论文目录 | |
| 缩写词 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-19页 |
| 第一章 引言 | 第19-30页 |
| 1 植物体胚发生研究进展 | 第20页 |
| 2 植物体胚发生蛋白质组学研究进展 | 第20-22页 |
| 3 Ran和Obg研究进展 | 第22-24页 |
| · Ran研究进展 | 第22-24页 |
| · Obg研究进展 | 第24页 |
| 4 NMD研究进展 | 第24-25页 |
| 5 龙眼生物技术研究进展 | 第25-27页 |
| 6 本研究的意义和主要研究内容 | 第27-30页 |
| · 本研究的意义 | 第27-28页 |
| · 本研究的主要内容 | 第28-30页 |
| 第二章 龙眼体胚发生中期的同步化调控 | 第30-36页 |
| 1 材料与方法 | 第31页 |
| · 材料 | 第31页 |
| · 方法 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-33页 |
| · 龙眼球形胚阶段体胚的诱导 | 第31页 |
| · 龙眼体胚发生中期的同步化调控 | 第31-33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| · 龙眼体胚发生同步化调控的影响因素 | 第33-34页 |
| · 2,4-D与植物体胚发生的关系 | 第34-36页 |
| 第三章 龙眼体胚发生中期的蛋白质组学研究 | 第36-59页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| · 材料 | 第36页 |
| · 方法 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-54页 |
| · 龙眼体胚发生中期各阶段蛋白质的双线电泳分离和图谱分析 | 第37-41页 |
| · 龙体胚发生中期各阶段双向电泳图谱蛋白点数和比例变化分析 | 第37-39页 |
| · 龙眼体胚发生中期各阶段差异表达蛋白比较分析 | 第39-41页 |
| · 龙眼体胚发生中期部分差异蛋白质点的质谱鉴定 | 第41页 |
| · 成功鉴定蛋白表达模式聚类分析和功能分类 | 第41-54页 |
| 3 讨论 | 第54-59页 |
| · 龙眼体细胞胚发生中期各阶段蛋白质种类的变化 | 第54-55页 |
| · 体细胞胚发生中期的代谢变化 | 第55-56页 |
| · 氧化胁迫促进体细胞胚发生 | 第56-57页 |
| · 小 G 蛋白在体细胞胚发生中的作用 | 第57-58页 |
| · 角蛋白与体细胞胚发生 | 第58-59页 |
| 第四章 龙眼体胚Ran家族基因的克隆、生物信息学分析及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第59-101页 |
| 第一节 龙眼体胚Ran家族基因的克隆及结构分析 | 第60-85页 |
| 1 材料与方法 | 第60-62页 |
| · 材料 | 第60页 |
| · 方法 | 第60-62页 |
| · 龙眼胚性愈伤组织和同步化鱼雷形胚DNA与总RNA的提取及cDNA合成 | 第60页 |
| · 龙眼体胚Ran家族基因引物设计与 PCR 扩增 | 第60-61页 |
| · 目的片段的回收、克隆和测序 | 第61-62页 |
| · 龙眼体胚Ran家族基因序列的分析 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-83页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因部分编码序列的获得 | 第62-63页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因cDNA 5'和 3'末端的扩增 | 第63-68页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因cDNA3'末端的获得 | 第63-67页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因cDNA 5'末端的获得 | 第67-68页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因全长cDNA的获得 | 第68-70页 |
| · 龙眼胚性愈伤组织Ran家族基因基因组 DNA 序列的获得 | 第70-71页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因核酸和氨基酸序列分析 | 第71-83页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因cDNA的比较分析 | 第71页 |
| · 龙眼体胚Ran基因结构与核酸特征 | 第71-75页 |
| · 龙眼鱼雷形胚Ran家族基因氨基酸序列的比较分析 | 第75-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| · 龙眼体胚Ran家族基因 mRNA 3'UTR 长度的多态性 | 第83页 |
| · 龙眼体胚Ran家族基因转录起始位点的多态性 | 第83页 |
| · 龙眼体胚Ran家族基因中同义密码子的使用 | 第83-85页 |
| 第二节 龙眼体胚Ran家族基因的生物信息学分析 | 第85-97页 |
| 1 材料与方法 | 第85页 |
| · 材料 | 第85页 |
| · 方法 | 第85页 |
| 2 结果与分析 | 第85-96页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白的基本理化性质比较分析 | 第85-86页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白的信号肽和亚细胞定位分析 | 第86-87页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白的跨膜结构预测 | 第87页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白磷酸化位点预测与分析 | 第87页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白的功能基序预测与分析 | 第87-90页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白保守结构域的预测与分析 | 第90-91页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白二级结构和三维结构预测与分析 | 第91页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白同源性分析 | 第91-93页 |
| · 龙眼体胚Ran蛋白的系统进化分析 | 第93-96页 |
| 3 讨论 | 第96-97页 |
| · 龙眼体胚Ran不同成员亚细胞定位的差异 | 第96页 |
| · 龙眼体胚Ran不同成员的功能是否存在差异？ | 第96-97页 |
| 第三节 龙眼体胚Ran家族基因在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第97-101页 |
| 1 材料与方法 | 第97-98页 |
| · 材料 | 第97页 |
| · 方法 | 第97-98页 |
| · 龙眼胚性培养物总 RNA 的提取和cDNA的合成 | 第97页 |
| · qPCR 引物的设计 | 第97-98页 |
| · 实时荧光定量 PCR | 第98页 |
| 2 结果与分析 | 第98-99页 |
| 3 讨论 | 第99-101页 |
| · 龙眼体胚Ran家族基因在龙眼体胚发生过程中可能发挥的作用 | 第99-100页 |
| · 龙眼体胚发生过程中 Ran 家族基因的转录水平与蛋白质表水平的差异 | 第100-101页 |
| 第五章 龙眼体胚发生过程中Ran表达调控研究 | 第101-121页 |
| 第一节 AS-NMD 与龙眼体胚发生过程中Ran表达调控关系的研究 | 第102-114页 |
| 1 材料与方法 | 第102-103页 |
| · 材料 | 第102页 |
| · 方法 | 第102-103页 |
| · 龙眼胚性愈伤组织的放线菌酮处理 | 第102页 |
| · 龙眼体胚 PTC-Ran qPCR 分析引物设计 | 第102页 |
| · 龙眼胚性培养物总 RNA 的提取和cDNA的合成及 qPCR 分析 | 第102-103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-112页 |
| · 龙眼体胚PTC-Ran cDNA的克隆与分析 | 第103-106页 |
| · 龙眼体胚Ran mRNA前体的剪接与 PTC-Ran 转录本形成的关系 | 第106-107页 |
| · 放线菌酮处理可提高龙眼胚性愈伤组织中 PTC-Ran 转录本表达量 | 第107-109页 |
| · DLRan 的表达量在龙眼体胚发生过程中随相应野生型转录本变化而变化 | 第109-112页 |
| 3 讨论 | 第112-114页 |
| · PTC-Ran 转录本源于可变剪接 | 第112页 |
| · 龙眼体胚 Ran 可变剪接的意义 | 第112-113页 |
| · Ran 转录本中 PTC 的引入可能不保守 | 第113页 |
| · AS-NMD 可能是一种维持特定细胞中 Ran mRNA 动态平衡的机制 | 第113-114页 |
| 第二节 3'UTR 与龙眼体胚发生过程中 Ran 表达调控关系的研究 | 第114-121页 |
| 1 材料与方法 | 第115页 |
| · 材料 | 第115页 |
| · 方法 | 第115页 |
| · 用于 qPCR 分析的引物设计 | 第115页 |
| · 龙眼胚性培养物总 RNA 的提取和 cDNA 的合成及 qPCR 分析 | 第115页 |
| 2 结果与分析 | 第115-119页 |
| · 长的龙眼体胚 Ran 3'UTR 拥有更多的潜在 miRNA 结合位点 | 第115-116页 |
| · 龙眼体胚 Ran 3'UTR 受发育调控但未随体胚发育延伸 | 第116-119页 |
| 3 讨论 | 第119-121页 |
| · 龙眼体胚 Ran 可能与龙眼体胚发生过程中细胞增殖有关 | 第119页 |
| · 3'UTR 可能与 Ran 的表达有关 | 第119-121页 |
| 第六章 龙眼体胚 Obg1 基因的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第121-128页 |
| 1 材料与方法 | 第121-122页 |
| · 材料 | 第121页 |
| · 方法 | 第121-122页 |
| · 总 RNA 提取 | 第121-122页 |
| · 龙眼体胚 Obg 基因 cDNA 序列的克隆 | 第122页 |
| · 生物信息学分析 | 第122页 |
| · 实时荧光定量 PCR | 第122页 |
| 2 结果与分析 | 第122-126页 |
| · 龙眼体胚 Obg 基因 cDNA 序列的克隆及序列分析 | 第122-123页 |
| · 龙眼体胚 DLObg1 序列的比较分析和系统进化分析 | 第123页 |
| · 龙眼体胚发生过程中 DLObg1 的转录水平分析 | 第123-126页 |
| 3 讨论 | 第126-128页 |
| · DLObg1 3’UTR 长度多态性与龙眼体胚发生过程中 DLObg1 表达调控的关系 | 第126页 |
| · DLObg1 在龙眼体胚发生中的作用 | 第126-128页 |
| 第七章 小结 | 第128-132页 |
| 1 龙眼体胚发生中期的同步化调控 | 第128页 |
| 2 龙眼体胚发生中期的蛋白质组学研究 | 第128-129页 |
| 3 龙眼体胚 Ran 家族基因的克隆、生物信息学分析及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第129-130页 |
| 4 龙眼体胚发生过程中 Ran 表达调控研究 | 第130-131页 |
| 5 龙眼体胚 Obg1 基因的克隆及其在龙眼体胚发生过程中的表达分析 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-157页 |
| 附录 1 龙眼体胚 Ran 家族基因 cDNA 3'末端和 5'末端序列信息 | 第157-161页 |
| 附录 2 GenBank 上登录的龙眼体胚 Ran 家族基因 cDNA 和 DNA 序列信息 | 第161-169页 |
| 在学博士期间发表论文情况与参加学术会议情况 | 第169-170页 |
| 致谢 | 第170页 |
