论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 第一部分 研究背景 | 第11-37页 |
| 一、肿瘤转移相关机制研究进展 | 第11-18页 |
| （一）肿瘤转移的概念和机制简介 | 第11-16页 |
| （二）乳腺癌转移机制 | 第16-18页 |
| 二、肿瘤微环境与肿瘤转移 | 第18-22页 |
| （一）肿瘤微环境简介 | 第18页 |
| （二）肿瘤微环境在肿瘤转移中的作用 | 第18-22页 |
| 三、上皮-间质转化过程与肿瘤转移 | 第22-33页 |
| （一）EMT的的概念和分类 | 第22-25页 |
| （二）EMT与癌症转移 | 第25页 |
| （三）EMT的激活机制 | 第25-33页 |
| 四、EMT和癌症干细胞 | 第33-34页 |
| 五、SHON简介及其研究进展 | 第34-35页 |
| 六、本论文研究的内容和意义 | 第35-37页 |
| （一）立题依据 | 第35页 |
| （二）本论文的研究内容和意义 | 第35-37页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第37-52页 |
| 一、实验材料 | 第37-38页 |
| （一）实验仪器 | 第37页 |
| （二）质粒 | 第37页 |
| （三）蛋白质和抗体 | 第37页 |
| （四）哺乳动物细胞系 | 第37-38页 |
| （五）试剂 | 第38页 |
| 二、实验方法 | 第38-52页 |
| I. 分子生物学实验方法 | 第38-43页 |
| （一）分子克隆 | 第38页 |
| （二）DNA的琼脂糖电泳 | 第38页 |
| （三）质粒的制备方法 | 第38-41页 |
| （四）哺乳动物细胞总RNA的提取 | 第41页 |
| （五）RT-PCR和qPCR | 第41-43页 |
| II. 细胞生物学实验方法 | 第43-47页 |
| （一）哺乳动物细胞系的培养 | 第43-44页 |
| （二）真核生物细胞的瞬时转染 | 第44页 |
| （三）慢病毒转染技术 | 第44-46页 |
| （四）MTT细胞活性检测实验 | 第46页 |
| （五）细胞共培养实验 | 第46-47页 |
| （六）肿瘤细胞迁移和侵袭实验 | 第47页 |
| （七）流式细胞术检测细胞表面抗原 | 第47页 |
| （八）乳腺球形成检测 | 第47页 |
| III. 蛋白的生物化学实验方法 | 第47-51页 |
| （一）细胞总蛋白的提取 | 第47-48页 |
| （三）SDS-PAGE电泳和Western Blotting | 第48-49页 |
| （四）明胶酶谱实验 | 第49-50页 |
| （五）荧光素酶报告基因检测 | 第50页 |
| （六）免疫荧光实验（IF） | 第50-51页 |
| IV. 统计分析 | 第51-52页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第52-70页 |
| 一、SHON诱导细胞发生上皮间质转化 | 第52-57页 |
| （一）SHON在乳腺癌细胞系中的表达情况 | 第52页 |
| （二）在人乳腺上皮细胞中过表达SHON诱导细胞发生EMT | 第52-57页 |
| 二、SHON能够促进乳腺癌细胞的侵袭和转移 | 第57-60页 |
| （一）过表达SHON提高乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞的能动性 | 第57-60页 |
| （二）SHON的表达影响细胞骨架的重塑 | 第60页 |
| 三、SHON能够诱导乳腺上皮细胞获得干细胞特性 | 第60-61页 |
| 四、TGF-β/Smad信号通路影响SHON诱导的EMT | 第61-63页 |
| （一）SHON诱导的EMT激活经典的TGF-β/Smad通路 | 第61-62页 |
| （二）激活TGF-β/Smad信号通路对于SHON诱导的EMT过程是必需的 | 第62-63页 |
| 五、激活TGF-β/Smad信号通路对于SHON诱导的干细胞特性是必需的 | 第63-65页 |
| 六、SHON与TGF-β 相互调控促进乳腺癌细胞的EMT进程 | 第65-70页 |
| （一）TGF-β 诱导的EMT上调SHON表达 | 第65-66页 |
| （二）SHON以旁分泌的方式调控TGF-β 信号进而影响SHON诱导的EMT进程 | 第66-70页 |
| 第四部分 讨论 | 第70-73页 |
| 一、SHON是一种新的EMT诱导因子 | 第70页 |
| 二、SHON和TGF-β 信号在EMT过程中的作用 | 第70页 |
| 三、SHON间接调控TGF-β 的表达 | 第70-71页 |
| 四、SHON与雌激素受体 | 第71-72页 |
| 五、SHON和干细胞以及肿瘤发生的关系 | 第72-73页 |
| 主要结论和创新点 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-86页 |
| 附录一 | 第86-88页 |
| 附录二 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第91页 |
