3 讨论 | 第104页 |
| 7.4 小结 | 第104-105页 |
| 第8章 讨论和展望 | 第105-112页 |
| 8.1 讨论 | 第105-106页 |
| 8.2 展望 | 第106-112页 |
| 8.2.1 PLIN1乙酰化修饰的研究 | 第106-107页 |
| 8.2.2 PCAF在脂代谢过程中的作用 | 第107-108页 |
| 8.2.3 脂肪酸信号及甘油三酯合成通路对CIDEC乙酰化的影响 | 第108-112页 |
| 参考文献 | 第112-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第122页 |
