论文目录 | |
| 中文摘要 | 第1-15页 |
| 英文摘要 | 第15-22页 |
| 第一部分 PTEN敲减SACC-83 细胞模型的建立及差异表达基因的筛选与验证 | 第22-40页 |
| (一)前言 | 第22-23页 |
| (二)材料和方法 | 第23-28页 |
| 1.实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1 细胞株、菌种及质粒 | 第23-24页 |
| 1.2 实验仪器及设备 | 第24页 |
| 1.3 实验试剂及配制 | 第24页 |
| 2.实验方法 | 第24-28页 |
| 2.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.2 建立PTEN敲减的SACC-83细胞模型 | 第25页 |
| 2.3 细胞收集及基因芯片筛选 | 第25页 |
| 2.4 实时荧光定量PCR | 第25-28页 |
| 2.5 统计学分析 | 第28页 |
| (三)结果 | 第28-33页 |
| 1.差异表达基因的筛选 | 第28页 |
| 2.差异表达基因的GO功能分析 | 第28-29页 |
| 3.差异表达基因的KEGG信号通路富集分析 | 第29-30页 |
| 4.差异表达基因的聚类热图分析 | 第30页 |
| 5.差异表达基因在人类肿瘤中的表达情况 | 第30-32页 |
| 6.实时荧光定量PCR验证部分差异表达基因 | 第32-33页 |
| (四)讨论 | 第33-36页 |
| (五)结论 | 第36-37页 |
| (六)参考文献 | 第37-40页 |
| 第二部分 SMC4和WDR66 在唾液腺腺样囊性癌组织中表达及与PTEN表达的相关性 | 第40-59页 |
| (一)前言 | 第40-42页 |
| (二)材料和方法 | 第42-45页 |
| 1.实验材料 | 第42-44页 |
| 1.1 病例资料及临床病理特征 | 第42-43页 |
| 1.2 实验仪器及设备 | 第43页 |
| 1.3 实验试剂及配制 | 第43-44页 |
| 2.实验方法 | 第44-45页 |
| 2.1 免疫组织化学 | 第44页 |
| 2.2 免疫组化结果判断标准 | 第44-45页 |
| 2.3 统计学分析 | 第45页 |
| (三)结果 | 第45-50页 |
| 1.PTEN下游靶基因在正常唾液腺中的表达及定位 | 第45-46页 |
| 2.SMC4 在三型唾液腺腺样囊性癌中的表达及分布 | 第46页 |
| 3.WDR66在PTEN表达的筛状型/管状型唾液腺腺样囊性癌中的表达及分布 | 第46-48页 |
| 4.WDR66在PTEN缺失的实性型唾液腺腺样囊性癌中的表达及分布 | 第48页 |
| 5.SMC4和WDR66与PTEN在唾液腺腺样囊性癌中表达的相关性 | 第48-49页 |
| 6.SMC4和WDR66 与唾液腺腺样囊性癌患者生存率的相关性分析 | 第49-50页 |
| (四)讨论 | 第50-53页 |
| (五)结论 | 第53-54页 |
| (六)参考文献 | 第54-59页 |
| 第三部分 PTEN负调控WDR66对唾液腺腺样囊性癌细胞侵袭及迁移的机制研究 | 第59-83页 |
| (一)前言 | 第59-60页 |
| (二)材料和方法 | 第60-67页 |
| 1.实验材料 | 第60-62页 |
| 1.1 细胞株、菌种及质粒 | 第60页 |
| 1.2 实验仪器和设备 | 第60-61页 |
| 1.3 实验试剂及配制 | 第61-62页 |
| 2.实验方法 | 第62-67页 |
| 2.1 细胞培养 | 第62页 |
| 2.2 细胞转染 | 第62-63页 |
| 2.3 细胞克隆形成实验 | 第63页 |
| 2.4 CCK-8法检测细胞增殖 | 第63页 |
| 2.5 Transwell细胞体外侵袭实验 | 第63-64页 |
| 2.6 Transwell细胞体外迁移实验 | 第64页 |
| 2.7 划痕实验 | 第64页 |
| 2.8 实时荧光定量PCR | 第64-65页 |
| 2.9 免疫印迹 (Western Blot,WB) | 第65-66页 |
| 2.10 免疫共沉淀实验 | 第66-67页 |
| 2.11 统计学分析 | 第67页 |
| (三)结果 | 第67-73页 |
| 1.PTEN调控靶基因WDR66 的作用机制 | 第67页 |
| 2.敲减WDR66 序列的筛选与鉴定 | 第67-68页 |
| 3.敲减WDR66对SACC-83 细胞增殖能力的影响 | 第68-69页 |
| 4.敲减WDR66对SACC-83细胞的侵袭能力的影响 | 第69-70页 |
| 5.敲减WDR66对SACC-83细胞的迁移能力的影响 | 第70-71页 |
| 6.敲减WDR66对SACC-83 细胞EMT表型的影响 | 第71-72页 |
| 7.敲减WDR66对SACC-83 细胞获得干性能力的影响 | 第72-73页 |
| (四)讨论 | 第73-78页 |
| (五)结论 | 第78-79页 |
| (六)参考文献 | 第79-83页 |
| 综述 | 第83-99页 |
| 参考文献 | 第93-99页 |
| 缩略语表 | 第99-100页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
