论文目录 | |
摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第10-14页 |
1 前言 | 第14-16页 |
2 材料和方法 | 第16-33页 |
2.1 材料与试剂 | 第16-20页 |
2.1.1 细胞系 | 第16页 |
2.1.2 质粒、小干扰RNA | 第16页 |
2.1.3 主要试剂 | 第16-19页 |
2.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-33页 |
2.2.1 细胞复苏 | 第20-21页 |
2.2.2 细胞传代 | 第21-22页 |
2.2.3 细胞冻存 | 第22-23页 |
2.2.4 细胞转染和干扰 | 第23-24页 |
2.2.5 RNA的提取 | 第24-25页 |
2.2.6 RNA逆转录为c DNA | 第25页 |
2.2.7 Real-time PCR | 第25-26页 |
2.2.8 总蛋白提取,浓度测定及配样 | 第26-27页 |
2.2.9 核浆蛋白提取,浓度测定及配样 | 第27-28页 |
2.2.10 蛋白免疫印迹(Western bloting) | 第28-30页 |
2.2.11 细胞免疫荧光实验 | 第30页 |
2.2.12 FISH实验 | 第30-31页 |
2.2.13 统计学分析 | 第31-33页 |
3 结果 | 第33-42页 |
3.1 LKB1 在正常支气管上皮细胞和肺癌细胞系中的表达 | 第33页 |
3.2 LKB1 上调p-YAP,抑制hTERC mRNA的表达 | 第33-35页 |
3.2.1 LKB1 质粒能特异性上调LKB1 mRNA和蛋白的表达 | 第33-34页 |
3.2.2 LKB1 上调p-YAP,抑制hTERC mRNA的表达 | 第34-35页 |
3.3 沉默LKB1 下调p-YAP,上调hTERC的表达 | 第35-36页 |
3.3.1 LKB1 siRNA能特异性下调LKB1mRNA和蛋白的表达 | 第35页 |
3.3.2 沉默LKB1 下调p-YAP,上调hTERC的表达 | 第35-36页 |
3.4 LKB1 可以促进YAP出核 | 第36-39页 |
3.4.1 LKB1 蛋白能够磷酸化YAP,促进其出核 | 第36-37页 |
3.4.2 转染LKB1 质粒和siLKB1 干扰体后YAP蛋白核浆分布情况 | 第37-39页 |
3.5 干扰YAP后,抑制hTERC mRNA的表达和异型扩增 | 第39-42页 |
4 讨论 | 第42-45页 |
5 结论 | 第45-46页 |
本研究创新性的自我评价 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
综述 | 第51-60页 |
参考文献 | 第55-60页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
个人简历 | 第62页 |