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平榛WRKY转录因子的克隆与功能鉴定

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平榛WRKY转录因子的克隆与功能鉴定
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-18页
第一章 绪论第18-32页
  · 引言第18-28页
    · 研究背景第18-21页
    · 植物抗寒研究进展第21-24页
    · WRKY 转录因子概述第24-27页
    · 高通量测序技术第27-28页
  · 研究目的和意义第28-30页
  · 研究目标和主要研究内容第30-31页
    · 研究目标第30页
    · 研究主要内容第30-31页
  · 研究技术路线第31-32页
第二章 平榛转录组中与低温胁迫相关的 WRKY 转录因子的筛选及克隆第32-43页
  · 试验材料第32-34页
    · 植物材料第32-33页
    · 生化试剂第33-34页
  · 试验方法第34-37页
    · 平榛花芽的转录组样品测序流程第34页
    · RNA 提取方法第34-35页
    · 平榛转录组 WRKY 转录因子筛选第35-36页
    · WRKY 转录因子的克隆第36-37页
  · 结果与分析第37-42页
    · RNA 提取结果第37-38页
    · 转录组 Unigenes 注释第38-39页
    · 低温胁迫下 WRKY 筛选第39-40页
    · 平榛 WRKY cDNA 全长的获得第40-42页
  · 小结第42-43页
第三章 平榛 WRKY 家族基因的序列分析及功能鉴定第43-70页
  · 试验材料第43-44页
    · 植物材料第43页
    · 主要试剂第43页
    · 主要仪器第43-44页
  · 实验方法第44-52页
    · RNA 提取第44页
    · cDNA 第一链的合成第44-45页
    · cDNA 末端快速扩增第45页
    · 凝胶中回收 DNA 片断第45-46页
    · 回收片段与 PMD-18 T 载体的连接第46页
    · 连接产物转化大肠杆菌第46页
    · 细菌中质粒 DNA 的制备第46-47页
    · 重组质粒的筛选与鉴定、测序第47页
    · WRKY 编码氨基酸的相似性及系统进化发育分析第47页
    · 荧光定量 PCR 表达分析第47-48页
    · WRKY-GFP 表达载体的构建第48-49页
    · WRKY 植物表达载体的构建第49-50页
    · 农杆菌感受态制备、转化与培养活化第50-51页
    · 农杆菌介导的拟南芥转化第51页
    · PCR 检测第51-52页
  · 结果与分析第52-68页
    · 平榛 WRKY 家族基因的序列分析第52-56页
    · WRKY 编码氨基酸的相似性及系统进化发育分析第56-59页
    · 平榛 WRKY 家族基因的核定位预测分析第59-61页
    · 平榛 WRKY 家族基因在自然越冬条件下的荧光定量分析第61-62页
    · 平榛 WRKY 基因 4℃低温处理不同时间下的荧光定量分析第62-63页
    · 平榛 WRKY 基因在盐、旱胁迫下的表达分析第63-65页
    · WRKY 在平榛不同组织中的表达分析第65-66页
    · WRKY-GFP 融合蛋白在洋葱表皮中的表达分析第66页
    · 植物表达载体构建及转基因株系的 PCR 鉴定第66-67页
    · 低温处理下野生型和转基因拟南芥的表型差异第67-68页
  · 小结第68-70页
第四章 平榛 MAPK 基因的克隆及表达分析第70-84页
  · 材料与方法第70-71页
    · 试验材料第70页
    · 主要试剂第70页
    · 主要仪器第70页
    · 实验方法第70-71页
  · 结果与分析第71-82页
    · 平榛 ChMAPKKK 及 ChMAPKK 全长基因的获得及序列分析第71-75页
    · 氨基酸区段的相似性分析及系统进化树分析第75-77页
    · 平榛 ChMAPKKK 及 ChMAPKK 在自然越冬条件下的表达分析第77-78页
    · 平榛 ChMAPKKK 及 ChMAPKK 基因 4℃处理后的表达分析第78-79页
    · 平榛 ChMAPKKK 及 ChMAPKK 基因在旱、盐胁迫后的表达分析第79-80页
    · ChMAPKKK 及 ChMAPKK 基因在平榛不同组织中的表达分析第80页
    · ChMAPKKK 及 ChMAPKK 与 WRKY、DHN 的调控关系分析第80-82页
  · 小结第82-84页
第五章 非生物胁迫下平榛及低温胁迫下转基因拟南芥中生化物质的变化第84-102页
  · 试验材料第84页
  · 试验方法第84-87页
    · 电导率测定方法第84页
    · 可溶性蛋白的测定方法第84-85页
    · 超氧化物歧化酶的测定方法第85-86页
    · 过氧化物酶的测定方法第86页
    · 丙二醛的测定方法第86页
    · 过氧化氢酶的测定方法第86-87页
    · 脯氨酸含量的测定测定方法第87页
  · 结果与分析第87-100页
    · 平榛在自然越冬条件及非生物胁迫下的生化物质分析第87-96页
    · 低温处理后转基因和野生型拟南芥的生化物质分析第96-100页
  · 小结第100-102页
第六章 结论与讨论第102-108页
  · 结论第102-103页
  · 讨论第103-106页
    · 平榛中 WRKY 在自然越冬条件以及人工低温处理下的表达模式第103-104页
    · 平榛中 ChMAPKKK 及 ChMAPKK 与 WRKY、DHN 的调控关系第104-105页
    · 转基因拟南芥在低温胁迫下的生化指标变化第105-106页
  · 本研究的特色与创新之处第106页
  · 今后进一步研究的设想第106-108页
参考文献第108-117页
附录第117-129页
在读期间的学术研究第129-131页
致谢第131页

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