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PRRSV调控NF-κB信号通路的机制研究

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PRRSV调控NF-κB信号通路的机制研究
论文目录
 
摘要第1-9页
Abstract第9-12页
缩略语表(Abbreviation)第12-16页
第1章 文献综述第16-38页
  1.1 模式识别受体及接头蛋白第16-29页
    1.1.1 NLRs在IRF3和NF-κB信号通路中的功能第17-21页
    1.1.2 LUBAC在IRF3和NF-κB信号通路中的功能第21-26页
    1.1.3 DExD/H helicases在IRF3和NF-κB信号通路中的功能第26-29页
  1.2 PRRSV调控IRF3和NF-κB信号通路的机制第29-34页
    1.2.1 PRRSV的病原特征第29-31页
    1.2.2 PRRSV调控IRF3和NF-κB信号通路的机制第31-34页
  1.3 其他病毒调控IRF3和NF-κB信号通路的机制第34-38页
第2章 研究目的与意义第38-39页
第3章 材料与方法第39-55页
  3.1 试验材料第39-45页
    3.1.1 细胞、毒株与菌株第39页
    3.1.2 载体与质粒第39-41页
    3.1.3 工具酶及主要试剂第41页
    3.1.4 Western Blot所需材料第41-42页
    3.1.5 培养基与抗生素及其配制第42页
    3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制第42-44页
    3.1.7 主要实验仪器及设备第44页
    3.1.8 分子生物学分析软件第44-45页
  3.2 试验方法第45-55页
    3.2.1 PRRSV的增殖第45页
    3.2.2 病毒滴度的测定第45页
    3.2.3 真核表达质粒的构建第45-49页
    3.2.4 脂质体介导的转染第49-50页
    3.2.5 免疫共沉淀及Western Blot第50-52页
    3.2.6 SYBR Green Ⅰ实时定量PCR第52-53页
    3.2.7 相对mRNA表达水平的计算第53-54页
    3.2.8 双荧光素酶检测实验第54页
    3.2.9 荧光共聚焦检测蛋白质的亚细胞定位第54页
    3.2.10 统计学方法第54-55页
第4章 结果与分析第55-78页
  4.1 PRRSV通过NOD2激活NF-κB信号转导的机制第55-62页
    4.1.1 部分NLR家族蛋白在PRRSV感染MARC-145细胞后的表达谱第55-56页
    4.1.2 PRRSV感染在蛋白水平上上调NOD2的表达第56-57页
    4.1.3 PRRSV感染上调RIP2表达并诱导其磷酸化第57-58页
    4.1.4 NOD2-RIP2参与PRRSV诱导NF-κB和MAPK信号通路的激活第58-60页
    4.1.5 干扰NOD2或RIP2抑制PRRSV诱导的炎症因子表达第60页
    4.1.6 PRRSV感染PAM后上调NOD2和RIP2的表达第60-62页
  4.2 PRRSV通过DHX36激活NF-κB信号转导的机制第62-69页
    4.2.1 PRRSV感染上调DHX36表达第62-63页
    4.2.2 PRRSV感染促进DHX36从细胞核向细胞浆转定位第63-64页
    4.2.3 超表达和干扰DHX36不影响PRRSV增殖第64-65页
    4.2.4 DHX36-MyD88参与PRRSV诱导的NF-κB信号通路激活第65-67页
    4.2.5 DHX36参与N蛋白诱导的NF-κB信号通路激活第67-69页
  4.3 nsp1α抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导的机制第69-78页
    4.3.1 PRRSV感染早期抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导第69-71页
    4.3.2 超表达nsp1α抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导第71-72页
    4.3.3 nsp1α抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导依赖CTE结构域第72-73页
    4.3.4 nsp1α抑制NEMO发生Met1-polyUb修饰第73-75页
    4.3.5 nsp1α通过与HOIP和HOIL-1L互作抑制HOIP招募SHARPIN第75-76页
    4.3.6 PRRSV感染抑制HOIP-SHARPIN之间的结合第76-78页
第5章 讨论与结论第78-84页
  5.1 讨论第78-83页
    5.1.1 PRRSV通过NOD2激活NF-κB信号转导第78-80页
    5.1.2 DHX36识别PRRSV N蛋白,激活NF-κB信号转导第80-81页
    5.1.3 nspla蛋白通过靶向LUBAC抑制NF-κB信号转导第81-83页
  5.2 结论第83-84页
参考文献第84-111页
致谢第111-112页
附录第112-113页

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