论文目录 | |
| 致谢 | 第1-6
页 |
| 摘要 | 第6-8
页 |
| Abstract | 第8-10
页 |
| 缩略语表 | 第10-12
页 |
| 目次 | 第12-15
页 |
| 1 绪论 | 第15-42
页 |
| · 双生病毒科的分类、寄主范围及传播介体 | 第16
页 |
| · 双生病毒的基因组结构和功能 | 第16-18
页 |
| · 双生病毒的侵染过程 | 第18-21
页 |
| · 双生病毒的复制和转录 | 第18-20
页 |
| · 双生病毒的运动 | 第20-21
页 |
| · 双生病毒的致病相关因子 | 第21-28
页 |
| · C4 | 第21-23
页 |
| · C2/AC2 | 第23-24
页 |
| · BC1 | 第24-25
页 |
| · BV1 | 第25-26
页 |
| · βC1 | 第26-28
页 |
| · 植物miRNA的研究进展 | 第28-42
页 |
| · 植物microRNA家族及其靶标的进化 | 第28-29
页 |
| · 植物中保守miRNA的系统发生分布 | 第29-30
页 |
| · microRNA的生物合成 | 第30-33
页 |
| · 植物miRNA的作用模式 | 第33-35
页 |
| · 植物microRNA的靶标识别 | 第35-36
页 |
| · 植物microRNA介导的调控范围 | 第36-37
页 |
| · miRNA在植物和病毒在对抗机制竞争中的作用 | 第37-38
页 |
| · miRNA在植物抗病毒防御中的应用 | 第38-40
页 |
| · RNA沉默抑制子影响miRNA代谢 | 第40-42
页 |
| 2 TbCSV与TYLCCNV病害复合体症状差异的遗传决定因子定位 | 第42-71
页 |
| · 材料与方法 | 第43-57
页 |
| · 病毒和植物材料 | 第43
页 |
| · 菌株和载体 | 第43
页 |
| · TbCSV-Y35DNAβ与TYLCCNV-Y10DNAβ4个嵌合体卫星构建 | 第43-45
页 |
| · 嵌合体分子的侵染性克隆构建 | 第45-49
页 |
| · 三亲交配及农杆菌接种 | 第49-51
页 |
| · 植物总DNA提取(CTAB法) | 第51
页 |
| · 地高辛法Southern印迹检测 | 第51-53
页 |
| · 烟草的转化 | 第53-54
页 |
| · 番茄的转化 | 第54-55
页 |
| · 植物总RNA提取 | 第55
页 |
| · northern印迹分析 | 第55-57
页 |
| · 结果与分析 | 第57-68
页 |
| · TbCSV-Y35与TYLCCNV-Y10假重组实验 | 第57-61
页 |
| · 表达Y35βC1转基因植株的症状 | 第61-64
页 |
| · 嵌合体卫星诱导的症状类型分析 | 第64-65
页 |
| · 病毒DNA积累水平分析 | 第65-68
页 |
| · 讨论 | 第68-71
页 |
| 3 烟草曲茎病毒卫星启动子的鉴定 | 第71-86
页 |
| · 材料与方法 | 第71-76
页 |
| · 植物总DNA的制备 | 第71
页 |
| · 载体构建 | 第71-74
页 |
| · 瞬间表达 | 第74
页 |
| · 转基因烟草的PCR鉴定 | 第74
页 |
| · Northern blot分析 | 第74-75
页 |
| · GUS活性的组织化学染色 | 第75
页 |
| · GUS荧光活性分析 | 第75-76
页 |
| · 结果与分析 | 第76-83
页 |
| · βC1ORF启动子表达载体的构建 | 第76-78
页 |
| · 瞬间表达中GUS活性的组织化学检测 | 第78
页 |
| · 瞬间表达中GUS荧光活性分析 | 第78-79
页 |
| · 转基因烟草的获得和分子鉴定 | 第79-81
页 |
| · 转基因普通烟中GUS活性的组织化学分析 | 第81-82
页 |
| · 转基因普通烟中的GUS荧光活性分析和Northern blot分析 | 第82-83
页 |
| · 讨论 | 第83-86
页 |
| 4 TYLCCNV卫星DNA的βC1基因对植物miRNA积累影响的初步研究 | 第86-96
页 |
| · 材料与方法 | 第86-90
页 |
| · 植物材料 | 第86
页 |
| · SDS-PAGE电泳和Western印迹分析 | 第86-88
页 |
| · miRNA芯片实验基本流程 | 第88
页 |
| · 小RNA获得和Northern印迹分析 | 第88-90
页 |
| · 结果与分析 | 第90-93
页 |
| · Western印迹分析植株中βC1蛋白的表达 | 第90-92
页 |
| · Microarray分析miRNA的差异表达 | 第92-93
页 |
| · northern印迹验证特异的miRNA差异表达 | 第93
页 |
| · 讨论 | 第93-96
页 |
| 5 全文小结 | 第96-97
页 |
| 参考文献 | 第97-110
页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第110-111
页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第111-118
页 |
