论文目录 | |
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 英文缩略语 | 第16-21页 |
| 第一部分:脓毒症大鼠急性肺损伤和紧密连接破坏及普通肝素的治疗作用研究 | 第21-43页 |
| 1 前言 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-31页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.1 动物 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 实验动物分组 | 第25页 |
| 2.2.2 实验模型的建立及标本留取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 肺组织HE染色及肺损伤评分 | 第26-27页 |
| 2.2.4 支气管肺泡灌洗液IL-6含量测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 肺组织湿干重比测定 | 第28页 |
| 2.2.6 肺组织伊文氏蓝(evan blue dye,EBD)含量测定 | 第28页 |
| 2.2.7 透射电镜观察肺组织超微结构 | 第28-29页 |
| 2.2.8 Western blot检测肺组织紧密连接蛋白claudin-5、occludin、ZO-1表达 | 第29-30页 |
| 2.2.9 免疫组织化学检测肺组织紧密连接蛋白claudin-5、occludin、ZO-1的表达 | 第30-31页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第31页 |
| 3 结果 | 第31-40页 |
| 3.1 动物模型观察 | 第31-32页 |
| 3.2 肺组织的病理学表现 | 第32-33页 |
| 3.3 大鼠支气管肺泡灌洗液中IL-6含量 | 第33-34页 |
| 3.4 肺湿干重比 | 第34-35页 |
| 3.5 伊文氏蓝在大鼠肺血管的渗漏 | 第35页 |
| 3.6 肺组织气血屏障超微结构 | 第35-36页 |
| 3.7 Western blot检测大鼠肺组织claudin-5、occludin、ZO-1表达 | 第36-37页 |
| 3.8 免疫组织化学染色检测大鼠肺组织claudin-5、occludin、ZO-1的表达 | 第37-40页 |
| 3.8.1 claudin-5在大鼠肺组织的免疫组织化学染色 | 第37-38页 |
| 3.8.2 occludin在大鼠肺组织的免疫组织化学染色 | 第38-39页 |
| 3.8.3 ZO-1在大鼠肺组织的免疫组织化学染色 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 第二部分:普通肝素通过抑制ERK1/2 MAPK活化减轻脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞渗漏和紧密连接损伤 | 第43-63页 |
| 1 前言 | 第43-44页 |
| 2 材料和方法 | 第44-51页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第44-46页 |
| 2.1.1 材料 | 第44页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第45-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-51页 |
| 2.2.1 细胞培养方法 | 第46页 |
| 2.2.2 细胞分组处理方法 | 第46页 |
| 2.2.3 测定HLMVECs的跨内皮细胞电阻TEER | 第46-47页 |
| 2.2.4 测定HLMVECs单层细胞对FITC-dextran的通透性 | 第47页 |
| 2.2.5 透射电镜观察HLMVECs紧密连接超微结构 | 第47-48页 |
| 2.2.6 HLMVECs上清IL-6含量测定 | 第48-49页 |
| 2.2.7 Western blot检测HLMVECs claudin-5、occludin、ZO-1、p-ERK1/2、ERK1/2的表达 | 第49-51页 |
| 2.2.8 统计学分析 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-60页 |
| 3.1 HLMVECs跨内皮细胞电阻TEER的测定 | 第51页 |
| 3.2 LPS诱导HLMVECs跨内皮细胞电阻TEER降低 | 第51-52页 |
| 3.3 HLMVECs单层细胞对FITC-dextran的通透系数Pd值 | 第52-53页 |
| 3.4 HLMVECs紧密连接的超微结构 | 第53-55页 |
| 3.5 HLMVECs上清中IL-6的含量 | 第55页 |
| 3.6 Western blot检测HLMVECs claudin-5,occludin,ZO-1,Phospho-p44/42 MAPK(ERK1/2),p44/42 MAPK (ERK1/2)的表达 | 第55-60页 |
| 3.6.1 不同浓度LPS对HLMVECs紧密连接蛋白claudin-5,occludin,ZO-1表达的影响 | 第55-57页 |
| 3.6.2 普通肝素减轻LPS诱导的HLMVECs紧密连接蛋白claudin-5,occludin,ZO-1低表达 | 第57-58页 |
| 3.6.3 普通肝素抑制LPS诱导的HLMVECs ERK 1/2 MAPK磷酸化 | 第58页 |
| 3.6.4 U0126减轻LPS诱导的HLMVECs紧密连接蛋白claudin-5,occludin,ZO-1低表达 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 综述 | 第69-80页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 个人简历 | 第82页 |
