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不同种类除草剂的作用方式研究及ACCase CT功能域模型的建立

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不同种类除草剂的作用方式研究及ACCase CT功能域模型的建立
论文目录
 
提要第1-12 页
第一章 绪论第12-42 页
  · 植物脂肪酸第12-13 页
  · 脂肪酸的生物合成第13-18 页
    · 脂肪酸从头合成第14-18 页
      · 脂肪酸生物合成acyl-coA 的来源第14-15 页
      · 脂肪酸合成酶(FAS)第15-18 页
    · 脂肪酸的修饰第18 页
  · 生物素和生物素酶第18-20 页
  · 乙酰辅酶A 羧化酶第20-31 页
    · ACCase 的类型第21-23 页
      · 异质型ACCase第21 页
      · 同质型ACCase第21-23 页
      · 植物中的ACCase第23 页
    · ACCase 的结构第23-28 页
      · 生物素羧化酶(BC)的结构第23-25 页
      · 羧基转移酶(CT)的结构第25-27 页
      · 生物素载体蛋白(BCCP)的结构第27-28 页
    · ACCase 的生物学功能第28-31 页
      · ACCase 是脂肪酸合成的关键限速酶第28-29 页
      · 植物细胞中ACCase 的功能第29-30 页
      · 动物细胞中ACCase 的功能第30-31 页
  · 化学除草剂在农业中的应用第31-33 页
    · 化学除草剂的除草机理第31-32 页
    · 化学除草剂应用中存在的主要问题第32-33 页
  · 本研究意义及实验设计第33-36 页
    · 研究意义第33-35 页
    · 实验设计第35-36 页
  · 参考文献第36-42 页
第二章 除草剂对大麦和黄瓜叶片脂肪酸的影响第42-69 页
  · 前言第42-43 页
  · 实验设计第43-44 页
  · 实验材料第44-45 页
    · 主要仪器第44-45 页
    · 主要试剂第45 页
  · 实验方法第45-49 页
    · 大麦(Maris otter)和黄瓜(Restina) 的栽培第45 页
    · 除草剂水溶液的配制第45-46 页
    · 大麦叶片同位素标记实验第46 页
    · 黄瓜叶片同位素标记试验第46-47 页
    · 大麦,黄瓜叶片总脂类的提取与检测第47 页
    · 大麦,黄瓜叶片脂肪酸甲酯的提取与检测第47-49 页
  · 结果与讨论第49-67 页
    · 同位素标记实验条件的优化第49-50 页
      · 不同有机溶剂对脂肪酸合成的影响第49 页
      · 不同有机溶剂,不同的孵育方法对脂肪酸合成的影响第49-50 页
    · “K3”和“Z”类型除草剂对植物脂肪酸合成的影响第50-63 页
      · [1-~(14)C] Acetate 标记实验第51-58 页
      · [2-~(14)C] Malonate 标记实验第58-63 页
    · Pinoxaden 对植物脂类的影响第63-67 页
      · [1-~(14)C] Acetate 标记实验第63-67 页
  · 本章小结第67-68 页
  · 参考文献第68-69 页
第三章 酿酒酵母ACCASE CT 功能域基因克隆、表达以及性质研究第69-117 页
  · CT 功能域基因克隆第69-95 页
    · 引言第69-70 页
    · 实验设计第70-71 页
    · 实验材料第71-74 页
      · 主要仪器第71 页
      · 主要试剂第71-72 页
      · 实验菌株第72 页
      · 实验用质粒第72 页
      · 溶液配制第72-74 页
    · 实验方法第74-85 页
      · 酵母总RNA 提取第74-76 页
        · 酵母的培养第74-75 页
        · 酵母菌株总RNA 提取第75 页
        · 酵母总RNA 鉴定第75-76 页
      · 酵母cDNA 文库的制备—逆转录反应第76 页
      · 目的基因的扩增第76-77 页
      · 重组质粒的构建第77-81 页
      · BH28a 重组质粒转化大肠杆菌第81-82 页
      · 目的基因的诱导表达第82 页
      · SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第82-84 页
      · 表达条件的优化第84-85 页
        · 表达菌株的优化第84 页
        · 最佳表达温度确定第84 页
        · IPTG 诱导条件的优化第84-85 页
    · 结果与讨论第85-94 页
      · 酵母总RNA 的提取第85-86 页
      · PCR 扩增目的基因第86-88 页
        · 酵母ACCase CT 功能域基因的确定第86-87 页
        · 特异性引物扩增目的基因第87-88 页
      · 酵母ACCase CT 功能域基因重组质粒的构建第88-90 页
      · 表达载体第90-91 页
      · 重组质粒表达条件的优化第91-94 页
        · 表达菌株的选择第91-94 页
    · 小结第94-95 页
  · 包涵体的溶解与复性第95-115 页
    · 前言第95-97 页
    · 实验材料第97-99 页
    · 实验方法第99-105 页
      · 细胞破碎及蛋白提取第99 页
      · 包涵体的洗涤与溶解第99-100 页
      · NI-亲合层析纯化第100-101 页
        · Ni-亲合层析柱处理第100-101 页
        · Ni-亲合层析纯化第101 页
      · 蛋白浓度的测定第101 页
      · 包涵体的复性第101-105 页
        · 稀释复性法第102 页
        · 透析复性法第102 页
        · 系统透析复性法第102-103 页
        · 活力测定第103-104 页
        · 复性蛋白的荧光光谱分析第104-105 页
        · 复性蛋白的圆二色谱分析第105 页
    · 结果与讨论第105-114 页
      · 包涵体的洗涤与溶解第105-108 页
      · 亲合层析纯化第108-109 页
      · 包涵体的复性第109-110 页
      · 不同复性方法酶活力的比较第110-111 页
      · 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第111-112 页
      · 荧光光谱测定第112-113 页
      · 圆二色谱分析第113-114 页
    · 小结第114-115 页
  · 参考文献第115-117 页
全文总结第117-120 页
  1. 已取得成果第117-118 页
  2. 研究中存在的问题第118 页
  3. 展望第118-120 页
    · 对Acetamides 的进一步研究第118-119 页
    · ACCase CT 功能域模型的进一步优化第119-120 页
博士论文期间主要成果第120-121 页
致谢第121-122 页
中文摘要第122-125 页
ABSTRACT第125-127 页

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