论文目录 | |
| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 研究背景 | 第14-32页 |
| 第一节C型凝集素研究概述 | 第14-25页 |
| 一、C型凝集素的定义 | 第14页 |
| 二、C型凝集素的结构 | 第14-18页 |
| 三、C型凝集素的分类 | 第18页 |
| 四、C型凝集素的功能 | 第18-25页 |
| 第二节 无脊椎动物C型凝集素研究概述 | 第25-27页 |
| 一、无脊椎动物C型凝集素的分类 | 第25-26页 |
| 二、无脊椎动物C型凝集素的功能 | 第26-27页 |
| 三、无脊椎动物C型凝集素的分子识别机制 | 第27页 |
| 第三节 双壳类C型凝集素的研究进展 | 第27-29页 |
| 第四节 本研究的目的及意义 | 第29-32页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第32-46页 |
| 第一节 实验材料 | 第32-35页 |
| 一、实验动物及菌株 | 第32-33页 |
| 二、生物试剂 | 第33-34页 |
| 三、仪器设备 | 第34-35页 |
| 第二节 实验方法 | 第35-46页 |
| 一、实验动物的处理及样品收集 | 第35页 |
| 二、mRNA的提取及cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 三、基因克隆及序列分析 | 第36-37页 |
| 四、mRNA表达水平的检测 | 第37页 |
| 五、基因的原核重组及蛋白的表达纯化 | 第37-40页 |
| 六、多克隆抗体的制备和IgG的纯化 | 第40页 |
| 七、Western blotting检测 | 第40-41页 |
| 八、免疫组织化学检测 | 第41-42页 |
| 九、免疫荧光检测 | 第42页 |
| 十、重组蛋白的PAMPs结合活性检测 | 第42-43页 |
| 十一、重组蛋白的菌结合活性检测 | 第43页 |
| 十二、重组蛋白凝菌活性的检测 | 第43-44页 |
| 十三、重组蛋白抑菌曲线的测定 | 第44页 |
| 十四、重组蛋白对兔血红细胞的凝集作用检测 | 第44页 |
| 十五、重组蛋白促进贝类血细胞的吞噬活性检测 | 第44-45页 |
| 十六、重组蛋白促进扇贝血细胞的包囊化活性检测 | 第45页 |
| 十七、数据统计分析 | 第45-46页 |
| 第三章 实验结果 | 第46-82页 |
| 第一节 栉孔扇贝含四个CRD的C型凝集素Cf Lec-4 的研究 | 第46-57页 |
| 一、CfLec-4 的基因克隆及序列分析 | 第46-48页 |
| 二、不同PAMPs刺激后CfLec-4 在mRNA水平的表达模式 | 第48-49页 |
| 三、CfLec-4 的原核重组表达以及多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| 四、CfLec-4 在栉孔扇贝不同组织中的分布 | 第50-51页 |
| 五、Cflec-4 重组蛋白的PAMPs结合活性 | 第51-52页 |
| 六、CfLec-4 重组蛋白的菌结合活性 | 第52-53页 |
| 七、Cflec-4 重组蛋白对栉孔扇贝血淋巴细胞吞噬活性促进 | 第53-54页 |
| 八、CfLec-4 的四个CRD结构域的基因重组及蛋白表达 | 第54页 |
| 九、CfLec-4 四个CRD重组蛋白的PAMPs结合活性 | 第54-55页 |
| 十、CfLec-4 的四个CRD重组蛋白的菌结合活性 | 第55-56页 |
| 十一、Cf Lec-4 四个CRD促进扇贝血淋巴细胞对大肠杆菌的吞噬活性 | 第56-57页 |
| 第二节 海湾扇贝含单个CRD的C型凝集素免疫功能及识别机制的研究 | 第57-73页 |
| 一、含关键氨基酸基序EPD/WSD的C型凝集素AiCTL-7 的研究 | 第57-65页 |
| 二、含关键氨基酸基序EPN的C型凝集素AiCTL-2，AiCTL-3 和AiCTL-4 的研究 | 第65-73页 |
| 第三节 牡蛎膜型C型凝集素CgCLec-5 研究 | 第73-82页 |
| 一、CgCLec-5 的序列特征 | 第73-75页 |
| 二、CgCLec-5 的基因重组、蛋白表达及抗体特异性检测 | 第75-76页 |
| 三、CgCLec-5 的组织分布 | 第76-78页 |
| 四、CgCLec-5 的CRD结构域重组蛋白的PAMPs结合谱 | 第78-79页 |
| 五、CgCLec-5 促进牡蛎血淋巴细胞的吞噬活性 | 第79-82页 |
| 第四章 讨论 | 第82-96页 |
| 第一节C型凝集素在机体固有免疫中起重要作用 | 第82-83页 |
| 第二节 双壳类C型凝集素数量多并广泛分布 | 第83-84页 |
| 第三节 双壳类C型凝集素具有广泛的组织分布 | 第84-86页 |
| 第四节 双壳类C型凝集素的结构多样性 | 第86-90页 |
| 一、双壳类含有结构多样的C型凝集素 | 第86页 |
| 二、双壳类C型凝集素的Ca2+结合位点2具有多样性 | 第86-90页 |
| 第五节 双壳类C型凝集素对PAMPs和微生物的识别活性 | 第90-93页 |
| 一、含多个CRD的C型凝集素Cf Lec-4 具有广泛的PAMPs识别谱和菌结合谱 | 第90-91页 |
| 二、双壳类动物含单个CRD的C型凝集素的免疫识别活性 | 第91-93页 |
| 第六节 双壳类C型凝集素具有凝集和抑菌活性 | 第93-94页 |
| 第七节 双壳类C型凝集素具备调理素活性 | 第94-96页 |
| 第五章 结论 | 第96-100页 |
| 参考文献 | 第100-118页 |
| 附录 本论文所用引物序列 | 第118-120页 |
| 作者简历 | 第120-122页 |
| 硕博连读期间完成和发表的论文 | 第122-123页 |
