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柑桔果实有机酸代谢生理和奉节脐橙芽变株系的AFLP分析研究

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柑桔果实有机酸代谢生理和奉节脐橙芽变株系的AFLP分析研究
论文目录
 
中文摘要第1-15 页
英文摘要第15-23 页
主要缩略词表第23-24 页
第一章 文献综述第24-41 页
  1.1 柑桔果实中有机酸代谢的研究第24-31 页
    1.1.1 柑桔果实中有机酸的种类和含量变化第24-25 页
    1.1.2 有机酸的合成部位和贮藏场所第25-26 页
    1.1.3 柑桔果实汁胞中有机酸积累的生理机制第26-30 页
      1.1.3.1 柠檬酸的合成机制和相关酶活性第26-28 页
      1.1.3.2 有机酸的跨膜运输第28 页
      1.1.3.3 有机酸的分解和利用第28-30 页
    1.1.4 影响柑桔果实有机酸的环境因素第30 页
      1.1.4.1 温度第30 页
      1.1.4.2 水分第30 页
      1.1.4.3 光照第30 页
      1.1.4.4 土壤和营养元素第30 页
    1.1.5 降低柑桔果实酸度的措施第30-31 页
  1.2 植物生理学研究的进展—遗传标记和基因的表达与调控第31-38 页
    1.2.1 遗传标记的类型与分子标记的概念第31-32 页
    1.2.2 分子标记的种类第32-33 页
    1.2.3 AFLP标记第33-35 页
    1.2.4 基因的表达调控第35-38 页
      1.2.4.1 器官与组织专一性表达的基因第35-36 页
      1.2.4.2 受环境因素诱导而表达的基因第36-37 页
      1.2.4.3 基因表达的调节机理第37-38 页
  1.3 柑橘果树有机酸分子生物学研究进展第38-41 页
    1.3.1 控制柑桔果实有机酸研究代谢的分子标记和基因表达研究进展第38-39 页
    1.3.2 砷酸、亚砷酸盐降酸机理第39-40 页
    1.3.3 有机酸的载体—柠檬酸结合蛋白(CBP, Citrate Binding Protein)和H~+-ATP酶的提纯和基因分离第40-41 页
第二章 引言第41-44 页
  2.1 柑橘果实有机酸代谢研究的意义第41 页
  2.2 论文立题缘起与创新性第41-44 页
第三章 柑桔果实发育过程中有机酸含量及其几种相关代谢酶活性的变化第44-56 页
  3.1 材料与方法第44-47 页
    3.1.1 材料第44 页
    3.1.2 测定项目与方法第44-47 页
      3.1.2.1 酶液的制备第44-45 页
      3.1.2.2 测定方法第45-47 页
  3.2 结果与分析第47-56 页
    3.2.1 果实发育过程中柠檬酸含量变化第47-48 页
    3.2.2 果实发育过程中糖酸比变化第48 页
    3.2.3 柑橘各类型果实发育过程中柠檬酸代谢相关酶活性变化第48-56 页
      3.2.3.1 柠檬酸合成酶第48-49 页
      3.2.3.2 苹果酸脱氢酶第49-50 页
      3.2.3.3 乌头酸酶第50-52 页
        A 线粒体乌头酸酶第50-51 页
        B 细胞质乌头酸酶第51-52 页
      3.2.3.4 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶第52-53 页
      3.2.3.5 NAD-异柠檬酸脱氢酶第53-54 页
      3.2.3.6 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶/NAD-异柠檬酸脱氢酶第54-56 页
第四章 相关性状发生差异的脐橙芽变株系的AFLP分子标记研究第56-90 页
  4.1 材料与仪器第56-57 页
    4.1.1 样品来源第56 页
    4.1.2 主要的试剂和药品第56 页
    4.1.3 主要仪器和设备第56-57 页
  4.2 方法第57-66 页
    4.2.1 DNA的提取第57-58 页
      4.2.1.1 试剂第57 页
      4.2.1.2 DNA提取步骤(粗提)第57-58 页
      4.2.1.3 DNA粗提物的纯化第58 页
      4.2.1.4 基因组DNA的检测第58 页
      4.2.1.5 DNA样品浓度、纯度的检测第58 页
    4.2.2 基因组DNA酶切第58-59 页
    4.2.3 酶切产物的连接第59 页
    4.2.4 预扩增反应第59-60 页
    4.2.5 选择扩增反应第60 页
    4.2.6 选择扩增产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第60-62 页
    4.2.7 差异带的回收第62-63 页
    4.2.8 目标片段的PCR再扩增与鉴定第63 页
    4.2.9 目标片段再扩增产物的纯化克隆测序第63-66 页
      4.2.9.1 目标片段再扩增产物的纯化第63 页
      4.2.9.2 目标片段与载体连接第63-64 页
      4.2.9.3 感受态细胞的制备与转化第64 页
      4.2.9.4 阳性克隆的筛选及验证第64-66 页
  4.3 结果与分析第66-90 页
    4.3.1 提取柑橘DNA的质量第66 页
    4.3.2 DNA的酶切第66-67 页
    4.3.3 AFLP分析第67-72 页
      4.3.3.1 AFLP聚丙烯酰胺电泳图谱及其带型分析第69-70 页
      4.3.3.2 差异片段的回收与再扩增鉴定第70-72 页
    4.3.4 目标片段的纯化克隆测序第72-73 页
      4.3.4.1 目标片段的纯化第72-73 页
      4.3.4.2 目标片段的克隆测序第73 页
    4.3.5 目标片段测序结果分析第73-90 页
      4.3.5.1 目标片段测序结果第73-76 页
      4.3.5.2 目标片段测序结果与拟南芥基因库比对分析第76-90 页
第五章 讨论第90-96 页
  5.1 影响柑橘果实有机酸代谢的酶及其活性第90-92 页
    5.1.1 柑橘果实有机酸的季节变化第90 页
    5.1.2 柠檬酸合成酶(CS)对柑橘果实有机酸积累的影响第90-91 页
    5.1.3 磷酸烯醇式丙酮酸脱氢酶和PEPC/NAD-IDH第91 页
    5.1.4 乌头酸酶对对柑橘果实有机酸积累的影响83第91-92 页
  5.2 柑橘果实有机酸代谢的分子生物学研究第92-94 页
    5.2.1 影响AFLP的主要因素第92 页
    5.2.2 差异片段比对结果分析第92-94 页
  5.3 关于柑橘果实的糖酸比和熟性第94-96 页
第六章 结论第96-97 页
参考文献第97-108 页
发表论文及课题一览表第108-109 页
致谢第109-111 页
附录(部分差异片段测序图谱)第111-113页

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