论文目录 | |
中文摘要 | 第1-7页 |
abstract | 第7-14页 |
前言 | 第14-24页 |
参考文献 | 第20-24页 |
第一部分 抑制DHFR和BRD4引起的协同致死效应对胰腺癌细胞的影响 | 第24-56页 |
一、材料 | 第24-29页 |
1、细胞系 | 第24-25页 |
2、试剂 | 第25-28页 |
3.仪器 | 第28-29页 |
二、方法 | 第29-39页 |
1、细胞培养 | 第29-30页 |
2、MTX和JQ-1储存液、PBS配制与胎牛血清的灭活处理 | 第30页 |
3、Trizol法提取细胞总RNA | 第30页 |
4、cDNA的制备 | 第30-31页 |
5.荧光实时定量 PCR 检测目的基因的表达 | 第31-32页 |
6、细胞存活检测 | 第32页 |
7、免疫印迹(Western Blot) | 第32-33页 |
8、免疫组化 | 第33-35页 |
9、克隆形成实验 | 第35页 |
10、细胞凋亡检测 | 第35-36页 |
11、LDH细胞毒性实验 | 第36页 |
12、JC-1线粒体膜电位染色实验 | 第36-39页 |
13、统计学分析 | 第39页 |
三、结果 | 第39-52页 |
1、TCGA数据库分析BRD4和DHFR在胰腺癌和正常组织中中表达的差异及对生存期的影响 | 第39-42页 |
2、胰腺癌和癌旁组织中DHFR蛋白表达的差异 | 第42-44页 |
3、细胞水平探索抑制DHFR和BRD4的协同致死效应对胰腺癌生长和死亡的影响 | 第44-52页 |
四、讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
第二部分 协同致死效应在胰腺癌放射治疗中的应用 | 第56-73页 |
一、材料 | 第56-57页 |
二、方法 | 第57-60页 |
1、细胞存活检测 | 第57页 |
2、细胞计数实验 | 第57页 |
3、免疫印迹(Western Blot) | 第57-58页 |
4、克隆形成检测细胞的放射敏感性 | 第58-59页 |
5、细胞周期检测(PI法) | 第59-60页 |
6、统计学分析 | 第60页 |
三、结果 | 第60-69页 |
1、筛选MTX和JQ-1作为放射增敏剂的合适浓度 | 第60-61页 |
2、MTX和JQ-1对电离辐射后胰腺癌细胞克隆形成能力的影响 | 第61-63页 |
3、MTX和JQ-1对电离辐射引起的DNA双链断裂(DSB)损伤修复的影响 | 第63-69页 |
四、讨论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-73页 |
第三部分 胰腺癌协同致死效应机制的初步探索 | 第73-101页 |
一、材料 | 第73页 |
二、方法 | 第73-78页 |
1、芯片数据 | 第73-74页 |
2、数据处理及差异基因分析 | 第74-75页 |
3、差异基因的GO本体分析和通路分析 | 第75-76页 |
4、TRIzol法提取细胞总RNA | 第76-77页 |
5、cDNA的制备 | 第77页 |
6、荧光实时定量 PCR 检测目的基因的表达 | 第77-78页 |
三、结果 | 第78-95页 |
1、表达谱芯片筛选BRD4抑制剂JQ-1影响的生物学过程 | 第78-83页 |
2、TCGA数据库分析叶酸、嘌呤和嘧啶代谢通路中的关键基因在胰腺癌和正常组织中中表达的差异及对胰腺癌生存期的影响 | 第83-86页 |
3、生物信息学预测BRD4和MYC对叶酸、嘌呤和嘧啶合成通路的调控作用 | 第86-89页 |
4、JQ-1和MTX对嘌呤、嘧啶和叶酸代谢途径中基因的影响 | 第89-95页 |
四、讨论 | 第95-98页 |
参考文献 | 第98-101页 |
研究结论 | 第101-102页 |
研究结论 | 第101-102页 |
综述:肿瘤的协同致死效应 | 第102-116页 |
简介 | 第102-104页 |
一、协同致死效应的遗传学基础 | 第104-105页 |
二、协同致死相互作用的基因筛选方法 | 第105-108页 |
1、人类肿瘤细胞中协同致死效应的基因筛查 | 第106-107页 |
2、RNA干扰筛选 | 第107页 |
3、化学筛选 | 第107-108页 |
三、临床转化及展望 | 第108页 |
参考文献 | 第108-116页 |
缩略词表 | 第116-117页 |
攻读学位期间本人出版或公开发表的论著和论文 | 第117-119页 |
致谢 | 第119-121页 |