论文目录 | |
| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-15页 |
| 序言 | 第15-17页 |
| 第一部分: IFI35抑制内皮细胞的增殖和迁移 | 第17-37页 |
| 1 材料 | 第17-21页 |
| 1.1 常用仪器及耗材 | 第17-18页 |
| 1.2 试剂及缓冲液 | 第18-19页 |
| 1.3 常用试剂配制 | 第19页 |
| 1.4 统计及分析软件 | 第19-21页 |
| 2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第21页 |
| 2.2 IFI35腺病毒合成 | 第21页 |
| 2.3 细胞总RNA的提取与测定 | 第21-22页 |
| 2.4 cDNA的合成与荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 2.5 Western blot蛋白检测 | 第23-27页 |
| 2.6 siRNA转染 | 第27页 |
| 2.7 CCK-8细胞增殖实验 | 第27-28页 |
| 2.8 Edu染色细胞增殖实验 | 第28-29页 |
| 2.9 细胞周期检测 | 第29页 |
| 2.10 Transwell小室细胞迁移实验 | 第29-30页 |
| 2.11 划痕实验 | 第30页 |
| 2.12 统计分析 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 内皮细胞中成功过表达和抑制IFI35的表达 | 第31页 |
| 3.2 IFI35抑制内皮细胞的增殖 | 第31-33页 |
| 3.3 IFI35抑制细胞周期从G_0/G_1期向S期转换 | 第33-34页 |
| 3.4 IFI35抑制内皮细胞的迁移 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-37页 |
| 第二部分: IFI35通过抑制NF-κB信号通路调控内皮细胞增殖和迁移 | 第37-63页 |
| 1 材料 | 第37-40页 |
| 1.1 材料和仪器 | 第37页 |
| 1.2 细胞培养 | 第37页 |
| 1.3 常用试剂 | 第37-39页 |
| 1.4 溶液配制及抗性平板制作 | 第39页 |
| 1.5 统计及分析软件 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-52页 |
| 2.1 免疫荧光染色 | 第40页 |
| 2.2 细胞核蛋白、胞质蛋白分离提取 | 第40-41页 |
| 2.3 IFI35及其结构域缺失质粒构建 | 第41-48页 |
| 2.4 双荧光素酶报告实验 | 第48-52页 |
| 3 结果 | 第52-62页 |
| 3.1 IF135抑制NF-κB信号通路激活 | 第52-54页 |
| 3.2 抑制NF-κB信号通路可以抑制IFI35介导的内皮细胞增殖 | 第54页 |
| 3.3 抑制NF-κB信号通路可以抑制IFI35介导的内皮细胞迁移 | 第54-55页 |
| 3.4 IFI35通过其NID1结构域与Nmi相互作用抑制NF-κB信号通路 | 第55-59页 |
| 3.5 Nmi参与了IFI35对内皮细胞增殖能力的抑制 | 第59-60页 |
| 3.6 Nmi参与了IFI35对内皮细胞迁移能力的抑制 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-63页 |
| 第三部分: IFI35对损伤血管再内皮化以及内膜新生的影响 | 第63-76页 |
| 1 材料 | 第63-66页 |
| 1.1 小鼠 | 第63页 |
| 1.2 材料和仪器 | 第63-64页 |
| 1.3 试剂 | 第64页 |
| 1.4 统计及分析软件 | 第64-66页 |
| 2 实验方法 | 第66-70页 |
| 2.1 建立小鼠颈动脉导丝拉伤模型 | 第66-67页 |
| 2.2 颈动脉内病毒转染 | 第67页 |
| 2.3 小鼠血管组织蛋白提取及Western Blot检测 | 第67-68页 |
| 2.4 Evans Blue染色 | 第68页 |
| 2.5 血管石蜡切片与HE染色 | 第68-70页 |
| 3 结果 | 第70-74页 |
| 3.1 腺病毒转染成功在损伤血管局部过表达IFI35 | 第70-71页 |
| 3.2 过表达IFI35抑制损伤血管内皮细胞的增殖 | 第71页 |
| 3.3 过表达IFI35延迟了损伤血管的再内皮化 | 第71-72页 |
| 3.4 过表达IFI35促进新生血管内膜的过度增生 | 第72-74页 |
| 4 讨论 | 第74-76页 |
| 总结与展望 | 第76-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 综述 | 第86-111页 |
| 参考文献 | 第100-111页 |
| 作者简介及博士在读期间所取得的科研成果 | 第111页 |
