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高压引发脂肪酶分子构象变化与催化行为关系的研究
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高压引发脂肪酶分子构象变化与催化行为关系的研究
论文目录
 
摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 绪论第11-25页
　　1.1 高压技术与食品加工第11-13页
　　　　1.1.1 高压技术概述第11页
　　　　1.1.2 高压食品加工及应用第11-13页
　　1.2 高压生物科学与高压生物技术第13-17页
　　　　1.2.1 高压生物科学与高压生物技术概述第13页
　　　　1.2.2 高压技术在生物领域中的应用第13-14页
　　　　1.2.3 高压对蛋白质的热稳定性影响第14页
　　　　1.2.4 压力调控酶活力的热力学机制第14-15页
　　　　1.2.5 高压下蛋白质的构象变化第15-17页
　　1.3 食品中的脂肪酶第17-21页
　　　　1.3.1 脂肪酶的来源、功能和应用第17-18页
　　　　1.3.2 脂肪酶的催化机理和调控催化行为的方法第18-21页
　　1.4 分子动力学模拟第21-23页
　　　　1.4.1 分子动力学模拟概述第21-22页
　　　　1.4.2 高压体系下的分子动力学模拟第22-23页
　　1.5 本课题的立题依据、研究意义及主要研究内容第23-25页
　　　　1.5.1 本课题的立题依据和研究意义第23页
　　　　1.5.2 本课题的主要研究内容第23-25页
第二章 高压处理脂肪酶的催化行为第25-37页
　　2.1 前言第25页
　　2.2 材料与方法第25-27页
　　　　2.2.1 主要试剂第25页
　　　　2.2.2 主要仪器第25-26页
　　　　2.2.3 脂肪酶活力的测定第26页
　　　　2.2.4 酶液的高压处理第26页
　　　　2.2.5 高压下RCL、CRL的酯化活力第26页
　　　　2.2.6 底物摩尔比对酯化率的影响第26-27页
　　　　2.2.7 有机溶剂对酯化活力的影响第27页
　　　　2.2.8 高压下CRL催化酯合成的反应机制及动力学第27页
　　2.3 结果与讨论第27-36页
　　　　2.3.1 高压处理对脂肪酶催化能力的影响第27-30页
　　　　2.3.2 反应体系对CRL催化能力的影响第30-33页
　　　　2.3.3 高压下CRL酯化反应进程第33-34页
　　　　2.3.4 高压下CRL酯化反应机制第34-36页
　　2.4 本章小结第36-37页
第三章 高压处理后RCL的构象变化第37-60页
　　3.1 前言第37页
　　3.2 材料与方法第37-41页
　　　　3.2.1 主要试剂第37-38页
　　　　3.2.2 主要仪器第38页
　　　　3.2.3 RCL脂肪酶的纯化和活力测定第38页
　　　　3.2.4 蛋白纯度鉴定第38页
　　　　3.2.5 RCL的高压处理第38页
　　　　3.2.6 圆二色谱（CD）测定第38-39页
　　　　3.2.7 荧光测定第39页
　　　　3.2.8 荧光淬灭第39-40页
　　　　3.2.9 二硫键含量的测定第40页
　　　　3.2.10 粒径分析第40页
　　　　3.2.11 原子力显微镜（AFM）测定第40页
　　　　3.2.12 分子模拟第40-41页
　　　　3.2.13 分子对接第41页
　　3.3 结果与讨论第41-59页
　　　　3.3.1 RCL的分离与纯化第41-42页
　　　　3.3.2 高压处理后RCL二级结构的变化第42-44页
　　　　3.3.3 高压处理后RCL三级结构的变化第44-48页
　　　　3.3.4 高压诱导RCL分子的解折叠过程第48-53页
　　　　3.3.5 分子模拟高压下RCL的构象变化第53-59页
　　3.4 本章小结第59-60页
第四章 高压处理RCL的水解动力学及其与构象变化的联系第60-71页
　　4.1 前言第60页
　　4.2 材料与方法第60-62页
　　　　4.2.1 主要试剂第60页
　　　　4.2.2 主要仪器第60-61页
　　　　4.2.3 酶液的高压处理第61页
　　　　4.2.4 脂肪酶水解反应速率的测定第61页
　　　　4.2.5 高压后RCL水解反应动力学第61-62页
　　　　4.2.6 界面催化行为的测定第62页
　　　　4.2.7 分子动力学模拟第62页
　　4.3 结果与讨论第62-70页
　　　　4.3.1 高压处理后的水解动力学曲线第62-63页
　　　　4.3.2 高压处理后的水解动力学参数第63-64页
　　　　4.3.3 温度对激活体积的影响第64-66页
　　　　4.3.4 压力处理对界面催化行为的影响第66-67页
　　　　4.3.5 脂肪酶中氨基酸残基的运动第67-68页
　　　　4.3.6 盖子的移动第68-70页
　　4.4 本章小结第70-71页
第五章 高压和其它环境因子共同作用下RCL的行为第71-91页
　　5.1 前言第71页
　　5.2 材料与方法第71-74页
　　　　5.2.1 主要试剂第71页
　　　　5.2.2 主要仪器第71-72页
　　　　5.2.3 脂肪酶活力的测定第72页
　　　　5.2.4 RCL的高压处理第72页
　　　　5.2.5 温度对RCL活性的影响第72页
　　　　5.2.6 压力和温度对RCL热稳定性的影响第72页
　　　　5.2.7 温度—压力协同作用下RCL的热失活动力学第72页
　　　　5.2.8 盐离子对RCL酶活的影响第72-73页
　　　　5.2.9 盐离子对RCL热稳定性的影响第73页
　　　　5.2.10 盐离子对RCL折叠展开的影响第73页
　　　　5.2.11 不同缓冲液中多羟基醇对RCL热稳定性的影响第73页
　　　　5.2.12 多羟基醇对RCL的热保护作用第73页
　　　　5.2.13 荧光的测定第73页
　　　　5.2.14 分子模拟第73-74页
　　5.3 结果与讨论第74-90页
　　　　5.3.1 高压与温度共同作用下RCL的催化活性第74-75页
　　　　5.3.2 压力和温度对RCL热稳定性的协同作用第75-77页
　　　　5.3.3 温度-压力二元作用下的热力学分析第77-79页
　　　　5.3.4 盐离子对RCL的影响第79-86页
　　　　5.3.5 多羟基醇对RCL的稳定作用第86-90页
　　5.4 本章小结第90-91页
第六章 原位检测研究高压下RCL构象变化和催化行为第91-104页
　　6.1 前言第91页
　　6.2 材料与方法第91-93页
　　　　6.2.1 主要试剂第91页
　　　　6.2.2 主要仪器第91-92页
　　　　6.2.3 高压下内源荧光的测定第92页
　　　　6.2.4 高压下反应体系的处理第92页
　　　　6.2.5 高压下脂肪酶水解反应速率的测定第92-93页
　　　　6.2.6 分子动力学模拟第93页
　　6.3 结果与讨论第93-103页
　　　　6.3.1 常压下荧光强度与酶活的关系第93-94页
　　　　6.3.2 高压下的水解反应第94-95页
　　　　6.3.3 RCL构象的原位在线检测第95-97页
　　　　6.3.4 分子模拟RCL在高压下的构象状态第97-103页
　　6.4 本章小结第103-104页
主要结论与展望第104-106页
主要结论第104-105页
展望第105-106页
论文创新点第106-107页
致谢第107-108页
参考文献第108-120页
附录Ⅰ第120-125页
附录Ⅱ：作者在攻读博士学位期间发表的论文第125页

本篇论文共125页，点击这进入下载页面。
 
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