论文目录 | |
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 英文缩略词 | 第14-18页 |
| 第一部分 :miR-196a促进胶质瘤细胞的增殖和干细胞性并促进其向间质型转化的相关分子机制 | 第18-38页 |
| 1 前言 | 第18-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-28页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.1 主要试剂和材料 | 第21-22页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.2 慢病毒感染 | 第23页 |
| 2.2.3细胞生物学功能实验 | 第23-24页 |
| 2.2.4 细胞蛋白质提取 | 第24-25页 |
| 2.2.5 Bradford蛋白质浓度的测定 | 第25页 |
| 2.2.6 Western印迹凝胶电泳 | 第25-26页 |
| 2.2.7 蛋白质转移膜 | 第26页 |
| 2.2.8 抗体杂交 | 第26-28页 |
| 3 结果 | 第28-35页 |
| 3.1 建立稳定过表达和抑制表达miR-196a的细胞系 | 第28页 |
| 3.2 过表达miR-196a促进胶质瘤细胞的增殖 | 第28-29页 |
| 3.3 过表达miR-196a促进细胞周期进展 | 第29-30页 |
| 3.4 miR-196a调节神经胶质瘤细胞周期相关蛋白的表达 | 第30-31页 |
| 3.5 细胞侵袭和迁移实验 | 第31页 |
| 3.6 miR-196a调节神经胶质瘤细胞EMT相关蛋白的表达 | 第31页 |
| 3.7 干细胞成球实验 | 第31-33页 |
| 3.8 miR-196aI转染后的胶质干瘤细胞的干细胞基因荧光鉴定 | 第33页 |
| 3.9 miR-196aI转染后的胶质干瘤细胞中干细胞相关蛋白的表达 | 第33-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 第二部分 :miR-196a靶向调控GATA6 影响胶质瘤细胞生物学行为 | 第38-54页 |
| 1 前言 | 第38-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-47页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第39-41页 |
| 2.1.1 主要试剂和材料 | 第39-40页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-47页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第41页 |
| 2.2.2 细胞全基因组基因表达谱 | 第41页 |
| 2.2.3 荧光素酶报告实验 | 第41-42页 |
| 2.2.4 质粒转染 | 第42页 |
| 2.2.5 建立人裸鼠胶质瘤移植模型 | 第42-43页 |
| 2.2.6 细胞生物学功能实验 | 第43-44页 |
| 2.2.7 细胞蛋白质提取 | 第44页 |
| 2.2.8 Bradford蛋白质浓度的测定 | 第44页 |
| 2.2.9 Western印迹凝胶电泳 | 第44-45页 |
| 2.2.10 蛋白质转移膜 | 第45-46页 |
| 2.2.11 抗体杂交 | 第46-47页 |
| 3 结果 | 第47-53页 |
| 3.1 通过生物信息学和芯片结果分析找到miR-196a的候选靶基因 | 第47页 |
| 3.2 通过数据验证GATA6 在不同胶质瘤表达水平 | 第47-49页 |
| 3.3 通过实验验证GATA6是miR-196a的靶基因 | 第49页 |
| 3.4 挽救实验 | 第49-51页 |
| 3.4.1 GATA6 过表达可部分逆转miR-196a诱导的细胞增殖 | 第50页 |
| 3.4.2 GATA6 过表达可部分逆转miR-196a诱导的EMT | 第50页 |
| 3.4.3 GATA6 过表达可部分逆转胶质瘤细胞干性 | 第50-51页 |
| 3.5 GATA6 过表达对裸鼠皮下肿瘤形成的影响 | 第51-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 综述 | 第59-75页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简介 | 第77页 |
