论文目录 | |
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 插图索引 | 第10-11页 |
| 附表索引 | 第11-12页 |
| 目录 | 第12-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-31页 |
| · miRNA研究的现状与展望 | 第16-22页 |
| · miRNA的发现及命名规则 | 第16页 |
| · miRNA的特征 | 第16页 |
| · miRNA的合成过程及作用机制 | 第16-19页 |
| · miRNAs研究的临床意义 | 第19-20页 |
| · miRNA的生物信息学分析 | 第20-22页 |
| · 肿瘤治疗新靶点：转录因子FOXM1 | 第22-24页 |
| · FOXM1的功能 | 第22-24页 |
| · FOXM1与肿瘤 | 第24页 |
| · 上皮间质转化(EMT)与肿瘤侵袭转移的关系及其相关机制 | 第24-29页 |
| · EMT相关生物标记 | 第25页 |
| · EMT的发生机制 | 第25-29页 |
| · 本文构想 | 第29-31页 |
| 第2章 miR-134影响人乳腺肿瘤细胞上皮及间质表型 | 第31-40页 |
| · 前言 | 第31页 |
| · 实验材料和试剂 | 第31-32页 |
| · 细胞 | 第31页 |
| · 其他材料和试剂 | 第31-32页 |
| · 实验仪器 | 第32页 |
| · 实验方法 | 第32-36页 |
| · 细胞培养 | 第32页 |
| · 总RNA的提取及反转录 | 第32-34页 |
| · miRNA反转录及定量PCR | 第34-35页 |
| · 细胞转染 | 第35-36页 |
| · Transwell实验步骤 | 第36页 |
| · 实验结果分析与讨论 | 第36-39页 |
| · miR-134在乳腺癌上皮细胞株中表达水平高 | 第36-37页 |
| · miR-134抑制乳腺癌细胞EMT过程 | 第37-39页 |
| · 小结 | 第39-40页 |
| 第3章 miRNA-134影响人肺癌细胞的上皮及间质表型 | 第40-49页 |
| · 前言 | 第40页 |
| · 实验材料和试剂 | 第40-41页 |
| · 细胞 | 第40页 |
| · 其他材料和试剂 | 第40-41页 |
| · 实验仪器 | 第41页 |
| · 实验方法 | 第41-45页 |
| · 细胞培养 | 第41页 |
| · Western实验 | 第41-45页 |
| · 实验结果分析与讨论 | 第45-48页 |
| · miR-134在人肺癌上皮细胞中表达水平高 | 第45页 |
| · miR-134抑制人肺癌细胞EMT过程 | 第45-48页 |
| · 小结 | 第48-49页 |
| 第4章 miRNA-134影响体外人肺癌细胞EMT过程 | 第49-55页 |
| · 前言 | 第49页 |
| · 实验材料和试剂 | 第49-50页 |
| · 细胞 | 第49页 |
| · 其他材料和试剂 | 第49-50页 |
| · 实验仪器 | 第50页 |
| · 实验方法 | 第50-51页 |
| · 细胞培养及TGF-β诱导 | 第50-51页 |
| · 荧光定量PCR | 第51页 |
| · 细胞转染 | 第51页 |
| · Transwell实验 | 第51页 |
| 4.3.5 Western Blot实验 | 第51页 |
| · 实验结果分析与讨论 | 第51-54页 |
| · miR-134在TGF-β诱导的A549细胞EMT过程中表达水平下调 | 第51-53页 |
| · miR-134影响A549细胞的EMT过程 | 第53-54页 |
| · 小结 | 第54-55页 |
| 第5章 miRNA-134通过调控转录因子FOXM1影响人肺癌细胞的EMT过程 | 第55-74页 |
| · 前言 | 第55页 |
| · 实验材料和试剂 | 第55-57页 |
| · 细胞 | 第55-56页 |
| · 其他材料和试剂 | 第56页 |
| · 实验仪器 | 第56-57页 |
| · 实验方法 | 第57-65页 |
| · 荧光定量PCR | 第57页 |
| · Transwell实验 | 第57页 |
| 5.3.3 Western Blot实验 | 第57页 |
| · 腺病毒制备与纯化 | 第57-59页 |
| · 病毒感染 | 第59-60页 |
| · 计算机软件分析 | 第60页 |
| · 质粒构建 | 第60-64页 |
| · 荧光素酶测定 | 第64-65页 |
| · 实验结果分析与讨论 | 第65-72页 |
| 5.4.1 miR-134可以靶定FOXM1 3’UTR | 第65-68页 |
| 5.4.2 miR-134通过介导FOXM1 3’UTR负调控FOXM1 mRNA的转录 | 第68-69页 |
| · TGF-β诱导的A549细胞EMT过程中miR-134抑制FOXM1蛋白的表达水平 | 第69-70页 |
| · 高表达FOXM1可以挽救miR-134对TGF-β诱导的A549细胞EMT转化过程 | 第70-71页 |
| · 低表达FOXM1可以抑制TGF-β诱导的A549细胞EMT过程 | 第71-72页 |
| · 小结 | 第72-74页 |
| 第6章 miRNA-134是人肺癌转移的潜在标志物 | 第74-78页 |
| · 前言 | 第74页 |
| · 材料和试剂 | 第74-75页 |
| · 肿瘤切片 | 第74-75页 |
| · 其他材料及试剂 | 第75页 |
| · 引物 | 第75页 |
| · 实验设备 | 第75页 |
| · 实验方法 | 第75-76页 |
| · 从石蜡切片中提取RNA | 第75-76页 |
| · 荧光定量PCR | 第76页 |
| · 实验结果分析与讨论 | 第76-77页 |
| · 小结 | 第77-78页 |
| 第7章 多能性肿瘤干细胞NT2/D1分化过程中miR-134减弱转录因子FOXM1的表达水平 | 第78-92页 |
| · 前言 | 第78-79页 |
| · 实验材料及试剂 | 第79-80页 |
| · 细胞 | 第79页 |
| · 抗体 | 第79页 |
| · 引物 | 第79-80页 |
| · 其他材料及试剂 | 第80页 |
| · 实验设备 | 第80-81页 |
| · 实验方法 | 第81-85页 |
| · NT2细胞培养及RA诱导 | 第81页 |
| · microRNA的提取、反转录及PCR反应 | 第81-83页 |
| · 流式细胞检测 | 第83页 |
| 7.4.4 Norther blot实验 | 第83-85页 |
| · 实验结果分析与讨论 | 第85-91页 |
| · RA诱导NT2细胞神经分化过程中多能性基因表达水平下调 | 第85-87页 |
| 7.5.2 在RA诱导NT2细胞神经分化的过程中FOXM1 3’UTR介导FOXM1表达水平的下调 | 第87-88页 |
| · 在RA诱导的NT2细胞分化过程中miR-134表达水平下调且可抑制FOXM1蛋白水平 | 第88-90页 |
| · miR-134通过不完全匹配FOXM1的3’非翻译区对其直接调控 | 第90-91页 |
| · 小结 | 第91-92页 |
| 结论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-109页 |
| 附录A 读学位期间所发表的学术论文目录 | 第109-110页 |
| 附录B 英文缩写 | 第110-111页 |
| 附录C 用缓冲液和试剂配方 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112
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