论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-15页 |
第一章 绪论 | 第15-28页 |
1.1 引言 | 第15页 |
1.2 硒的主要生物活性功能 | 第15-17页 |
1.2.1 抗氧化活性 | 第15-16页 |
1.2.2 免疫调节功能 | 第16页 |
1.2.3 抗肿瘤活性 | 第16-17页 |
1.3 有机硒开发与利用 | 第17-18页 |
1.3.1 自然界硒的主要形式及功能 | 第17页 |
1.3.2 生物富硒载体 | 第17-18页 |
1.4 花生与富硒 | 第18-19页 |
1.4.1 花生的营养物质 | 第18页 |
1.4.2 花生发芽与营养物质的变化 | 第18-19页 |
1.4.3 富硒花生研究现状 | 第19页 |
1.5 硒在植物中的生物合成代谢 | 第19-21页 |
1.5.1 植物对硒的吸收与转化 | 第19-21页 |
1.5.2 植物富硒可能涉及的抗逆性代谢 | 第21页 |
1.6 本研究选题依据与研究内容 | 第21-25页 |
1.6.1 选题依据及意义 | 第21-23页 |
1.6.2 主要研究内容 | 第23-24页 |
1.6.3 研究技术路线 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-28页 |
第二章 花生芽富硒过程中对亚硒酸钠诱导过氧化逆境的响应机理 | 第28-49页 |
2.1 前言 | 第28-29页 |
2.2 材料与试剂 | 第29-30页 |
2.3 主要仪器与设备 | 第30页 |
2.4 样品预处理 | 第30页 |
2.5 实验方法 | 第30-36页 |
2.5.1 丙二醛(MDA)含量测定 | 第30-31页 |
2.5.2 过氧化氢(H_2O_2)含量测定 | 第31页 |
2.5.3 抗坏血酸(AsA)、脱氢抗坏血酸(DHA)和谷胱甘肽(GSH)含量测定 | 第31-32页 |
2.5.4 酶的提取及活性测定 | 第32-34页 |
2.5.5 qPCR检测基因表达情况 | 第34-36页 |
2.5.6 数据分析 | 第36页 |
2.6 结果与讨论 | 第36-44页 |
2.6.0 亚硒酸钠处理浓度筛选 | 第36-37页 |
2.6.1 花生芽富硒过程中亚硒酸钠诱导的过氧化毒性 | 第37-39页 |
2.6.2 亚硒酸钠对抗氧化物酶相关基因表达的影响 | 第39-40页 |
2.6.3 亚硒酸钠对花生幼苗抗氧化物酶活性的影响 | 第40-41页 |
2.6.4 亚硒酸钠调节抗坏血酸-谷胱甘肽循环(AsA-GSH循环) | 第41-44页 |
2.7 本章小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
第三章 花生芽富硒过程中亚硒酸钠诱导的次生代谢 | 第49-73页 |
3.1 前言 | 第49-51页 |
3.2 材料与试剂 | 第51页 |
3.3 主要仪器与设备 | 第51-52页 |
3.4 实验方法 | 第52-57页 |
3.4.1 花生芽富硒及样品预处理 | 第52页 |
3.4.2 过氧化氢(H_2O_2)和一氧化氮(NO)含量测定 | 第52页 |
3.4.3 苯丙氨酸解氨酶 (PAL, EC 4.3.1.5) 的提取及活性测定 | 第52-53页 |
3.4.4 肉桂酸 4-羟基化酶 (C4H, EC 1.14.13.11) 的提取及活性测定 | 第53页 |
3.4.5 4-香豆酸-辅酶A连接酶 (4CL, EC 6.2.1.12)的提取及活性测定 | 第53-54页 |
3.4.6 游离型总黄酮的提取及含量测定 | 第54页 |
3.4.7 束缚型酚酸的提取及含量的测定 | 第54-55页 |
3.4.8 木质素含量的测定 | 第55页 |
3.4.9 花生幼苗根部结构的电子显微镜观察 | 第55页 |
3.4.10 qPCR检测基因表达情况 | 第55-57页 |
3.4.11 数据分析 | 第57页 |
3.5 结果与讨论 | 第57-67页 |
3.5.1 亚硒酸钠上调PAL和C4H基因表达水平及其酶的活性 | 第57-59页 |
3.5.2 亚硒酸钠处理提高花生幼苗束缚型酚酸的含量 | 第59-61页 |
3.5.3 亚硒酸钠处理提高花生幼苗 4CL酶活性 | 第61页 |
3.5.4 亚硒酸钠上调CAD基因表达并提高木质素的含量 | 第61页 |
3.5.5 亚硒酸钠处理对过氧化氢(H_2O_2)和一氧化氮(NO)含量的影响 | 第61-63页 |
3.5.6 亚硒酸钠对花生根部结构的影响 | 第63-65页 |
3.5.7 亚硒酸钠上调了CHS和CHI基因的表达并增加了总黄酮的含量 | 第65-67页 |
3.6 本章小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
第四章 富硒花生芽的有机硒含量及营养物质变化 | 第73-86页 |
4.1 前言 | 第73页 |
4.2 材料与试剂 | 第73-74页 |
4.3 主要仪器与设备 | 第74页 |
4.4 实验方法 | 第74-77页 |
4.4.1 富硒花生芽培育方法 | 第74-75页 |
4.4.2 水分含量测定 | 第75页 |
4.4.3 可溶性总糖含量的测定 | 第75页 |
4.4.4 有机硒与无机硒含量测定 | 第75-76页 |
4.4.5 可溶性总蛋白含量测定 | 第76页 |
4.4.6 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第76页 |
4.4.7 可溶性总氨基酸含量测定 | 第76页 |
4.4.8 总抗氧化力的测定 | 第76-77页 |
4.4.9 数据分析 | 第77页 |
4.5 结果与讨论 | 第77-83页 |
4.5.1 花生芽富硒过程中水分含量的变化 | 第77-78页 |
4.5.2 花生芽富硒对可溶性总糖代谢的影响 | 第78-79页 |
4.5.3 花生芽富硒过程对硒的吸收与转化 | 第79-80页 |
4.5.4 花生芽富硒过程中可溶性蛋白质的变化 | 第80-81页 |
4.5.5 花生芽富硒过程中游离氨基酸的代谢情况 | 第81-82页 |
4.5.6 富硒花生芽的抗氧化能力变化 | 第82-83页 |
4.6 本章小结 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-86页 |
第五章 有机硒与无机硒抗氧化活性对比研究 | 第86-111页 |
5.1 前言 | 第86-88页 |
5.2 材料与试剂 | 第88页 |
5.3 主要仪器与设备 | 第88-89页 |
5.4 实验方法 | 第89-93页 |
5.4.1 Fenton分光光度计法测定不同氨基酸抗氧化力 | 第89页 |
5.4.2 ORAC法测定不同氨基酸抗氧化力 | 第89-90页 |
5.4.3 人红细胞预处理 | 第90页 |
5.4.4 有机硒与无机硒对红细胞氧化性溶血的保护作用 | 第90-91页 |
5.4.5 人红细胞溶血率的测定 | 第91页 |
5.4.6 红细胞丙二醛(MDA)含量测定 | 第91页 |
5.4.7 红细胞SOD酶活性测定 | 第91-92页 |
5.4.8 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性测定 | 第92页 |
5.4.9 谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量测定 | 第92-93页 |
5.4.10 扫描电镜(SEM)观察细胞形态 | 第93页 |
5.4.11 数据分析 | 第93页 |
5.5 结果与讨论 | 第93-105页 |
5.5.1 含硒氨基酸与非含硒氨基酸对羟基自由基的清除能力的比较 | 第93-94页 |
5.5.2 不同氨基酸抗氧化能力指数(ORAC)的差异 | 第94-95页 |
5.5.3 有机硒和无机硒处理对人红细胞氧化溶血的保护作用 | 第95-97页 |
5.5.4 有机硒对脂质过氧化反应的抑制及对红细胞完整性的保护作用 | 第97-99页 |
5.5.5 有机硒对人红细胞谷胱甘肽(GSH)含量的影响 | 第99-100页 |
5.5.6 有机硒处理对人红细胞SOD酶活力的影响 | 第100-102页 |
5.5.7 有机硒对人红细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响 | 第102-104页 |
5.5.8 有机硒对氧化逆境下红细胞结构的保护作用 | 第104-105页 |
5.6 本章小结 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-111页 |
第六章 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对小鼠巨噬细胞的免疫调节活性研究 | 第111-134页 |
6.1 前言 | 第111-112页 |
6.2 材料与试剂 | 第112-113页 |
6.3 主要仪器与设备 | 第113页 |
6.4 实验方法 | 第113-118页 |
6.4.1 细胞培养 | 第113页 |
6.4.2 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对RAW264.7 细胞毒性检测 | 第113-114页 |
6.4.3 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对小鼠巨噬细胞的免疫应答活性 | 第114页 |
6.4.4 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对RAW264.7 细胞的抗炎活性检测 | 第114-115页 |
6.4.5 ELISA法检测PGE2含量 | 第115页 |
6.4.6 qPCR检测相关基因表达水平 | 第115-117页 |
6.4.7 RT-PCR凝胶电泳和定量分析 | 第117-118页 |
6.4.8 RAW 264.7 细胞形态的观察 | 第118页 |
6.4.9 数据分析 | 第118页 |
6.5 结果与分析 | 第118-128页 |
6.5.1 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对RAW 264.7 细胞毒性的影响 | 第118-119页 |
6.5.2 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对小鼠巨噬细胞免疫应答的调节作用 | 第119-121页 |
6.5.3 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对一氧化氮合成代谢的影响 | 第121-122页 |
6.5.4 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对小鼠巨噬细胞炎症因子分泌的抑制作用 | 第122-124页 |
6.5.5 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对RAW264.7 细胞MMP-9 代谢的影响 | 第124页 |
6.5.6 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对环氧化酶-2 与前列腺素E2的影响 | 第124-126页 |
6.5.7 L-硒-甲基硒代半胱氨酸对炎症小鼠巨噬细胞RAW264.7 形态的影响 | 第126-128页 |
6.6 本章小结 | 第128-129页 |
参考文献 | 第129-134页 |
结论与展望 | 第134-138页 |
1.结论 | 第134-135页 |
2.创新点 | 第135-136页 |
3.展望 | 第136-138页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第138-140页 |
致谢 | 第140-141页 |
附件 | 第141页 |