论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 结直肠癌及其免疫治疗 | 第11-13页 |
| 1.1.1 结直肠癌 | 第11-12页 |
| 1.1.2 结直肠癌的免疫治疗 | 第12-13页 |
| 1.2 NK细胞及其在肿瘤发生发展中的作用 | 第13-19页 |
| 1.2.1 NK细胞 | 第13-15页 |
| 1.2.2 NK细胞生物学特性 | 第15-16页 |
| 1.2.3 NKG2D在NK细胞对肿瘤识别中的作用 | 第16-19页 |
| 第二章 ICAM-1在CRC细胞中的表达状况及NKG2D稳转株的构建 | 第19-44页 |
| 2.1 引言 | 第19-21页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第21-25页 |
| 2.2.1 仪器材料 | 第21-22页 |
| 2.2.2 试剂材料 | 第22-24页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-35页 |
| 2.3.1 结直肠癌细胞复苏与培养 | 第25-26页 |
| 2.3.2 NK92细胞培养 | 第26页 |
| 2.3.3 RNA提取 | 第26页 |
| 2.3.4 RNA反转为cDNA | 第26-27页 |
| 2.3.5 SYBRGreen荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.3.6 Westernblotting | 第28-30页 |
| 2.3.7 免疫荧光 | 第30-31页 |
| 2.3.8 MTT检测 | 第31页 |
| 2.3.9 流式凋亡检测 | 第31页 |
| 2.3.10 计算转化率 | 第31-32页 |
| 2.3.11 连接反应 | 第32页 |
| 2.3.12 重组质粒的筛选 | 第32-34页 |
| 2.3.13 慢病毒包装 | 第34页 |
| 2.3.14 病毒转染 | 第34-35页 |
| 2.3.15 数据统计方法 | 第35页 |
| 2.4 实验结果 | 第35-41页 |
| 2.4.1 ICAM-1高表达与低表达细胞系的筛选 | 第35-36页 |
| 2.4.2 ICAM-1对NKG2D配体表达的影响 | 第36-39页 |
| 2.4.3 NKG2D高表达细胞株的构建 | 第39-40页 |
| 2.4.4 ICAM-1增强NK细胞对CRC细胞的杀伤能力 | 第40-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-43页 |
| 2.6 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 ICAM-1增强NKG2D介导NK细胞对CRC细胞的杀伤作用 | 第44-61页 |
| 3.1 引言 | 第44-46页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第46-48页 |
| 3.2.1 仪器材料 | 第46-47页 |
| 3.2.2 试剂材料 | 第47-48页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-53页 |
| 3.3.1 .细胞处理 | 第48页 |
| 3.3.2 .流式凋亡检测 | 第48-49页 |
| 3.3.3 .流式表型检测 | 第49页 |
| 3.3.4 .WB检测 | 第49-52页 |
| 3.3.5 .免疫荧光检测 | 第52页 |
| 3.3.6 .数据统计方法 | 第52-53页 |
| 3.4 实验结果 | 第53-58页 |
| 3.4.1 NKG2D与ICAM-1表达关系的探究 | 第53-54页 |
| 3.4.2 诱导ICAM-1高表达促进NKG2D表达 | 第54-56页 |
| 3.4.3 药物诱导的ICAM-1促进NK92杀伤CRC细胞 | 第56-57页 |
| 3.4.4 ICAM-1稳转株的构建 | 第57-58页 |
| 3.5 讨论 | 第58-59页 |
| 3.6 本章小结 | 第59-61页 |
| 第四章 过表达ICAM-1在体内外对NK细胞杀伤作用的影响 | 第61-75页 |
| 4.1 引言 | 第61-62页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第62-64页 |
| 4.2.1 仪器材料 | 第62-63页 |
| 4.2.2 试剂材料 | 第63-64页 |
| 4.2.3 溶液配制 | 第64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-68页 |
| 4.3.1 .石蜡切片制备及脱蜡 | 第64页 |
| 4.3.2 .免疫荧光 | 第64-65页 |
| 4.3.3 .ELISA检测 | 第65页 |
| 4.3.4 .HE染色 | 第65-66页 |
| 4.3.5 .裸鼠成瘤 | 第66页 |
| 4.3.6 .流式凋亡检测 | 第66-67页 |
| 4.3.7 .流式表型检测 | 第67页 |
| 4.3.8 .数据统计方法 | 第67-68页 |
| 4.4 实验结果 | 第68-73页 |
| 4.4.1 ICAM-1过表达促进NKG2D的表达 | 第68-70页 |
| 4.4.2 过表达ICAM-1增强NK细胞对CRC细胞的杀伤作用 | 第70-71页 |
| 4.4.3 ICAM-1高表达可以通过NK细胞抑制肿瘤进展 | 第71-73页 |
| 4.5 讨论 | 第73页 |
| 4.6 本章小结 | 第73-75页 |
| 全文总结 | 第75-76页 |
| REFERENCES | 第76-84页 |
| 中英文缩写字母表 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及会议摘要 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
