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猪流行性腹泻病毒S蛋白抗原表位鉴定及受体结合域的初步筛选

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猪流行性腹泻病毒S蛋白抗原表位鉴定及受体结合域的初步筛选
论文目录
 
摘要第1-8页
Abstract第8-18页
第一章 绪论第18-42页
  · PED概述第18-22页
    · 流行病学第18-19页
    · 临床症状第19页
    · 发病机理第19-20页
    · 病理变化第20页
    · 诊断第20-21页
    · 组织嗜性和免疫第21页
    · 防治第21-22页
  · PEDV的生物学特性第22-27页
    · PEDV的形态结构第22-23页
    · PEDV理化特性第23页
    · PEDV抗原性第23页
    · PEDV细胞培养特性第23页
    · PEDV病毒学学分类地位第23-24页
    · PEDV的基因组结构和复制第24-26页
    · PEDV基因组编码蛋白及其功能第26-27页
  · PEDV及其它冠状病毒B细胞抗原表位和细胞受体的研究进展第27-32页
    · PEDV及其它冠状病毒S蛋白B细胞抗原表位的研究进展第28-29页
    · PEDV及其它冠状病毒受体蛋白的研究进展第29-31页
    · PEDV及其它冠状病毒受体结合域的研究进展第31-32页
  · 抗原表位研究方法第32-38页
    · B细胞抗原表位研究方法第32-37页
    · T细胞表位研究方法第37页
    · 抗原表位研究的应用及意义第37-38页
  · 病毒受体结合域研究的方法第38-41页
    · 常规方法第38-40页
    · 生物物理学方法第40-41页
  · 本研究的目的与意义第41-42页
第二章 PEDV S基因的克隆及其分子特性分析第42-52页
  · 材料与方法第43-46页
    · 病毒和细胞第43页
    · 质粒与菌种第43页
    · 生化试剂第43页
    · 主要仪器第43-44页
    · PEDV的细胞培养第44页
    · PEDV病毒RNA的提取第44页
    · cDNA合成的引物第44-45页
    · Sa、Sb和Sc片段的克隆第45页
    · S基因及其编码蛋白的分子特性分析第45-46页
  · 结果第46-50页
    · PEDV的细胞培养第46页
    · Sa、Sb和Sc片段的RT-PCR扩增第46-47页
    · PEDV S基因序列分析及分子特性第47-49页
    · S蛋白S1 和S2 功能区的划分第49-50页
  · 讨论第50-52页
第三章 PEDV S蛋白S1 区B细胞抗原表位的筛选和鉴定第52-65页
  · 材料与方法第53-58页
    · 质粒和菌种第53页
    · 试剂盒与主要生化试剂第53页
    · 实验动物与血清第53页
    · 仪器设备第53页
    · PEDV S1 基因特异性肽库的构建第53-56页
    · S1 基因特异性肽库的生物淘选及展示表位的鉴定第56页
    · S1P1、S1P2 和S1P3 抗原短肽ELISA与Western blot分析第56-57页
    · S1P1、S1P2 和S1P3 抗原短肽的免疫原性分析第57-58页
  · 结果第58-64页
    · PEDV S1 基因PCR扩增第58-59页
    · PEDV S1 基因DNaseI消化第59页
    · S1 基因特异性肽库鉴定第59-60页
    · S1 基因特异性肽库生物淘选第60-61页
    · 抗原短肽ELISA和Western blot分析第61-62页
    · 抗原短肽的免疫原性分析第62-64页
  · 讨论第64-65页
第四章 PEDV S蛋白S1 区原核表达及其免疫优势区鉴定第65-75页
  · 材料与方法第66-69页
    · 质粒、细胞和菌种第66页
    · 试剂盒与生化试剂第66页
    · 实验动物和血清第66页
    · 仪器设备第66页
    · S1A、S1B、S1C和S1D片段的原核表达与纯化第66-68页
    · S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白的免疫活性分析第68页
    · S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白单因子血清制备及其免疫活性分析第68页
    · S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白单因子血清的病毒中和试验第68-69页
    · PEDV S蛋白S1D区的序列比对分析第69页
  · 结果第69-74页
    · S1A、S1B、S1C和S1D片段PCR扩增第69-70页
    · S1A、S1B、S1C和S1D片段的表达与纯化第70页
    · S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白的免疫活性分析第70-71页
    · S1A、S1B、S1C和S1D重组蛋白单因子血清的免疫活性分析第71-73页
    · S1D重组蛋白单因子血清中和活性第73页
    · PEDV S蛋白S1D区序列比对分析第73-74页
  · 讨论第74-75页
第五章 PEDV S蛋白S1D区单克隆抗体的制备及表位鉴定第75-89页
  · 材料与方法第76-81页
    · 质粒、菌种和病毒第76页
    · 试剂盒与主要生化试剂第76页
    · 实验动物第76页
    · 仪器设备第76页
    · 单克隆抗体制备第76-77页
    · McAbs免疫活性与中和活性鉴定第77-78页
    · S1D单克隆抗体对PEDV S1 基因特异性肽库的生物淘选及噬菌体ELISA第78页
    · S1D淘选表位区(MER)的原核表达与表位鉴定第78-80页
    · S1D5 和S1D6 抗原表位免疫原性鉴定第80页
    · S1D5 和S1D6 表位的核心氨基酸鉴定第80-81页
  · 结果第81-87页
    · S1D重组蛋白纯化第81页
    · S1D单克隆抗体亚型鉴定和腹水效价测定第81-82页
    · S1D单克隆抗体免疫活性和中和活性的鉴定第82-83页
    · S1 基因特异性肽库的生物淘选及噬菌体ELISA第83页
    · S1D淘选表位区MER抗原表位的精确定位第83-85页
    · S1D5 和S1D6 抗原表位免疫原性鉴定第85-87页
    · S1D5 和S1D6 表位的核心氨基酸鉴定第87页
  · 讨论第87-89页
第六章 PEDV S蛋白受体结合域的筛选与鉴定第89-101页
  · 材料与方法第90-93页
    · 质粒、细胞、菌种和肽库第90页
    · 试剂盒与主要生化试剂第90页
    · 实验动物第90页
    · 仪器设备第90-91页
    · pAPN对PEDV S1 基因特异性肽库的淘选第91页
    · pAPN多克隆血清制备第91页
    · MRR重组蛋白的真核表达第91-92页
    · MRR重组蛋白的免疫活性分析第92页
    · MRR重组蛋白与pAPN相互作用检测第92-93页
  · 结果第93-99页
    · PEDV S1 基因特异性肽库的pAPN淘选第93-95页
    · MRR基因重组pFastBacHTB真核表达载体的构建第95-96页
    · MRR基因重组杆状病毒制备及鉴定第96-97页
    · MRR重组蛋白的表达与免疫活性鉴定第97页
    · MRR重组蛋白与pAPN的相互作用第97-99页
  · 讨论第99-101页
第七章 全文结论第101-102页
参考文献第102-117页
致谢第117-118页
作者简历第118-119页

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