论文目录 | |
绪论 | 第11-12
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文献综述 | 第12-28
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1 历史回顾 | 第12-13
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2 病毒的分类 | 第13-14
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3 病毒的结构 | 第14-16
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4 病毒的基因 | 第16-18
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5 病毒的进化 | 第18-19
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6 类ALV内源性反录病毒 | 第19-20
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7 流行病学 | 第20-21
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8 病毒的致病性 | 第21-22
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9 病毒复制与致瘤机制 | 第22-25
页 |
10 ALV-J诊断 | 第25-26
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11 ALV-J控制 | 第26-28
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研究一 J亚群禽白血病病毒的分离、鉴定及其部分基因特性分析 | 第28-62
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1 材料和方法 | 第28-32
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· 样品 | 第28
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· 细胞 | 第28-29
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· 抗ALV-J单克隆抗体 | 第29
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· ALV-J特异性引物 | 第29
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· 病毒分离 | 第29
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· 间接免疫荧光反应 | 第29
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· 模板DNA制备及PCR | 第29-30
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· PCR反应Ⅰ产物克隆 | 第30
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· PCR产物DNA的定序 | 第30
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· 序列分析 | 第30-31
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· 负染色电镜观察 | 第31
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· 回归感染动物实验 | 第31
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· 组织切片 | 第31
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· 引用序列 | 第31-32
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2 结果 | 第32-56
页 |
· 血清学检测和病理学观察 | 第32
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· 病毒分离及其PCR检测 | 第32-33
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· 间接免疫荧光反应 | 第33-34
页 |
· PCR反应Ⅰ产物的克隆 | 第34
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· 病毒粒子负染色电镜观察 | 第34
页 |
· PCR反应Ⅰ产物测序结果及同源性分析 | 第34-39
页 |
· 分离毒株回归感染动物 | 第39-45
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· 分离毒株的部分基因分析 | 第45-56
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3 讨论 | 第56-62
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研究二 J亚群禽白血病病毒IMC_(10200)株膜表面糖蛋白gp85基因的克隆与表达 | 第62-70
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1 材料及方法 | 第62-65
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· ALV-J病毒与特异性单克隆抗体 | 第62
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· 昆虫细胞及杆状病毒Bac-to-Bac表达系统 | 第62
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· gp85基因的克隆 | 第62-63
页 |
· 重组转移载体的构建 | 第63
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· 重组杆状病毒表达DNA载体的制备 | 第63-64
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· 重组杆状病毒DNA转染Sf9细胞 | 第64
页 |
· 间接免疫荧光反应 | 第64
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· Western blotting | 第64-65
页 |
2 结果 | 第65-68
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· gp85基因的克隆 | 第65
页 |
· 重组转移载体的酶切鉴定 | 第65-66
页 |
· 转座效果及重组Bacmid DNA的分离提取效果 | 第66-67
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· gp85基因在Sf9细胞中表达的鉴定 | 第67
页 |
· Western blotting | 第67-68
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3 讨论 | 第68-70
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研究三 鸡内源性类J亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆及分析 | 第70-98
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1 材料和方法 | 第70-74
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· 实验材料 | 第71
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· 预备试验 | 第71-72
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· 基因组DNA提取 | 第72
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· 内源性类ALV-J gp85及ALV-J特异性引物PCR | 第72
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· 目的基因克隆 | 第72-73
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· DNA测序和分析 | 第73
页 |
· 内源性类ALV-J gp85基因的尝试性表达 | 第73
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· 引用基因序列 | 第73-74
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2 结果 | 第74-87
页 |
· 预选样品DNA | 第74
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· 类ALV-J gp85内源性序列的PCR | 第74
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· ALV-J特异性PCR | 第74-76
页 |
· 类ALV-J gp85内源性序列基因克隆及酶切鉴定 | 第76-77
页 |
· 重组转移载体的构建及酶切鉴定 | 第77
页 |
· 转座及重组Bacmid DNA的分离提取 | 第77
页 |
· WLC2 gp85在Sf9细胞中尝试性表达的观察 | 第77-79
页 |
· 内源性类ALV-J gp85基因的测序结果 | 第79
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· 内源性类ALV-J gp85基因分析 | 第79-87
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· 内源性类ALV-J gp85基因与已发表EAV-HP结果的比较分析 | 第87
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3 讨论 | 第87-98
页 |
主要成果 | 第98-99
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致谢 | 第99-100
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参考文献 | 第100-111
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作者简介 | 第111
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