论文目录 | |
| 摘要 | 第1-5
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| Abstract | 第5-14
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| 1 引言 | 第14-49
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| · 防御素的研究进展 | 第14-42
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| · 防御素分子家族的发现简况 | 第14
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| · 防御素的分类 | 第14
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| · 防御素的生物合成 | 第14-15
页 |
| · 防御素的分子特征 | 第15-21
页 |
| · 防御素的分布 | 第21-26
页 |
| · 防御素的基因结构及表达调节 | 第26-30
页 |
| · 防御素的生物学活性 | 第30-38
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| · 防御素的应用前景 | 第38-41
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| · 今后防御素的研究方向 | 第41-42
页 |
| · 雌激素、孕激素及其受体和受体抑制剂 | 第42-48
页 |
| · 雌激素、孕激素来源 | 第42
页 |
| · 雌激素和孕激素的生理作用 | 第42-45
页 |
| · 雌激素受体 | 第45-46
页 |
| · 孕激素受体 | 第46-47
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| · 雌激素和孕激素的抑制剂及抑制剂机理 | 第47-48
页 |
| · 本研究的目的、意义 | 第48-49
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| 2 实验一 蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素（sBD-1）的组织表达 | 第49-63
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| · 材料与方法 | 第49-55
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| · 实验动物及组织 | 第49-50
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| · 主要仪器和试剂 | 第50
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| · PCR 引物的设计及合成 | 第50
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| · 蒙古绵羊雌性生殖道各组织总 RNA 的提取及检测 | 第50-51
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| · RT-PCR 反应 | 第51-52
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| · sBD-1 基因cDNA 的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第52-55
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| · RT-PCR 产物cDNA 的序列测定 | 第55
页 |
| · 序列分析 | 第55
页 |
| · 结果 | 第55-60
页 |
| · 蒙古绵羊雌性生殖道各组织总 RNA 的检测结果 | 第55-56
页 |
| · 蒙古绵羊雌性生殖道各组织 RT-PCR 扩增结果 | 第56-57
页 |
| · 蒙古绵羊输卵管组织PCR 产物的克隆、筛选及鉴定 | 第57-58
页 |
| · 蒙古绵羊输卵管组织PCR 产物的序列分析结果 | 第58-60
页 |
| · 讨论 | 第60-62
页 |
| · β-防御素的分布范围 | 第60-61
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| · 蒙古绵羊雌性生殖道β-防御素的表达情况 | 第61-62
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| · 小结 | 第62-63
页 |
| 3 实验二 蒙古绵羊输卵管β-防御素（sBD-1）的表达定位 | 第63-73
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| · 材料与方法 | 第63-68
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| · 实验动物及其组织 | 第63
页 |
| · 主要仪器和试剂 | 第63
页 |
| · 输卵管sBD-1 RT-PCR 产物的合成、回收与核酸探针的合成 | 第63-66
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| · 原位杂交 | 第66-68
页 |
| · 结果 | 第68-70
页 |
| · 输卵管sBD-1 RT-PCR 产物的回收 | 第68-69
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| · 输卵管原位杂交检测结果 | 第69-70
页 |
| · 讨论 | 第70-72
页 |
| · β–防御素的定位 | 第70-71
页 |
| · 原位杂交方法 | 第71-72
页 |
| · 小结 | 第72-73
页 |
| 4 实验三 蒙古绵羊输卵管上皮细胞培养及特征鉴定 | 第73-87
页 |
| · 材料和方法 | 第73-76
页 |
| · 实验材料 | 第73
页 |
| · 仪器设备 | 第73
页 |
| · 实验药品 | 第73-74
页 |
| · 输卵管上皮细胞培养方法的建立 | 第74
页 |
| · 细胞形态学鉴定 | 第74
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| · 培养细胞的染色体核型分析 | 第74-75
页 |
| · 细胞免疫组化法鉴定 | 第75-76
页 |
| · 结果 | 第76-83
页 |
| · 细胞培养结果 | 第76-79
页 |
| · 传代输卵管上皮细胞吉姆萨染色形态 | 第79-81
页 |
| · 染色体核型分析结果 | 第81
页 |
| · 免疫组化结果 | 第81-83
页 |
| · 讨论 | 第83-85
页 |
| · 上皮细胞的培养 | 第83-84
页 |
| · 上皮细胞的鉴定 | 第84-85
页 |
| · 小结 | 第85-87
页 |
| 5 实验四 17-β-雌二醇和孕酮对培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的影响 | 第87-109
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| · 材料和方法 | 第88-93
页 |
| · 实验材料处理同本论文4.1.1 | 第88
页 |
| · 实验材料 | 第88
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| · 仪器及试剂 | 第88
页 |
| · PCR 引物的设计及合成 | 第88
页 |
| · 实验设计 | 第88-89
页 |
| · 细胞总 RNA 的提取 | 第89
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| · 荧光定量RT-PCR 检测培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的定量方法 | 第89-93
页 |
| · 结果 | 第93-105
页 |
| · 荧光定量RT-PCR 检测培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达定量方法的确定 | 第93-97
页 |
| · 添加17-β-雌二醇对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第97-100
页 |
| · 添加孕酮对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第100-103
页 |
| · 模拟妊娠期、发情期处理结果 | 第103-105
页 |
| · 讨论 | 第105-108
页 |
| · 生理状态下雌激素、孕激素浓度的变化和实验中17-β-雌二醇、孕酮的浓度确定 | 第105-106
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| · 17-β-雌二醇对sBD-1 表达的影响 | 第106-107
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| · 孕酮对sBD-1 表达的影响 | 第107
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| · 孕酮和17-β-雌二醇综合添加对防御素表达的影响 | 第107-108
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| · 小结 | 第108-109
页 |
| 6 实验五 17-β-雌二醇、孕酮二者拮抗剂对培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的影响 | 第109-116
页 |
| · 材料和方法 | 第109-111
页 |
| · 实验材料处理同本论文4.1.1 | 第109
页 |
| · 实验材料实验材料为蒙古绵羊输卵管上皮细胞的第一代传代细胞。处理方法同本论文4.1.4 | 第109
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| · 仪器及试剂实验仪器及试剂同本论文5.1.3 | 第109-110
页 |
| · PCR 引物的设计及合成 | 第110
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| · 实验设计 | 第110
页 |
| · 细胞总RNA 的提取同本论文5.1.6 | 第110
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| · 荧光定量RT-PCR 检测培养的输卵管上皮细胞sBD-1 表达的定量方法 | 第110-111
页 |
| · 荧光定量RT-PCR 同本论文5.1.7.2 和5.1.7.3 | 第111
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| · 实验数据处理 | 第111
页 |
| · 结果 | 第111-114
页 |
| · 添加17-β雌二醇拮抗剂他莫昔芬对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第111-112
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| · 添加孕酮拮抗剂米非司酮对培养的输卵管上皮细胞β-防御素表达的影响 | 第112-114
页 |
| · 讨论 | 第114-115
页 |
| · 雌激素受体、孕激素受体、他莫昔芬和米非司酮在本研究中的意义 | 第114-115
页 |
| · 添加17-β雌二醇拮抗剂他莫昔芬与防御素表达相关性 | 第115
页 |
| · 添加孕酮拮抗剂米非司酮与防御素表达相关性 | 第115
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| · 小结 | 第115-116
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| 7 结论 | 第116-117
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| 致谢 | 第117-118
页 |
| 参考文献 | 第118-135
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| 附录 | 第135-136
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| 作者简介 | 第136
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