论文目录 | |
摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
缩略词表Abbreviation | 第13-15页 |
前言 | 第15-31页 |
1 睾酮概述 | 第15-18页 |
1.1 睾酮简介 | 第15-16页 |
1.2 睾酮与肥胖及相关疾病 | 第16-17页 |
1.3 睾酮的细胞内信号转导 | 第17-18页 |
2 巨噬细胞与极化概述 | 第18-30页 |
2.1 巨噬细胞极化简介 | 第18-21页 |
2.2 巨噬细胞极化的细胞内信号通路 | 第21-26页 |
2.2.1 PI3K/Akt信号通路 | 第21-22页 |
2.2.2 C-Jun N-terminal kinase (JNK) 信号通路 | 第22-23页 |
2.2.3 Notch信号通路 | 第23-24页 |
2.2.4 JAK/STAT信号通路 | 第24-25页 |
2.2.5 其他信号通路 | 第25-26页 |
2.3 脂肪组织巨噬细胞(ATMs)与脂肪代谢 | 第26-30页 |
3 本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
材料与方法 | 第31-44页 |
1 试验仪器及材料 | 第31-33页 |
1.1 主要仪器设备 | 第31页 |
1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
1.3 主要溶液配制 | 第32-33页 |
1.4 试验动物 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-43页 |
2.1 RAW264.7 巨噬细胞的培养与处理 | 第33-34页 |
2.2 3T3-L1细胞的培养与诱导分化程序 | 第34页 |
2.3 特异性siRNA抑制Akt1与Akt2 | 第34-35页 |
2.4 3T3-L1细胞油红O染色 | 第35页 |
2.5 细胞总RNA提取 | 第35-36页 |
2.6 总RNA的逆转录 | 第36-37页 |
2.7 RT-qPCR检测细胞因子相对表达水平 | 第37-38页 |
2.8 Western blot | 第38-40页 |
2.8.1 样品的制备 | 第38-39页 |
2.8.2 SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
2.8.3 Western blot检测 | 第39-40页 |
2.9 LHR多肽注射剂的制备与试验动物的饲养与处理 | 第40页 |
2.10 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清LHR多肽抗体水平 | 第40-41页 |
2.11 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清睾酮水平 | 第41页 |
2.12 石蜡切片的制备 | 第41页 |
2.13 组织切片HE染色 | 第41页 |
2.14 组织切片免疫组织化学染色 | 第41-43页 |
3 数据统计与处理 | 第43-44页 |
结果与分析 | 第44-75页 |
1 检测睾酮对 3T3-L1前脂肪细胞分化的影响 | 第44-48页 |
2 检测睾酮能否引起RAW264.7 巨噬细胞极化 | 第48-49页 |
3 检测睾酮对RAW264.7 巨噬细胞M1与M2a型极化的作用 | 第49-53页 |
4 检测雄激素受体在睾酮对RAW264.7 巨噬细胞极化调节中的作用 | 第53-58页 |
5 检测Gai蛋白通路在睾酮对RAW264.7 巨噬细胞极化调节中的作用 | 第58-61页 |
6 检测PTX处理后RAW264.7 巨噬细胞Akt S~(473)位点磷酸化水平 | 第61-62页 |
7 检测特异性抑制Akt1与Akt2对RAW264.7 巨噬细胞极化的影响 | 第62-64页 |
8 检测含有睾酮的RAW264.7 巨噬细胞极化条件培养基对 3T3-L1前脂肪细胞分化的影响 | 第64-68页 |
9 检测注射LHR多肽后,小鼠血清抗体与睾酮水平 | 第68-69页 |
10 小鼠附睾白色脂肪形态学观察与HE染色切片观察 | 第69-72页 |
11 免疫组化染色检测附睾白色脂肪组织中巨噬细胞类型 | 第72-75页 |
讨论 | 第75-83页 |
1 睾酮对巨噬细胞极化的调节作用 | 第75-77页 |
1.1 睾酮对巨噬细胞M1型极化的抑制作用 | 第75-76页 |
1.2 睾酮对巨噬细胞M2a型极化的促进作用 | 第76-77页 |
2 雄激素受体不是睾酮对巨噬细胞调节作用的关键靶点 | 第77-78页 |
3 Gai与Akt蛋白是睾酮对巨噬细胞调节作用中的重要通路 | 第78-80页 |
3.1 Gai蛋白介导睾酮对巨噬细胞极化的调节 | 第78页 |
3.2 Akt S~(473)位点磷酸化水平分析 | 第78-80页 |
4 睾酮对 3T3-L1前脂肪细胞分化的影响 | 第80-81页 |
4.1 睾酮对 3T3-L1细胞分化无显著的直接影响 | 第80页 |
4.2 睾酮通过巨噬细胞极化培养基间接作用于 3T3-L1细胞分化 | 第80-81页 |
5 低血清睾酮对小鼠附睾白色脂肪的影响分析 | 第81-83页 |
5.1 低血清睾酮造成小鼠附睾白色脂肪肥大 | 第81页 |
5.2 脂肪组织中巨噬细胞极化表型分析 | 第81-83页 |
结论 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-105页 |
附录 | 第105-106页 |
致谢 | 第106-107页 |