论文目录 | |
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略术语表 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 实验材料 | 第18-26页 |
| 一.细胞系 | 第18页 |
| 二.动物 | 第18页 |
| 三.药品及试剂 | 第18-22页 |
| · 细胞培养材料 | 第18-19页 |
| · 动物模型 | 第19-20页 |
| · 冰冻切片及免疫组化(荧光)染色/细胞免疫组化(荧光)染色 | 第20页 |
| · 组织匀浆 | 第20-21页 |
| · 总蛋白测定 | 第21页 |
| · RT-PCR | 第21页 |
| · 细胞增殖 | 第21页 |
| · 细胞迁移和侵袭 | 第21-22页 |
| 四.抗体 | 第22页 |
| 五.试剂盒 | 第22页 |
| 六.常用溶液配制 | 第22-24页 |
| · 细胞培养用液 | 第22-23页 |
| · 动物模型 | 第23页 |
| · 冰冻切片及免疫组化(荧光)染色/细胞免疫组化(荧光)染色 | 第23-24页 |
| · 总蛋白测定 | 第24页 |
| · 细胞实验 | 第24页 |
| 七.主要仪器 | 第24-26页 |
| 实验方法 | 第26-43页 |
| 一.细胞复苏 | 第26页 |
| 二.细胞培养 | 第26-27页 |
| 三.细胞冻存 | 第27-28页 |
| 四.动物实验模型 | 第28-30页 |
| · 人鼠佐剂性关节炎模型 | 第28页 |
| · 小鼠Lewis肺癌移植瘤模型 | 第28-29页 |
| · 裸鼠A549移植瘤模型 | 第29-30页 |
| 五.体内巨噬细胞提取分离 | 第30-32页 |
| · 大鼠腹腔巨噬细胞提取 | 第30页 |
| · 正常C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞提取 | 第30-31页 |
| · 荷LLC肿瘤的C57BL/6小鼠中LLC肿瘤组织巨噬细胞提取 | 第31-32页 |
| · 荷A549移植瘤裸鼠腹腔巨噬细胞提取 | 第32页 |
| 六.肿瘤组织冰冻切片及免疫组化或荧光染色 | 第32-33页 |
| 七.肿瘤组织匀浆制备 | 第33-34页 |
| 八.Bradford法测定蛋白浓度 | 第34页 |
| 九.细胞免疫荧光和免疫化学染色 | 第34-36页 |
| · LLC肿瘤组织巨噬细胞F4/80免疫荧光染色 | 第34-35页 |
| · 与LLC细胞共培养的正常C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞p65免疫化学染色 | 第35-36页 |
| 十.酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第36-37页 |
| · 肿瘤组织匀浆 | 第36页 |
| · 原代培养的腹腔巨噬细胞上清 | 第36页 |
| · 体外与LLC共培养或经LLC条件培养基诱导的巨噬细胞上清 | 第36-37页 |
| 十一.荧光定量PCR实验 | 第37-39页 |
| · 肿瘤组织巨噬细胞中TNF-α mRNA的表达 | 第37-38页 |
| · 体外与经LLC条件培养基诱导的RAW·细胞中TNF-α和IL-6 mRNA的表达 | 第38-39页 |
| 十二.CCK-8细胞计数试剂盒检测细胞增殖 | 第39-41页 |
| · 检测药物对单独培养的LLC细胞增殖的影响 | 第39页 |
| · 检测正常C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞对LLC细胞增殖的影响 | 第39-40页 |
| · 检测药物对正常C57BL/6小鼠腹腔巨噬细胞与LLC细胞共培养体系中的LLC细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
| 十三.结晶紫染色测定药物处理的巨噬细胞对肿瘤细胞迁移和侵袭的影响 | 第41页 |
| · 迁移实验 | 第41页 |
| · 侵袭实验 | 第41页 |
| 十四.统计学分析 | 第41-43页 |
| 实验结果 | 第43-66页 |
| 一.CAI对炎症模型大鼠腹腔巨噬细胞炎症介质释放的影响 | 第43-44页 |
| 二.CAI对LLC肿瘤组织巨噬细胞中TNF-α表达和释放的抑制作用 | 第44-47页 |
| · CAI对LLC肿瘤组织匀浆中TNF-α含量的影响 | 第44-45页 |
| · CAI对LLC肿瘤组织巨噬细胞中TNF-α mRNA表达的影响 | 第45-47页 |
| 三.CAI对LLC肿瘤组织中血管形成的抑制作用 | 第47-48页 |
| 四.CAI对体外LLC肿瘤环境诱导的巨噬细胞的影响 | 第48-54页 |
| · 小鼠腹腔巨噬细胞受到共培养的LLC肿瘤细胞的活化 | 第48-49页 |
| · CAI显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞与LLC肿瘤细胞共培养后TNF-α释放的增加 | 第49-50页 |
| · CAI对经LLC肿瘤条件培养基诱导的小鼠腹腔巨噬细胞IL-10生成有上调作用 | 第50-51页 |
| · CAI显著抑制RAW26·7细胞受LLC肿瘤细胞条件培养基诱导后TNF表达和释放的增加 | 第51-53页 |
| · CAI显著抑制RAW·细胞与LLC肿瘤细胞共培养后IL-6表达的增加 | 第53-54页 |
| 五.CAI在体外巨噬细胞和LLC肿瘤细胞共培养模型中通过巨噬细胞间接发挥抗肿瘤作用 | 第54-59页 |
| · 小鼠腹腔巨噬细胞显著促进LLC肿瘤细胞的增殖 | 第54-55页 |
| · DEX增强CAI对小鼠腹腔巨噬细胞与LLC细胞共培养体系中LLC细胞增殖的抑制作用 | 第55-56页 |
| · TNF-α抗体能够有效抑制RAW·对LLC肿瘤细胞迁移的促进作用 | 第56-57页 |
| · RAW26·7细胞显著促进LLC肿瘤细胞的迁移和侵袭,经CAI或DEX预处理的RAW26·7对迁移和侵袭的促进作用减弱 | 第57-59页 |
| 六.CAI显著抑制LLC肿瘤细胞的增殖,DEX未能促进CAI对LLC肿瘤细胞的直接抑制作用 | 第59页 |
| 七.CAI与DEX联合用药显著抑制C57BL/6小鼠中LLC肿瘤的生长 | 第59-62页 |
| · 瘤径记录和分析显示,CAI能显著抑制LLC移植瘤的生长,与DEX合用后作用显著增强 | 第59-61页 |
| · 体内实验中加入DEX组显示DEX也能够抑制肿瘤组织的生长;两者对荷瘤动物的体重没有明显影响 | 第61页 |
| · CAI和DEX合用明显延长LLC荷瘤动物的生存期 | 第61-62页 |
| 八.CAI与DEX联合用药在裸鼠A549移植瘤模型中的作用 | 第62-66页 |
| · CAI与DEX联合用药能够显著抑制A549移植瘤的生长 | 第62-63页 |
| · CAI和DEX联合用药能够显著减少A549移植瘤组织中血.管的生成 | 第63-64页 |
| · CAI和DEX联合用药能够显著下调A549移植瘤组织匀浆TNF-α和TGF-β的含量 | 第64-65页 |
| · CAI和DEX联合用药将荷A549抑制瘤裸鼠腹腔巨噬细胞中TNF-α的释放降至极低水平 | 第65-66页 |
| 讨论 | 第66-74页 |
| 一.目前对羧胺三唑抗癌和抗炎药理作用的认识 | 第66-68页 |
| 二.炎癌关系及巨噬细胞和炎症介质在炎症和癌症发展中的重要作用 | 第68-71页 |
| 三.CAI对巨噬细胞释放炎症介质的影响 | 第71-72页 |
| 四.地塞米松(DEX)对CAI抑制巨噬细胞炎症介质释放和肿瘤生长作用的增强及两者合用的临床发展前景 #70五.有待解决的问题 | 第72-73页 |
| 五.有待解决的问题 | 第73-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 综述一 炎症-癌症关系链中细胞因子的重要作用 | 第82-102页 |
| 参考文献 | 第90-102页 |
| 综述二 MicroRNA在炎症和癌症中的表达特征和重要作用 | 第102-110页 |
| 参考文献 | 第105-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
