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DHFR与BRD4抑制剂对胰腺癌的协同致死效应及机制研究

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DHFR与BRD4抑制剂对胰腺癌的协同致死效应及机制研究
论文目录
 
中文摘要第1-7页
abstract第7-14页
前言第14-24页
参考文献第20-24页
第一部分 抑制DHFR和BRD4引起的协同致死效应对胰腺癌细胞的影响第24-56页
一、材料第24-29页
1、细胞系第24-25页
2、试剂第25-28页
3.仪器第28-29页
二、方法第29-39页
1、细胞培养第29-30页
2、MTX和JQ-1储存液、PBS配制与胎牛血清的灭活处理第30页
3、Trizol法提取细胞总RNA第30页
4、cDNA的制备第30-31页
5.荧光实时定量 PCR 检测目的基因的表达第31-32页
6、细胞存活检测第32页
7、免疫印迹(Western Blot)第32-33页
8、免疫组化第33-35页
9、克隆形成实验第35页
10、细胞凋亡检测第35-36页
11、LDH细胞毒性实验第36页
12、JC-1线粒体膜电位染色实验第36-39页
13、统计学分析第39页
三、结果第39-52页
1、TCGA数据库分析BRD4和DHFR在胰腺癌和正常组织中中表达的差异及对生存期的影响第39-42页
2、胰腺癌和癌旁组织中DHFR蛋白表达的差异第42-44页
3、细胞水平探索抑制DHFR和BRD4的协同致死效应对胰腺癌生长和死亡的影响第44-52页
四、讨论第52-54页
参考文献第54-56页
第二部分 协同致死效应在胰腺癌放射治疗中的应用第56-73页
一、材料第56-57页
二、方法第57-60页
1、细胞存活检测第57页
2、细胞计数实验第57页
3、免疫印迹(Western Blot)第57-58页
4、克隆形成检测细胞的放射敏感性第58-59页
5、细胞周期检测(PI法)第59-60页
6、统计学分析第60页
三、结果第60-69页
1、筛选MTX和JQ-1作为放射增敏剂的合适浓度第60-61页
2、MTX和JQ-1对电离辐射后胰腺癌细胞克隆形成能力的影响第61-63页
3、MTX和JQ-1对电离辐射引起的DNA双链断裂(DSB)损伤修复的影响第63-69页
四、讨论第69-71页
参考文献第71-73页
第三部分 胰腺癌协同致死效应机制的初步探索第73-101页
一、材料第73页
二、方法第73-78页
1、芯片数据第73-74页
2、数据处理及差异基因分析第74-75页
3、差异基因的GO本体分析和通路分析第75-76页
4、TRIzol法提取细胞总RNA第76-77页
5、cDNA的制备第77页
6、荧光实时定量 PCR 检测目的基因的表达第77-78页
三、结果第78-95页
1、表达谱芯片筛选BRD4抑制剂JQ-1影响的生物学过程第78-83页
2、TCGA数据库分析叶酸、嘌呤和嘧啶代谢通路中的关键基因在胰腺癌和正常组织中中表达的差异及对胰腺癌生存期的影响第83-86页
3、生物信息学预测BRD4和MYC对叶酸、嘌呤和嘧啶合成通路的调控作用第86-89页
4、JQ-1和MTX对嘌呤、嘧啶和叶酸代谢途径中基因的影响第89-95页
四、讨论第95-98页
参考文献第98-101页
研究结论第101-102页
研究结论第101-102页
综述:肿瘤的协同致死效应第102-116页
简介第102-104页
一、协同致死效应的遗传学基础第104-105页
二、协同致死相互作用的基因筛选方法第105-108页
1、人类肿瘤细胞中协同致死效应的基因筛查第106-107页
2、RNA干扰筛选第107页
3、化学筛选第107-108页
三、临床转化及展望第108页
参考文献第108-116页
缩略词表第116-117页
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著和论文第117-119页
致谢第119-121页

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