论文目录 | |
| 中文摘要 | 第10-15页 |
| 英文摘要 | 第15-22页 |
| 引言 | 第22-26页 |
| 第一部分 双层微流控芯片细胞共培养检测平台的构建 | 第26-39页 |
| （一）前言 | 第26页 |
| （二）材料和方法 | 第26-31页 |
| · 材料 | 第26-27页 |
| · 细胞及主要试剂 | 第26-27页 |
| · 主要仪器和设备 | 第27页 |
| · 方法 | 第27-31页 |
| · 微流控芯片细胞培养系统构建流程 | 第27-28页 |
| · 微流控芯片设计 | 第28-30页 |
| · 常规细胞培养准备 | 第30页 |
| · 芯片上细胞培养 | 第30-31页 |
| （三）结果 | 第31-33页 |
| · 微流控细胞培养体系的构建 | 第31-32页 |
| · 微流控芯片体系验证 | 第32-33页 |
| · 药物和生长因子在凝胶中的扩散 | 第32页 |
| · 浓度梯度发生器 | 第32-33页 |
| · 微流控芯片平台中的细胞培养 | 第33页 |
| · 2D成纤维细胞HFL-1 培养 | 第33页 |
| · 3D肺癌细胞A549培养 | 第33页 |
| （四）讨论 | 第33-35页 |
| （五）小结 | 第35页 |
| （六）参考文献 | 第35-39页 |
| 第二部分 基于微流控平台癌相关成纤维细胞介导的NSCLC A549细胞PI3K-AKT促生存通路的表达及细胞耐药性检测 | 第39-55页 |
| （一）前言 | 第39-40页 |
| （二）材料和方法 | 第40-46页 |
| · 材料 | 第40-43页 |
| · 细胞及主要试剂 | 第40-41页 |
| · 试剂配制 | 第41-42页 |
| · 主要仪器和设备 | 第42-43页 |
| · 方法 | 第43-46页 |
| · 实验技术路线 | 第43页 |
| · 微流控细胞培养体系的构建 | 第43页 |
| · 癌相关成纤维细胞的准备 | 第43-44页 |
| · 免疫荧光化学检测蛋白表达 | 第44-45页 |
| · Western-blotting方法检测蛋白表达 | 第45-46页 |
| · 细胞凋亡观察 | 第46页 |
| （三）结果 | 第46-50页 |
| · 癌相关成纤维细胞的诱导 | 第46-47页 |
| · A549细胞三维共培养PI3K及AKT磷酸化水平的检测 | 第47-49页 |
| · 免疫荧光细胞化学方法 | 第47-48页 |
| · Western blotting方法检测PI3K及AKT磷酸化水平 | 第48-49页 |
| · PI3K/AKT表达上调与Paclitaxel诱导A549细胞凋亡相关性研究 | 第49-50页 |
| · Paclitaxel对A549细胞凋亡的影响 | 第49-50页 |
| · 加入PI3K/AKT抑制剂对Paclitaxel介导的A549细胞凋亡的影响 | 第50页 |
| （四）讨论 | 第50-52页 |
| （五）小结 | 第52页 |
| （六）参考文献 | 第52-55页 |
| 第三部分 基于微流控平台PI3K/AKT与GRP78表达相关性研究 | 第55-66页 |
| （一）前言 | 第55页 |
| （二）材料和方法 | 第55-60页 |
| · 材料 | 第55-58页 |
| · 细胞及主要试剂 | 第55-57页 |
| · 试剂配制 | 第57-58页 |
| · 主要仪器和设备 | 第58页 |
| · 方法 | 第58-60页 |
| · 实验技术路线 | 第58-59页 |
| · 微流控细胞培养体系的构建 | 第59页 |
| · 癌相关成纤维细胞的准备 | 第59页 |
| · pPI3K、p AKT1、GRP78蛋白表达 | 第59页 |
| · Western-blotting方法检测蛋白表达 | 第59-60页 |
| · 细胞凋亡观察 | 第60页 |
| 3 统计学处理 | 第60页 |
| （三）结果 | 第60-63页 |
| · pPI3K、pAKT及GRP78蛋白表达 | 第60-61页 |
| · Western blotting方法检测pPI3K、pAKT及GRP78表达 | 第61页 |
| 3．GRP78表达上调与Paclitaxel诱导的A549细胞凋亡相关性研究 | 第61-62页 |
| 4．加入PI3K/AKT抑制剂及GRP78抑制剂对Paclitaxel介导的A549细胞凋亡的影响 | 第62-63页 |
| （四）讨论 | 第63-64页 |
| （五）小结 | 第64页 |
| （六）参考文献 | 第64-66页 |
| 第四部分 基于微流控芯片平台的细胞因子检测 | 第66-74页 |
| （一）前言 | 第66-67页 |
| （二）材料和方法 | 第67-69页 |
| · 材料 | 第67页 |
| · 主要试剂 | 第67页 |
| · 主要仪器 | 第67页 |
| · 方法 | 第67-69页 |
| · 实验技术路线 | 第67页 |
| · 激活的HFL-1 细胞（CAF）及HFL-1 和A549细胞上清液HGF检测 | 第67-68页 |
| · 免疫荧光和Western blot方法检测相关蛋白 | 第68-69页 |
| （三）结果 | 第69-70页 |
| · HFL-1 细胞和肺癌A549细胞中HGF检测 | 第69页 |
| · HGF对A549细胞p-Met及c-Met蛋白表达的影响 | 第69-70页 |
| · HGF对A549细胞p-PI3K、p-AKT、GRP78表达的影响 | 第70页 |
| （四）讨论 | 第70-72页 |
| （五）小结 | 第72页 |
| （六）参考文献 | 第72-74页 |
| 综述 | 第74-92页 |
| 参考文献 | 第83-92页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
