论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-37页 |
1.1 抗病毒天然免疫概述 | 第16-26页 |
1.1.1 抗病毒天然免疫简介 | 第16页 |
1.1.2 天然免疫的模式识别受体 | 第16-20页 |
1.1.3 RNA病毒诱导I型干扰素产生的信号通路 | 第20-25页 |
1.1.4 I型干扰素诱导的信号转导 | 第25-26页 |
1.2 病毒蛋白拮抗干扰素应答的机制 | 第26-29页 |
1.2.1 病毒蛋白拮抗I型干扰素表达 | 第26-29页 |
1.2.2 病毒蛋白拮抗I型干扰素信号转导 | 第29页 |
1.3 冠状病毒的研究进展 | 第29-37页 |
1.3.1 冠状病毒分类 | 第30-31页 |
1.3.2 冠状病毒基因组结构和复制 | 第31-34页 |
1.3.3 冠状病毒与天然免疫 | 第34-35页 |
1.3.4 猪流行性腹泻病毒的流行特征 | 第35-36页 |
1.3.5 鼠肝炎病毒和呼吸道冠状病毒的流行特征 | 第36页 |
1.3.6 猪δ冠状病毒的流行特征 | 第36-37页 |
第2章 研究目的与意义 | 第37-38页 |
第3章 材料与方法 | 第38-49页 |
3.1 实验材料 | 第38-42页 |
3.1.1 毒株与菌株 | 第38页 |
3.1.2 细胞及转染相关材料 | 第38页 |
3.1.3 载体与质粒 | 第38-39页 |
3.1.4 工具酶、抗体及主要化学试剂 | 第39-40页 |
3.1.5 细胞培养基及其配置 | 第40页 |
3.1.6 主要缓冲液及其配置 | 第40-42页 |
3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第42页 |
3.1.8 分子生物学分析软件 | 第42页 |
3.2 实验方法 | 第42-49页 |
3.2.1 表达质粒构建 | 第42-44页 |
3.2.2 VSV-GFP和仙台病毒的增殖 | 第44页 |
3.2.3 RNA的提取及实时荧光定量RT-PCR | 第44-45页 |
3.2.4 双荧光素酶检测实验 | 第45-46页 |
3.2.5 Western blot及Co-IP实验 | 第46-47页 |
3.2.6 间接免疫荧光实验与激光共聚焦显微镜观察 | 第47-48页 |
3.2.7 RNA结合实验 | 第48页 |
3.2.8 统计学方法 | 第48-49页 |
第4章 结果与分析 | 第49-73页 |
4.1 PEDV N蛋白拮抗IFN-β产生 | 第49-54页 |
4.1.1 PEDV N蛋白抑制SEV诱导的IFN-β表达 | 第49-51页 |
4.1.2 PEDV N蛋白抑制IRF3的活性 | 第51页 |
4.1.3 TBK1可能是PEDV N蛋白潜在的靶标 | 第51-52页 |
4.1.4 PEDV N蛋白能与TBK1发生相互作用 | 第52-53页 |
4.1.5 PEDV N蛋白阻碍了IRF3与TBK1之间的相互作用 | 第53-54页 |
4.2 MHV和SARS-CoV N蛋白拮抗IFN-β产生 | 第54-63页 |
4.2.1 MHV和SARS-CoV N蛋白没有靶向TBK1 | 第54-55页 |
4.2.2 MHV N蛋白抑制SEV诱导的IFN-β表达 | 第55-57页 |
4.2.3 MHV和SARS-CoV N蛋白抑制PACT激活的RIG-I/MDA5诱导IFN-β产生活性 | 第57-58页 |
4.2.4 MHV和SARS-CoV N蛋白能与PACT发生相互作用 | 第58-59页 |
4.2.5 MHV和SARS-CoV N蛋白抑制PACT结合RIG-I/MDA5 | 第59-60页 |
4.2.6 MHV和SARS-CoV N蛋白结合PACT是依赖RNA的 | 第60-61页 |
4.2.7 PEDV和PRRSV N蛋白不能拮抗PACT | 第61-63页 |
4.3 PDCoV N蛋白抑制IFN-β产生的分子机制 | 第63-73页 |
4.3.1 PDCoV N蛋白抑制SEV诱导的IFN-β产生 | 第63-64页 |
4.3.2 PDCoV N蛋白抑制IRF3活性 | 第64-65页 |
4.3.3 PDCoV N蛋白抑制SEV诱导的RIG-I/MDA5活性 | 第65-66页 |
4.3.4 PDCoV N蛋白能够与RIG-I发生相互作用且不依赖RNA | 第66-67页 |
4.3.5 PDCoV N蛋白能与RIG-I的Hel和CTD结构域发生相互作用 | 第67-69页 |
4.3.6 PDCoV N蛋白抑制poly(I:C)和PACT结合RIG-I | 第69-71页 |
4.3.7 PDCoV N蛋白的NTD结构域发挥抑制IFN-β功能 | 第71-73页 |
第5章 讨论与结论 | 第73-81页 |
5.1 讨论 | 第73-79页 |
5.1.1 PEDV N蛋白抑制IFN-β产生产生的分子机制初步研究 | 第73-75页 |
5.1.2 MHV和SARS-CoV N蛋白抑制IFN-β产生的分子机制初步研究 | 第75-76页 |
5.1.3 PDCoV N蛋白抑制IFN-β产生的分子机制研究 | 第76-78页 |
5.1.4 冠状病毒编码的蛋白抑制IFN-β产生的规律 | 第78-79页 |
5.2 结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-101页 |
致谢 | 第101-103页 |
附录 | 第103-105页 |