论文目录 | |
| 1 引言 | 第13-37
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| · 绵羊肺腺瘤病(OPA)概述 | 第13-23
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| · OPA的发现 | 第13
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| · OPA的流行病学 | 第13-15
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| · OPA的临床症状与病理变化 | 第15-16
页 |
| · OPA病原的确立 | 第16-18
页 |
| · OPA的诊断与防治 | 第18-19
页 |
| · OPA的发病机理 | 第19-22
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| · 目前急需解决的问题 | 第22-23
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| · 绵羊肺腺瘤病毒(JSRV)的分子生物学 | 第23-35
页 |
| · JSRV的分类地位 | 第23
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| · JSRV的形态和理化性质 | 第23-25
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| · JSRV的细胞嗜性 | 第25
页 |
| · 毒株分类 | 第25-26
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| · JSRV基因组结构 | 第26-27
页 |
| · JSRV的基因及其编码的蛋白 | 第27-30
页 |
| · JSRV的复制、蛋白质的合成和形态发生 | 第30-33
页 |
| · JSRV 受体 | 第33
页 |
| · JSRV 内源性病毒 | 第33-34
页 |
| · 绵羊肺腺瘤(OPA)与人的细支气管肺泡癌(BAC) | 第34-35
页 |
| · 结语 | 第35-37
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| 2 研究一 绵羊肺腺瘤病毒NM株的分离与电镜观察 | 第37-44
页 |
| 摘要 | 第37-38
页 |
| · 材料 | 第38
页 |
| · 方法 | 第38-39
页 |
| · 病毒悬液的制备 | 第38
页 |
| · 电镜样品的制备 | 第38
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| · 绵羊胚胎肺原代细胞的培养 | 第38-39
页 |
| · 病毒的分离 | 第39
页 |
| · 培养液电镜负染色材料和透射电镜材料的制备与观察 | 第39
页 |
| · 含有JSRV接种物的培养细胞PCR检测 | 第39
页 |
| · 结果 | 第39-42
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| · 电镜负染色技术观察结果 | 第39-40
页 |
| · 培养的胚胎肺细胞 | 第40-41
页 |
| · 超薄切片的电镜观察 | 第41
页 |
| · 含有JSRV接种物的培养细胞经PCR检测结果 | 第41-42
页 |
| · 讨论 | 第42-44
页 |
| 3 研究二 绵羊肺腺瘤病毒中国NM株前病毒基因组的克隆与全序列分析 | 第44-93
页 |
| 摘要 | 第44-46
页 |
| · 材料 | 第46-47
页 |
| · 病毒材料、质粒和菌株 | 第46-47
页 |
| · 分子生物学试剂 | 第47
页 |
| · 引物设计 | 第47
页 |
| · 方法 | 第47-51
页 |
| · 含JSRV的肺肿瘤细胞总DNA的提取 | 第47-48
页 |
| · JSRV基因组的分段扩增 | 第48
页 |
| · JSRV基因组的克隆 | 第48-49
页 |
| · 重组子阳性质粒鉴定 | 第49-50
页 |
| · 测序 | 第50
页 |
| · 引用序列说明 | 第50-51
页 |
| · 结果 | 第51-90
页 |
| · 含JSRV的肺肿瘤细胞总DNA的提取 | 第51
页 |
| · JSRV基因组分段扩增结果 | 第51-52
页 |
| · 重组质粒的鉴定 | 第52-57
页 |
| · JSRV-NM株前病毒基因组全序列 | 第57-61
页 |
| · JSRV-NM株前病毒基因组核苷酸序列与国外代表株序列的比较分析 | 第61
页 |
| · JSRV-NM株前病毒基因组氨基酸序列与国外代表株序列的比较分析 | 第61-63
页 |
| · JSRV-NM株前病毒基因组分子结构特征 | 第63-90
页 |
| · 讨论 | 第90-93
页 |
| 4 研究三 绵羊肺腺瘤病毒JSRV-2基因探针的制备与原位杂交检测 | 第93-101
页 |
| 摘要 | 第93-94
页 |
| · 材料 | 第94
页 |
| · 实验材料 | 第94
页 |
| · 实验用主要试剂 | 第94
页 |
| · 方法 | 第94-96
页 |
| · DIG标记DNA探针的制备 | 第94-95
页 |
| · 原位杂交处理 | 第95-96
页 |
| · 实验结果 | 第96-99
页 |
| · 标记DNA探针长度的检测 | 第96-97
页 |
| · 探针的特异性与灵敏度的检测 | 第97
页 |
| · 原位杂交检测结果 | 第97-99
页 |
| · 讨论 | 第99-101
页 |
| 5 研究四 绵羊肺腺瘤病毒NM株囊膜(env)基因的定向克隆与融合表达 | 第101-111
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| 摘要 | 第101-102
页 |
| · 材料与方法 | 第102-105
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| · 质粒与菌株 | 第102-103
页 |
| · 工具酶和相关试剂 | 第103
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| · 模板DNA的提取 | 第103
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| · PCR反应体系 | 第103-104
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| · PCR产物的纯化 | 第104
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| · 克隆载体的构建与鉴定 | 第104-105
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| · 表达载体的构建 | 第105
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| · 诱导表达 | 第105
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| · SDS-PAGE电泳 | 第105
页 |
| · 结果 | 第105-109
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| · env基因的克隆结果 | 第105-106
页 |
| · 重组表达质粒的构建 | 第106-109
页 |
| · env基因在大肠杆菌BL21的表达 | 第109
页 |
| · 讨论 | 第109-111
页 |
| 6 结论与展望 | 第111-113
页 |
| 致谢 | 第113-114
页 |
| 参考文献 | 第114-127
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| 作者简介 | 第127
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